Алесандра Амесбергер-Фрайтаг

1 Клиничен отдел по рибна медицина, Университет по ветеринарна медицина, Виена, Австрия,

Александър Тичи

2 Платформа за биоинформатика и биостатистика, Университет по ветеринарна медицина, Виена, Австрия,

Мансур Ел-Матбули

1 Клиничен отдел по рибна медицина, Университет по ветеринарна медицина, Виена, Австрия,

Ева Луиш

1 Клиничен отдел по рибна медицина, Университет по ветеринарна медицина, Виена, Австрия,

Свързани данни

Резюме

Регистрационен номер на клинично изпитване GZ 68.205/0135 ‐ WF/V/36/2014.

1. ВЪВЕДЕНИЕ

Съобщава се за характерна поява на депигментация и ерозия на кожата, включваща сензорните пори на главата и страничната линия при няколко семейства морски и сладководни риби (Corrales, Ullal, & Noga, 2009; Gratzek, 1988; Hemdal, 2006; Noga, 2010). Обикновено наричани от любителите като ерозия на главата и страничната линия (HLLE), други имена като болест на дупката в главата (HITH) или депигментация на страничната линия (LLD) се използват в зависимост от основните признаци. Състоянието не само води до обезобразяване на рибата, но също така може да се развие до тежко и накрая смъртоносно заболяване. Сред цихлидите рибите на дискус (Symphysodon sp.) Изглеждат особено податливи (Noga, 2010). Както дивечът, така и дивечът, който се отглежда в стопанства, са високо ценени от професионалните животновъди и любители и са поставени в горния ценови сегмент на декоративната рибна индустрия, което прави засегнатите риби особено нежелани.

Въпреки че се обсъжда значително разнообразие от инфекциозни, хранителни и екологични условия, които причиняват признаците, основната етиология все още е неясна. Информацията разчита най-вече на списания за любителите на аквариума, а научните експерименти по темата са оскъдни. Повечето от авторите, споменати по-долу, са съгласни, че неблагоприятните и стресови условия на околната среда могат да играят роля в развитието на болестта. Сред предложените специфични причини Paull и Matthews (2001) описват Spironucleus vortens като възможния причинител. Други автори приписват болестта на бактериални или вирусни инфекции (Bullock & Herman, 1985; Hemdal, 1989; Varner & Lewis, 1991). Също така, различни водни състави (Untergasser, 1991; Noga, 2000; Pro, 2005; Roberts & Palmeiro, 2008; Katharios et al., 2011), използването на активен въглен (Stamper, Kittell, Patel, & CAL, 2011), стрес (Bartelme, 2003a) и генетични предразположения (Bartelme, 2003b) се предполагат като причина за заболяването. Хранителни дисбаланси, включително дефицит на витамин С (Collins, 1995) и минерални дисбаланси (Noga, 2010), също са препоръчани да причиняват HITH заболяване.

При рибите с телеост ролята на свързания с паратиреоиден хормон протеин (PTHrP) за метаболизма на Ca и P е демонстрирана за някои видове риби (Abbink, 2004; Abbink & Flik, ​​2007; Guerreiro, Renfro, Power, & Canario, 2007). Abbink и Flik (2007) предполагат роля на PTHrP за мобилизирането на Ca от костите и люспите, докато Witten и Huysseune (2009) отдават признаци на костната резорбция по-скоро на липса на P, отколкото на дефицит на Ca. Тези автори също така заявяват, че телеостният ендоскелет не се използва като източник на минерали, когато се търси. От друга страна, Takagi и Yamada (1993) показват, че при тилапия (Oreochromis niloticus) изчерпването на Ca води до костна резорбция и намалява съдържанието на Ca и P в костите. Докато ендокринните механизми, регулиращи баланса на Са/Р, се различават значително от сухоземните животни, намаляването на Са/Р в диетата на шарана (Cyprinus carpio) значително намалява степента на усвояване на Са (Nakamura & Yamada, 1980). Досега не са описани доказателства за костна резорбция или участие на нарушен метаболизъм на Ca и P при HITH заболяване.

Това проучване е проведено, за да се определи дали храненето с обикновена говежди сърдечна диета би причинило HITH заболяване при дискусирани риби в резултат на променен костен метаболизъм, сравним със вторичния хиперпаратиреоидизъм на тетраподите. Освен това трябва да се оцени възможна корелация между избраните диетични режими, параметрите на водата и плазмените стойности на съответните минерали.

2. МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Това проучване е одобрено от Комитета по етика на експериментите с животни към Университета по ветеринарна медицина във Виена и от Министерството на науката на Австрия съгласно § 26 от австрийския закон за опити с животни под номер GZ68.205/0135 ‐ WF/V/36/2014 в съответствие с Директива 2010/63/ЕС.

маса 1

Разпределение на рибите към различните групи за третиране

Дължините на тялото (BL) и тежестите (BW) са дадени за началото и края на изследването, с изключение на референтните риби (Ref), които са били убити при пристигане.

Съкращения: f, женски; LGR, скорост на нарастване на дължината; м, мъжки; n, брой риби; WGR, скорост на наддаване на тегло.

Карбонатната твърдост, както и температурата и рН, се контролират ежедневно. Температурата и рН се определят с помощта на многопараметричен преносим измервателен уред (WTW multi 3420, Xylem Analytics). Съдържанието на CaCO3 във вода се изчислява ежедневно от резултатите от комплексометрично титруване на твърдост със солна киселина. Въз основа на тези резултати към резервоарите се добавя деминерализирана вода, за да се поддържа желаното съдържание на CaCO3 по време на експеримента. Определянето на необходимите количества деминерализирана вода се извършва с помощта на графика, която е установена преди началото на експеримента. Други двувалентни йони, допринасящи за общата твърдост на водата, са незначителни.

Веднъж седмично нивата на нитрити, нитрати, фосфати и амоний се определят чрез фотометрично измерване (фотометър LASA 100, Hach-Lange GmbH).

Осветлението беше осигурено в продължение на девет часа дневно при истинско качество на светлината (2 × 15-W T8 Sylvania®, Feilo Sylvania). Продължителността на експеримента беше 16 седмици.

2.1. Изследване на рибата

2.2. Статистически анализ

Хипотезата на това проучване беше, че тежкият дисбаланс на диетичните Ca и P може да доведе до HITH заболяване. Обикновената диета от говеждо сърце отговаря на тези критерии и поради това е била хранена с половината от рибите в експеримента (n = 10). Другата половина служи като контролна група и е хранена с търговска диета за поддръжка. Ако хипотезата се окаже вярна, трябва да бъдат засегнати всички риби от една група. По този начин броят на използваните животни се поддържаше нисък. Освен самото наблюдение на признаци на HITH заболяване, бяха събрани различни количествени параметри, което позволи внимателно сравняване на групите.

За да се разкрият възможни статистически корелации между параметрите на водата, режима на хранене и плазмените нива на Ca, P и Mg, в IBM® SPSS версия 24.0 са използвани следните тестове: описателна статистика за предоставяне на средното и стандартното отклонение за всеки оценен параметър, тест на ефекти между субектите, за да се покаже дали някоя от двете независими променливи (режим на хранене и параметри на водата) или тяхното взаимодействие е била статистически значима по отношение на Ca, P и Mg. Проведена е еднопосочна ANOVA, за да се изследва влиянието на различните водни параметри върху нивата на Ca, P и Mg в кръвта. При теста на Levene за равенство на дисперсии бяха приети равни дисперсии. LSD тестът на Fisher post hoc беше приложен за тестване на значимостта на предишните резултати.

3. РЕЗУЛТАТИ

По време на проучването не настъпва смъртност и всички риби се хранят добре. Степените на нарастване на дължината (LGR) са 5% за групи А и С и 5,96% за групи В и D, докато процентите на наддаване на тегло (WGR) са съответно 10,16% и 7,76% (Таблица (Таблица1). 1). Макроскопските наблюдения и оценка на снимките не разкриват развитие на лезии, съответстващо на HITH заболяването, и няма очевидни промени в сензорните пори при никоя от рибите (Фигура (Фигура 1 1).

болест

Примерни дискуси от група говеждо сърце в началото (а и б) и в края (в и г) на изследването. Няма макроскопични промени (уголемяване, сливане, промяна на пигментация или ексудати) на сензорните пори и липса на кости по кожата, съответстващи на HITH, разработени по време на експеримента [Цветна фигура може да се види на http://www.wileyonlinelibrary.com]

Резултатите от анализа на храните са дадени в таблица Таблица2. 2. И двете диети бяха дисбалансирани по отношение на съдържанието на Ca/P (Ca/P от 0,03 при диетата с говеждо сърце и от 2,73 при търговската диета).

Таблица 2

Резултати от диетичен анализ и хранителни изисквания по отношение на Ca, P и Mg (g 1000g ‐1 мокро тегло)

Тъй като няма налични валидни данни за дискусите, референтни стойности са взети от Chavez-Sanchez et al. (2000) за Cichlasoma urophthalmus (Günther). Референтните стойности на Mg произхождат от Kaushik (1999).

Не са открити паразити в проби от кожата и сензорните пори на референтни или експериментални риби. При една риба от група С една Dactylogyrus sp. на мокро монтиране се наблюдава в хрилете. В червата на две риби от група В е установена плътност от 20–50 дипломонадни бичури на зрително поле при увеличение 200 × и повече от 50 на зрително поле при две риби от група С.

Бактериите, изолирани от кожата, принадлежат най-вече към отрядите на Aeromonadales и Pseudomonadales. В края на експеримента Aeromonas sp. са изолирани от всички риби, с изключение на всяка риба от група B. Pseudomonas sp. са открити във всички групи, с изключение на една риба от група В, където са открити Ochrobactrum anthropi и Acinetobacter baumannii. При рибите от група В също е идентифициран Proteus vulgaris (Таблица S1).

Определени са плазмените стойности за Ca, P и Mg (Таблица (Таблица 3). 3). Резултатите от плазмените Ca и P на референтните риби са по-ниски в сравнение с резултатите от риби от групи A – D и това се отнася и за стойностите на Ca на референтните риби в сравнение с други проучвания (Таблица (Таблица 4). 4). С изключение на група В (търговска диета, ниско съдържание на Ca), стойностите на Ca при повечето експериментални риби са по-ниски от съобщените в други проучвания, докато нивата на P на всички риби и на Mg на всички, освен на две риби (и двете групи D) са по-високи (Таблици (Таблици3 3 и and4 4).

Таблица 3

Резултати от плазмената химия за Ca, P и Mg за всяка група за качество на храната/водата и референтната риба