Хипотоничният разтвор причинява набъбване на клетката, докато хипертоничният разтвор кара клетката да се свива.

sciencedirect

Свързани термини:

  • Децелуларизация
  • Осмоларност
  • Хипертоничен разтвор
  • Изотоничен разтвор
  • Разтворено вещество
  • Мутация
  • Клетъчната мембрана
  • Хромозома
  • Извънклетъчна матрица

Изтеглете като PDF

За тази страница

Кристалоиди, колоиди и разтвори за пренос на кислород на основата на хемоглобин

Debra T. Liu DVM, DACVECC, Deborah C. Silverstein DVM, DACVECC, в Медицина за критични грижи за малки животни (Второ издание), 2015 г.

Хипертонични течности

За разлика от хипотоничните разтвори, високата осмоларност и концентрацията на натрий на хипертоничните разтвори, като 7,5% физиологичен разтвор, предизвиква свободно изместване на водата (т.е. осмоза) от вътреклетъчното пространство към извънклетъчното пространство, разширявайки обема на извънклетъчната течност с 3 до 5 пъти умноженият обем. Осмотичната течност преминава от интерстициалното пространство към интраваскуларното пространство започва веднага след интравенозно приложение на хипертоничен разтвор, дори по-рано от равномерното разпределение на електролитите в извънклетъчното пространство. Свободната вода от вътреклетъчния отдел за течности след това се премества в отделението за извънклетъчната течност, когато осмоларността на интерстициалната течност се повиши.

Хипертоничен физиологичен разтвор, вариращ от 3% до 7,5%, се използва за терапия на хиповолемичен шок, вътречерепна хипертония и тежка хипонатриемия (вж. Глава 50). Често се прилага за пациенти както с хиповолемичен шок, така и с опасения за вътречерепна хипертония, като пациент с травма на главата. Подобно на изотоничните и хипотоничните кристалоиди, ефектът на разширяване на вътресъдовия обем на хипертоничния физиологичен разтвор е преходен (6). Следващата осмотична диуреза също улеснява излишната екскреция на натрий. За да удължи вътресъдовия обемно-разширяващ ефект на хипертоничния физиологичен разтвор, той често се комбинира с колоиден разтвор. Обичайният препарат се прави чрез смесване на изходен разтвор от 23,4% хипертоничен физиологичен разтвор с 6% хестастера или пентастера в съотношение 1: 2, за да се получи общ обем от 3 до 5 ml/kg.

Невронна блокада с невролитични агенти

Subhash Jain, Rakesh Gupta, в Управление на болката, 2007

Хипертонични и хипотонични решения

Използването на хипертонични и хипотонични разтвори при интратекални инжекции за лечение на болка 44 е свързано с промени в невропатията 45-47, които не са потвърдени от хистологични доказателства. 48, 49 Осмотичното подуване на нервния сноп се предлага като механизъм на блокиране на нервната проводимост. 50 По-късни експерименти демонстрират дегенерация на миелин и аксонолиза след накисване на нерв за поне 1 час в дестилирана вода или разтвори с осмолалност по-голяма от 1000 mmol/L. По този начин, по-ранните клинични наблюдения вероятно се дължат на ендоневриален оток, а не на структурно увреждане на нервните влакна.

Осмоза и осмотично налягане

Клетките активно регулират обема си чрез RVD и RVI

Въпреки че наличието на хипотоничен или хипертоничен разтвор инициира съответно подуване или свиване, често промяната на обема не се поддържа. Клетка, която първоначално набъбва, когато се постави в хипотонична среда, в крайна сметка може да загуби част от придобития си обем: претърпява намаляване на регулаторния обем или RVD. Подуването на клетката активира компенсаторни механизми, които причиняват транспорт на осмотично активни разтворени вещества (осмолити) от клетката. По същия начин свиването на клетките може да активира приток на осмолити в някои клетки, което води до компенсаторен оток, който се нарича увеличаване на регулаторния обем или RVI. Тези RVD и RVI се постигат чрез промяна на клетъчното съдържание на осмолити.

Наръчник по имунохистохимия и in situ хибридизация на човешки карциноми, том 4

Материали

Разтвор на колцемид (10 μg/ml) (GIBCO)

Хипотоничен разтвор за рак: 3,0 g калиев хлорид, 4,8 g HEPES (N-2-хиброксиетил-пиперазин-N-2-етансулфонова киселина) (Sigma, Сейнт Луис, МО), 0,2 g EGTA (етилен-бис [оксиетилен нитрол] тетраоцетен киселина) (Sigma). (Разтваря се в 1000 ml дестилирана вода и регулира рН до 7,0, като се използва 10 N NaOH. Съхранява се при 4 ° C в продължение на 2-3 седмици.)

100 ml разтвор на трипсин-етилендиамин тетраоцетна киселина (EDTA) (1X) (GIBCO)

Фиксатор: 3 части метанол (Fisher), 1 част оцетна киселина (Fisher)

Водна баня при 37 ° C

Инкубатор при 37 ° C

Стара среда, съдържаща 10% FBS, или пригответе нова 1 ml FBS с 9 ml HBSS (GIBCO)

Бъбречна недостатъчност при възрастни

Phuong-Thu T. Pham,. Габриел М. Данович, в Трансплантация на черен дроб (трето издание), 2015

Хипонатриемия

Пациентите, които очакват чернодробна трансплантация, често страдат от хипонатриемия поради намален бъбречен клирънс без вода от различни причини и вливания на множество медикаментозни хипотонични разтвори. Основните основни причини включват нозмотично регулиране на секрецията на антидиуретичен хормон (ADH), променен метаболизъм на простагландините, намалено доставяне на филтрат към възходящия край на веригата на Henle за безплатно производство на вода, вследствие на тежко реновоконстрикция и жадно проксимално реабсорбция на натрий и вода, недостатъчна диета натоварване на разтвореното вещество, необходимо за достатъчна свободна екскреция на вода, и нетен отрицателен баланс на сол поради невъзможност за заместване на загубата на сол 46,47 Хипонатриемичното състояние се поддържа от продължаващия висок прием на свободна вода. Лечение на асимптоматична хипонатриемия (серумна концентрация на натрий 48,49

След успешна чернодробна трансплантация, повишаване на серумната концентрация на натрий може да настъпи в рамките на няколко часа, 50 вероятно във връзка с инфузии на кръвни продукти с високо съдържание на натрий, облекчаване на синдрома на неподходяща секреция на антидиуретичен хормон (SIADH) и евентуално подобряване на бъбречната функция. Бързата автокорекция на хипонатриемия при пациенти с OLT е съобщена от няколко автори, че е свързана с развитието на синдрома на осмотичната демиелинизация (или централна понтин миелинолиза). 51-53 Независимо от това, трябва да се отбележи, че други фактори, включително анамнеза за алкохолизъм, недохранване, хипоксия и чернодробна енцефалопатия, могат да допринесат, тъй като връзката между скоростта на корекция на натрий и неврологичните усложнения при пациенти с OLT не се наблюдава еднакво. 54,55

Източници на грешки в хематологията и коагулацията

Д-р Амер Уахед, д-р Амитава Дасгупта, DABCC, по хематология и коагулация, 2015 г.

17.3.5 Фалшиво положителен тест за осмотична чупливост

Тестът за осмотична чупливост е полезен за диагностика на наследствена сфероцитна хемолитична анемия. Сфероцитите са осмотично крехки клетки, които се разрушават по-лесно в хипотоничен разтвор, отколкото нормалните еритроцити. Тъй като тези клетки имат ниско съотношение на повърхността: обем, те лизират при по-висока осмоларност на разтвора, отколкото нормалните еритроцити с дискоидна морфология. След инкубация в хипотоничен разтвор, по-нататъшно повишаване на хемолизата обикновено се наблюдава при наследствена сфероцитоза. Клетките, които имат по-голяма повърхност: съотношение обем, като целеви клетки или хипохромни клетки, са по-устойчиви на лизиране в хипотоничен разтвор.

Състояния, свързани с имунологично медиирани хемолитични анемии, могат да се проявят с много микросфероцити в периферната кръв. Следователно, тестът за крехкост може да бъде положителен при имунологично медиирани хемолитични анемии, освен наследствена сфероцитоза, но първият ще има положителен директен тест на Кумбс, а вторият няма.

Източници на грешки в хематологията и тестването на коагулацията

Фалшиво-положителен тест за осмотична крехкост

Тестът за осмотична чупливост е полезен за диагностика на наследствена сфероцитна хемолитична анемия [27]. Сфероцитите са осмотично крехки клетки, които се разрушават по-лесно в хипотоничен разтвор, отколкото нормалните еритроцити. Тъй като имат ниско съотношение на повърхността: обем, те лизират с по-висока осмоларност на разтвора, отколкото нормалните червени кръвни клетки с дискоидна морфология. След инкубация в хипотоничен разтвор, по-нататъшно повишаване на хемолизата обикновено се наблюдава при наследствена сфероцитоза. Клетките, които имат по-голяма повърхност: съотношение обем, като целеви клетки или хипохромни клетки, са по-устойчиви на лизиране в хипотоничен разтвор.

Състояния, свързани с имунологично медиирани хемолитични анемии, могат да се проявят с много микросфероцити в периферната кръв. Следователно, тестът за крехкост може да бъде положителен при имунологично медиирани хемолитични анемии, различни от наследствена сфероцитоза, но първата би имала положителен директен тест на Кумбс, а втората не.

Тест за хромозомна аберация на костния мозък на гризачи

9.5.4 Колекция от костен мозък

Точно след евтаназия на всяко животно, обработвайте всяка бедрена кост на свой ред, както е описано по-долу. Обърнете внимание, че началните стъпки преди добавяне на хипотоничния разтвор са идентични с тези, използвани за микроядрения тест на плъхове.

Отстранете кожата и по-голямата част от подлежащата тъкан от горната част на задната част на задния крак, като използвате ножици и режете близо и успоредно на костта. След това разместете колянната става, докато дърпате подбедрицата от животното. Изчистете бедрената кост от останалия мускул, като изстържете с помощта на ножицата и я изрежете възможно най-близо до тялото на животното, като използвате практически ножици за кости; ножици могат да се използват за млади мишки. По този начин по-голямата част от бедрената кост се изрязва и отваря в проксималния край, като дисталната епифиза все още е непокътната.

Натиснете иглата на сглобката игла-спринцовка добре в отвора на костта и след това натиснете костта към дъното на съответната тръба за центрофуга, така че да е към дъното на HBSS. Използвайки иглата, за да придържате костта към вътрешността на тръбата, изтеглете HBSS в спринцовката през горната (отворения край) на бедрената кост и след това я изхвърлете обратно в тръбата. Изхвърлете празната бедрена кост и след това повторете процеса за втората бедрена кост, преди да аспирирате и изхвърлите суспензията през спринцовката още веднъж. По този начин на практика всички клетки в двете бедрени кости ще бъдат във фина суспензия в епруветка.

Центрифугирайте епруветките при 1000 оборота в минута в настолна центрофуга за 5 минути. След това декантирайте и изхвърлете супернатантата. Върнете клетките обратно в суспензия, като „почукате“ (щракнете с ръка) тръбата или използвайте вихров миксер.

Добавете хипотоник, докато общият обем е приблизително 10 ml. В този момент червените кръвни клетки ще лизират; следователно, по-специално за мишките, присъствието на клетки в суспензията и последващите пелети при центрофугиране не е непременно очевидно.

Поставете епруветките във водна баня при приблизително 37 ° C за около 10 минути; това време не е критично, защото клетките ще набъбнат почти веднага.

Постепенно добавете 2 ml фиксация към клетъчната суспензия, докато непрекъснато се разбърква с ниска скорост, като се използва вихрови миксер.

Центрифугирайте епруветките при 1500 об/мин за 5 минути. След това декантирайте и изхвърлете супернатантата.

Ресуспендирайте клетките в остатъчния разтвор чрез леко разклащане. След това добавете приблизително 2 ml фиксатор, докато непрекъснато се смесва.

Добавете допълнително фиксиране към отметката от 10 ml. След това оставете епруветките на стайна температура за поне 30 минути. Алтернативно прехвърлете епруветките в хладилник и ги съхранявайте за една нощ.

Центрифугирайте епруветките при 1500 об/мин за 5 минути. След това отстранете по-голямата част от супернатантата, оставяйки около 1 mL да остане преди ресуспендирането на клетките както преди и допълване до 10 mL с фиксиране.

На този етап клетките трябва да се съхраняват в хладилник поне за една нощ, но те могат да се съхраняват при приблизително 4 ° C в продължение на няколко месеца, при условие че епруветките на центрофугата са съвместими с фиксатора.