Затлъстяване

Редактиран от
Ана С. Калкин

Baker Heart and Diabetes Institute, Австралия

Прегледан от
Майкъл Краакман

Медицински център Колумбийския университет в Ървинг, САЩ

Брена Озбърн

Факултет по здравни и медицински науки, Университет в Копенхаген, Дания

Принадлежностите на редактора и рецензенти са най-новите, предоставени в техните профили за проучване на Loop и може да не отразяват тяхното положение по време на прегледа.

мазнини

  • Изтеглете статия
    • Изтеглете PDF
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • Допълнителни
      Материал
  • Цитат за износ
    • EndNote
    • Референтен мениджър
    • Прост ТЕКСТ файл
    • BibTex
СПОДЕЛИ НА

Оригинални изследвания СТАТИЯ

  • Институт Лигинс, Университет в Окланд, Окланд, Нова Зеландия

Въведение

Хипотезата за развитието на здравето и заболяванията предполага, че неблагоприятна среда в ранен живот, като неоптимално хранене на майката, може да програмира затлъстяването и хроничните заболявания при потомството (9). Както високочестотната диета на майката, така и майката с високо съдържание на сол са свързани независимо с неблагоприятни програмни ефекти при потомството. Майчините СН (обезогенни) диети програмират затлъстяването и метаболитния синдром при потомството (10, 11). Програмата за диети с високо съдържание на сол на майките повишава кръвното налягане при потомството и неблагоприятни промени в съдовата система, допринасяйки за повишен риск от сърдечно-съдови заболявания (12, 13). Въпреки това, комбинираното въздействие на майчината СН и диета със сол върху програмирането на развитието на здравето на потомството не е напълно оценено. Има доказателства, които предполагат, че възпалението на майката с ниска степен може да медиира програмни ефекти при потомството (14-16). СН диетите са независимо замесени в насърчаването на нискостепенно възпаление (17), а добавянето на високо съдържание на сол към високочестотна диета влошава възпалителните процеси (7). Следователно може да се очаква, че СН и диета с високо съдържание на сол в майката в комбинация ще засилят неблагоприятните програмни ефекти при потомството.

Материали и методи

Модел на животни

Фигура 1. Преглед на експерименталния дизайн. Женските плъхове Sprague-Dawley консумират или CD, SD, HF или HFSD диета ad libitum за 21 дни преди чифтосването и през цялата бременност и кърмене. Мъжките потомци бяха отбити от стандартна диета с чау ad libitum. На постнаталния ден 130 (P130) мъжкото потомство се изважда за плазма и събиране на тъкани за анализ.

Анализ на плазмата

Плазмата се анализира за инсулин и лептин чрез търговски специфични ELISA за плъхове (Crystal Chem, Чикаго, IL, САЩ). Цитокините интерлевкин (IL) -1β, IL-6 и фактор на туморна некроза α (TNFα) бяха анализирани чрез Quantikine ELISA (R&D Systems; Minneapolis, MN, USA). Плазмата също е анализирана за глюкоза, свободни мастни киселини, триглицериди, липопротеинов холестерол с ниска плътност (LDL), липопротеинов холестерол с висока плътност (HDL), общ холестерол и лактат дехидрогеназа от автоанализатор Hitachi 902 (Hitachi High Technologies Corporation, Токио, Япония) ).

Изолиране на стромална съдова фракция (SVF)

Мастната тъкан на гонадите незабавно се дисектира от бракувани животни и се поставя в стерилен буфериран с фосфат физиологичен разтвор. 1 g мастна тъкан се смила фино и се поставя в буфер за храносмилане (бикарбонатен буфер на Рингер; 0,155 M NaCl, 0,2 M NaHCO3, 0,1 M KH2PO4, 0,12 M KCl, 0,05 M CaCl2, 0,1 M MgS04 и 1 M HEPES, регулирано рН 7,35–7,45; 4% BSA, 2 mg/ml колагеназа). Сместа се инкубира в разклащаща се водна баня при 37 ° С в продължение на 45 минути и след това се филтрува. Потокът беше въртян и SVF пелетата беше събрана и съхранена в TRI Reagent (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) за последващ анализ.

Хистологичен анализ

Хистологията на адипоцитите е извършена, както е описано по-рано (22). Проби от ретроперитонеална мастна тъкан (н = 7/група) бяха фиксирани в 10% неутрален буфериран формалин, вграден парафин и след това разделени (8 µm) с помощта на ротационен микротом Leica RM 2135 (Leica Instruments, Nussloch, Германия). Извършено е стандартно оцветяване с хематоксилин и еозин. Слайдовете бяха разглеждани под светлинна микроскопия с 10 × обектив и цифровите изображения бяха получени със софтуера NIS Elements-D (Nikon 800, Токио, Япония). Изображенията бяха анализирани сляпо и ръчно от софтуера ImageJ 1.46v (Национален институт по здравеопазване на САЩ, Bethesda, САЩ). Четири представителни зрителни полета бяха анализирани от всеки раздел, за да се определи средната площ на адипоцитите.

Анализ на генната експресия

РНК се изолира от ретроперитонеална мастна тъкан и SVF с TRI реагент (Sigma-Aldrich, Сейнт Луис, МО, САЩ). РНК се изолира от черния дроб и горната част на червата (дванадесетопръстника) с помощта на RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Германия). Концентрацията на РНК се определя с помощта на спектрофотометър NanoDrop 1000 (Thermo Fisher Scientific Inc., Wilmington, DE, USA). Обратната транскрипция беше извършена с помощта на комплект за обратна транскрипция на cDNA с висок капацитет (Applied Biosystems, Warrington, UK). Количествен анализ на полимеразна верижна реакция в реално време (RT-qPCR) беше извършен на системата ABI 7900HT Fast RT-qPCR, използвайки софтуер Sequence Detection System 2.4 за количествено определяне на експресията на иРНК с помощта на TaqMan Fast Advanced Master Mix и предварително проектирани TaqMan Gene Expression Assays (приложени) Biosystems, Warrington, UK; Таблица S1 в допълнителен материал). За да се контролира вариабилността между пробите, относителните количества на гените се нормализират към пептидилпролил изомераза А (Ppia), хипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансфераза 1 (Hprt1) и/или глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (Gapdh) израз. Сравнителният CT метод (2 –ΔΔCT) е използван за анализ на данни (23).

Статистически анализ

Фигура 2. Адипоцитна морфология и адипогенни и възпалителни маркери в ретроперитонеална мастна тъкан на възрастни мъжки потомци. Фиксираната ретроперитонеална мастна тъкан се разрязва и оцветява с хематоксилин и еозин (н = 7/група). Четири представителни изображения бяха анализирани сляпо на животно в Изображение J 1.48v. (А) Представителни изображения от всяка група; скалата представлява 100 µm. (Б) Средна площ на адипоцитите и (° С) площ на адипоцитите според разпределението по размер. Експресия на ген на ретроперитонеална мастна тъкан на (Д) Dlk1; (E) Mcp1; (F) Cd11c; и (G) Ил-1β; Tnfα; Ил-6; Ил-10; и Tlr4 (н = 7/група). Данните бяха анализирани чрез двупосочен дисперсионен анализ, с post hoc Тестове на Holm – Sidak за множество сравнения. Данните са изразени като средно ± SEM, където *P + P + P + P + P Ключови думи: програмиране за развитие, диета с високо съдържание на мазнини, диета с високо съдържание на сол, диетичен натрий, метаболитно възпаление, инсулинова чувствителност

Цитиране: Segovia SA, Vickers MH, Harrison CJ, Patel R, Gray C и Reynolds CM (2018) Диетите с високо съдържание на мазнини и високо съдържание на сол на майките имат диференциран ефект върху програмирането върху метаболизма при възрастни мъжки плъхове. Отпред. Nutr. 5: 1. doi: 10.3389/fnut.2018.00001

Получено: 06 февруари 2017 г .; Приет: 05 януари 2018 г .;
Публикувано: 07 март 2018 г.

Anna C. Calkin, Baker Heart and Diabetes Institute, Австралия

Майкъл Краакман, Медицински център на Колумбийския университет, САЩ
Брена Озбърн, Университет на Нов Южен Уелс, Австралия