• Оценка на метода
  • Резултати от лошото QC
  • Проверка на квалификацията
  • Контрол на качеството
  • Тествайте значителна промяна
  • Използване на теста

Хемоглобин А1с

Хемоглобин A1c (HbA1c) се отнася до незначителна популация от HbA, която е модифицирана чрез свързване на глюкоза към N-крайната аминокиселина на бета глобиновата верига. Тъй като еритроцитите са свободно пропускливи за глюкозата, прикрепването се осъществява непрекъснато през целия живот на еритроцита и зависи от концентрацията на глюкоза и продължителността на излагане на еритроцитите на кръвна глюкоза.

кръвната

HbA1c е претеглена средна стойност на нивата на кръвната захар през предходните 120 дни, което е средната продължителност на живота на червените кръвни клетки. Голяма промяна в средната кръвна захар може да повиши нивата на HbA1c в рамките на 1-2 седмици. Могат да настъпят внезапни промени в HbA1c, тъй като скорошните промени в нивата на кръвната захар допринасят относително повече за крайните нива на HbA1c, отколкото по-ранните събития. Например, средните нива на глюкоза в кръвта през 30-те дни, непосредствено предхождащи вземането на кръв, допринасят с 50% за нивото на HbA1c, докато нивата на глюкоза през предходния 90-120-дневен период допринасят само за 10%. По този начин не са необходими 120 дни, за да се открие клинично значима промяна в HbA1c след значителна промяна в средното ниво на глюкоза в плазмата.

Методи за хемоглобин A1c

Методите за анализ на HbA1c могат по същество да бъдат разделени на 2 категории в зависимост от това дали измерват HbA1c въз основа на заряд или структура. Най-често срещаният метод, основан на зареждане, използва катионообменна течна хроматография под високо налягане (HPLC). При този метод различни молекули на хемоглобина (например HbA, HbA2, HbF) се елуират от колоната по различно време след излагане на буфери с нарастваща йонна сила, в зависимост от техния заряд. HbA1c е с по-малко положително зареждане от HbA и не се свързва толкова плътно с отрицателно заредената смола. Следователно, той се елуира по-бързо от HbA. Количеството на всяка фракция на Hb в елуата се определя количествено чрез спектрофотометрия и се изразява като процент.

Структурните методи включват хроматография с афинитет на бороната и имуноанализи. Боронат-афинитетна хроматография се основава на силното свързване на копланарните цис-диолови групи върху гликиран хемоглобин с остатъци от борна киселина, прикрепени към хроматографската смола. Негликираният Hb не се свързва с борна киселина и се елуира веднага. Гликираният Hb се свързва с борна киселина и трябва да се елуира от противовес. Този метод измерва общия гликиран хемоглобин, включително HbA1c и Hb гликиран в епсилон аминогрупите на лизин. Той трябва да бъде калибриран, като се използват специфични стойности на HbA1c, за да се получат еквивалентни стойности на HbA1c.

Повечето имуноанализи използват поликлонални или моноклонални антитела, които разпознават а-N-крайната гликирана аминокиселина в първите 4 до 10 аминокиселини на бета глобина. Крайната концентрация се изчислява като съотношение на HbA1c към общия хемоглобин.

Варианти на хемоглобина

Установени са повече от 950 различни варианта на хемоглобина. В Съединените щати хемоглобинът S е най-често срещаният вариант, последван от хемоглобин С, хемоглобин Е и хемоглобин D (Пенджаб/Лос Анджелис). В световен мащаб вариантите на хемоглобина следват същата тенденция, с изключение на това, че хемоглобин Е е по-често срещан от C. Вариантите на хемоглобина, които предизвикват промени в заряда или структурата на молекулата на хемоглобина, могат да повлияят на точността на измерването на HbA1c. По принцип методите, базирани на зареждане, са по-податливи на интерференция от вариантите на хемоглобина, отколкото имуноанализите. Боронат-афинитетната хроматография е най-малко засегната от вариантите на хемоглобина. Ситуациите, които могат да предполагат намеса в измерването на HbA1c поради вариант на хемоглобин, включват:

  • Лоша корелация на самоконтрола за проследяване на кръвната захар с резултатите от А1С
  • Резултат от HbA1c, различен от очаквания
  • Резултат от HbA1c над 15%
  • Резултат от HbA1C се различава значително от предишен резултат, получен с различен метод

Следващата таблица изброява най-често използваните методи за измерване на A1C и дали методът е повлиян от HbS или HbC или HbE или HbD черта.

Намеса от

Bio-Rad Variant A1c

Bio-Rad Variant II A1c

Bio-Rad Variant II Turbo A1c

Primus HPLC (афинитет)

Roche Cobas Integra Gen.2

Roche/Hitachi (Tina Quant II)

Siemens (Bayer) Advia A1c

Siemens (Bayer) DCA 2000

Tosoh A1c 2.2 Plus

Ако пациентът има един от тези варианти на хемоглобин, неговото ниво на HbA1c трябва да бъде измерено с помощта на метод, който не показва намеса от варианта. Пациентите със сериозни хемоглобинопатии (като хомозиготни S или C) може да имат неточни нива на HbA1c поради съкратения живот на червените кръвни клетки. В тези случаи може да бъде заместен алтернативен тест за гликемия, като фруктозамин (наричан още гликиран серумен протеин или гликиран албумин). Серумните протеини показват средни нива на глюкоза за много по-кратък период от време, отколкото теста A1C, обикновено около 2 до 3 седмици. Освен това тестът за фруктозамин не е стандартизиран и връзката на резултатите от този тест с нивата на глюкоза или риска от усложнения не е установена

Условия, които влияят на нивото на HbA1c

Хемодилуцията и увеличеният оборот на червените кръвни клетки намаляват концентрацията на HbA1c по време на бременност. Недостигът на желязо може да увеличи нивото на HbA1c през последния триместър поради намаления клетъчен оборот.

Хемолитичната анемия и анемията при загуба на кръв намаляват нивото на HbA1c поради освобождаването на ретикулоцити, чийто хемоглобин не е гликозилиран. Преливането на пациенти с диабет с червени кръвни клетки намалява концентрацията им на HbA1c. Пациентите с аспления имат по-високи нива на HbA1c поради увеличения цикъл на живот на червените кръвни клетки. Дефицитът на желязо увеличава HbA1c, но заместителната терапия с желязо увеличава ретикулоцитозата и намалява концентрацията на HbA1c. Дефицитът на витамин В12 също намалява оборота на червените кръвни клетки и повишава нивото на HbA1c.

Пациентите с бъбречна недостатъчност имат подвеждащо ниски нива на HbA1c поради съкратеното преживяване на червените кръвни клетки и употребата на рекомбинантен еритропоетин, който увеличава ретикулоцитозата.

Съобщава се, че хроничната употреба на алкохол, салицилат и опиати фалшиво повишава нивата на HbA1c. Лекарствата, които причиняват хемолиза, могат да понижат концентрацията на HbA1c. Примерите включват дапсон, рибавирин и сулфонамиди. Хидроксиуреята превръща хемоглобина А във F, като по този начин понижава HbA1c.

Клинична употреба

HbA1c осигурява много по-добра индикация за дългосрочен гликемичен контрол, отколкото определянето на глюкоза в кръвта и урината. Съществува широк консенсус, че нивата на HbA1c трябва да се използват за рутинни грижи за всички пациенти със захарен диабет. Изходните нива на HbA1c са силно свързани с честотата и/или прогресията на ретинопатията, брутната протеинурия и загубата на тактилно усещане или чувствителност към температура. В резюмето на Американската диабетна асоциация (ADA) за 2009 г. на препоръките за клинична практика целта на HbA1c за небременни възрастни е HbA1c за диагностика на диабет

Хипергликемията е единственият диагностичен критерий за диабет от разработването на анализи на кръвната глюкоза преди 100 години. Въпреки че е златен стандарт, измерването на кръвната глюкоза е по-малко точно и точно, отколкото повечето лекари си дават сметка. Измерванията на кръвната захар също са обект на няколко ограничения, включително:

  • Изискване за 8-12 часа проба на гладно
  • Дневната вариация, изискваща сутрешно събиране, за да улови пикови нива
  • Голяма биологична вариация от 5-8%
  • Нестандартизирани методи на прибори с> 12% отклонение
  • Гликолиза след събиране, дори в епруветки с натриев флуорид

През 2009 г. Международна експертна комисия препоръча използването на теста HbA1c за диагностициране на диабет с праг от 6,5% или повече (Diabetes Care 2009, 32 (7): 1327-1334). Американската диабетна асоциация прие този критерий през 2010 г. Диагностичната точка от 6,5% се препоръчва въз основа на риска от развитие на микроваскуларни усложнения като ретинопатия. Този критерий HbA1c идентифицира една трета по-малко случаи на недиагностициран диабет, отколкото точката на прекъсване на глюкозата на гладно от 126 mg/dL или повече. Предимствата от използването на HbA1c обаче надвишават това ограничение.

  • По-добър индекс на общата гликемична експозиция и риск от усложнения
  • Ниска интраиндивидуална вариабилност (Единичен тест може да се използва както за диагностика, така и за наблюдение

Пациентите, които имат HbA1c от 5,7 до 6,4%, се считат за изложени на висок риск от развитие на диабет и сърдечно-съдови заболявания в бъдеще. Тези индивиди са посочени като пациенти с преддиабет. Те трябва да бъдат идентифицирани и съветвани относно промени в начина на живот, като упражнения и загуба на тегло.

Повишеното ниво на HbA1c трябва да се потвърди с повторно измерване в различен ден, с изключение на онези индивиди, които са симптоматични и също имат плазмена глюкоза над 200 mg/dL. Изследването на HbA1c е показано при деца, при които има съмнения за диабет, но класическите симптоми и случайната глюкоза> 200 mg/dL не са открити. Анализът трябва да се извършва на централни лабораторни инструменти, а не с устройства за грижа, за които не е доказано, че са достатъчно точни или точни за диагностициране.