Катедра по биохимия, Столичен институт по педиатрия, Път 2, Ябао,

дълго

Пекин 100020, (Китай)

Сродни статии за „“

  • Facebook
  • Twitter
  • LinkedIn
  • електронна поща

Резюме

Въведение

Неотдавнашната епидемия от затлъстяване е основен фактор за нарастващото разпространение на метаболитни и сърдечно-съдови заболявания [1]. При много хронични възпалителни заболявания генетичните и екологичните фактори са от съществено значение за развитието на затлъстяването и свързаните с него заболявания [2, 3]. Добавката на фолиева киселина (FA) може ефективно да намали нивата на хомоцистеин и инсулиновата резистентност при затлъстели деца и следователно да предотврати усложнения, свързани със затлъстяването, включително сърдечно-съдови и метаболитни нарушения [4]. Храната, обогатена с FA, също помага за намаляване на разпространението на специфични вродени сърдечни дефекти (ИБС) [5].

Свръхекспресията на интерферон бета, имуномодулиращ цитокин, вероятно отслабва индуцираното с високо съдържание на мазнини хранително възпаление и предпазва животните от развитие на затлъстяване [6]. Ейкозапентаеновата киселина (EPA), омега-3 мастна киселина, подобрява регенеративния капацитет на скелетните мускулни клетки на мишки, изложени на наситени мазнини и възпаления [7]. Следователно затлъстяването е свързано с хронично нискостепенно възпаление и възпалителните реакции могат да предизвикат вредни метаболитни ефекти. При затлъстяване хроничното нискостепенно възпаление се среща в много органи, включително, но не само, бяла мастна тъкан (WAT), кафява мастна тъкан, панкреас, черен дроб, мозък, мускули и черва [8] [9].

В това проучване моделите на експресия на lncRNAs и mRNAs в сърцето на мишки, хранени с HFDF и HFD, бяха демонстрирани и валидирани чрез количествена верижна реакция с обратна транскрипция-полимераза (qRT-PCR). Мрежите за ко-експресия на ген-lncRNA бяха допълнително изградени, за да определят моделите на взаимодействие между гените със свързаните с тях ко-експресирани lncRNA. Нашите резултати предполагат, че FA може значително да повлияе на сърдечно-съдовата функция на затлъстяването.

Материали и методи

Декларация за етика

Мъжки мишки от див тип (WT) на фона на C57BL/6 са отглеждани и поддържани в лабораторията за експерименти с животни в столичния педиатричен институт, Пекин, Китай. Изследването е одобрено от Етичния комитет на Столичния институт по педиатрия.

Модели на животни

Подготовка на хибридизация на масив

Микрочиповете lncRNA на мишката SBC 4x180K са проектирани по поръчка чрез използване на Agilent eArray в съответствие с препоръките на производителя (https://earray.chem.agilent.com/earray). Микрочипът съдържа 20,145 мРНК сонди и 58,952 lncRNA сонди. Последователността lncRNA е получена от четири бази данни, а именно GENCODE v21, Ensembl, Noncode v4 и UCSC. След като белязаните сРНК бяха пречистени, всяко стъкло беше хибридизирано и измито в съответствие с инструкциите на производителя (Agilent Technologies). Суровите данни бяха нормализирани с квантилен алгоритъм и лима пакети в R. Диференциално експресирани lncRNAs и mRNAs бяха идентифицирани по отношение на р-стойността и промяната на пъти. Експерименти и анализи бяха извършени от Shanghai Biotechnology Corporation.

Количествена PCR в реално време

Общата РНК се извлича от сърца на мишки, като се използва реагент TRIzol (Invitrogen, САЩ) и след това се транскрибира обратно с комплект РНК-с-ДНК с голям капацитет (Invitrogen, САЩ), съгласно препоръките на производителя. Експресията на значително различни lncRNAs и mRNAs във всички субекти, включени в това проучване, беше определена чрез PCR в реално време със SYBR Select Master Mix (Invitrogen, САЩ) и GAPDH беше използван като вътрешен контрол. За количествени резултати, експресията на всяка lncRNA е представена като кратна промяна чрез използване на 2-ΔΔCt методи. Разликите в експресията на lncRNA между HFDF и HFD бяха анализирани с t-тест на Student. P