Резюме

Заден план

Хроничното бъбречно заболяване (ХБН) обикновено има неимунен медииран произход при котките и имунокомплексният гломерулонефрит (ICGN) едва се описва. Целите на това проучване бяха да се характеризира ICGN чрез светлинна и електронна микроскопия и да се идентифицират асоциации с клинико-патологични находки. В допълнение бяха направени сравнения между котки с ICGN и неимунно-сложен гломерулонефрит (не-ICGN).

Разгледани са бъбречни проби, изследвани между 2010 и 2019 г., ако се извършва както светлинна, така и електронна микроскопия. Бяха извлечени и използвани сигнали, статус на котешки имунодефицитен вирус (FIV) и вирус на левкемия (FeLV), концентрация на серумен креатинин, съотношение протеин към креатинин в урината (UPC), систолично кръвно налягане (SBP) и International Renal Interest Society (IRIS) за сравнения.

Резултати

Включени бяха 68 котки, притежавани от клиенти. Тридесет и седем котки (54,4%) са имали ICGN и 31 (45,6%) не-ICGN. Осемнадесет (48,6%) с ICGN са имали мембранна гломерулонефропатия (MGN), 14 (37,8%) мембранопролиферативен гломерулонефрит (MPGN) и 5 ​​(13,5%) мезангиопролиферативен гломерулонефрит (MeGN). Клинико-патологичните данни не са свързани с никакъв тип ICGN. Сред котките с не ICGN 11 (35,5%) са имали краен стадий на ХБН, 9 (29%) фокална сегментарна гломерулосклероза, 6 (19,4%) глобална и мултифокална мезангиосклероза, 2 (6,5%) гломерулна атрофия, 2 (6,5%) бъбречна дисплазия и 1 (3,1%) амилоидоза. Осем (25,8%) котки с не-ICGN са имали хроничен интерстициален нефрит (CIN) степен 1, 13 (41,9%) степен 2 и 10 (32,3%) степен 3; съотношението креатинин и UPC се увеличава с CIN степени (стр = 0,001, стр

Заден план

Хроничната бъбречна болест (ХБН), вторична в сравнение с не-ICGN, е много по-честа от ICGN, като повечето котки имат неспецифични бъбречни лезии [15, 16]. Обикновено се документира при възрастни котки и хроничният интерстициален нефрит (CIN), свързан със вторично гломерулно засягане, е преобладаващата морфологична диагноза [15,16,17]. Въпреки това, няма проучвания, които подробно описват ултраструктурните лезии в гломерулите на тези котки, като по този начин намаляват диагностичната специфичност и чувствителност. Въз основа на тежестта на интерстициалната фиброза и възпалителната инфилтрация, CIN понастоящем е хистологично класифициран според скала, която варира от 0 до 3, във възходящ ред на тежестта [17]. Количеството фиброза представлява лезията, която най-добре корелира с тежестта на азотемия, хиперфосфатемия и анемия, докато гломерулната хипертрофия корелира най-добре със тежестта на протеинурията [17].

Все още липсват големи кохортни проучвания, описващи ICGN при котки, тъй като случаите с първични гломерулни лезии рядко се срещат и използването на бъбречна биопсия все още е много ограничено в клиничната практика. Следователно целите на това проучване бяха първо да се характеризира морфологичната диагноза на ICGN с LM и TEM при голяма група котки и да се идентифицират асоциации с клинични и лабораторни открития. На второ място, група не-ICGN котки бяха използвани за сравнение, за да се подчертае необходимостта от хистопатология и електронна микроскопия за получаване на окончателна диагноза.

Резултати

Котки с ICGN и клинични характеристики, свързани с морфологични диагнози

От 37 котки, диагностицирани с ICGN, породата е известна с 36; 34 (94,4%) са DSH и 2 (5,6%) чистокръвни, включително по 1 норвежки горски и абисински.

Що се отнася до FIV и FeLV статуса, всички котки са тествани и 13 (35,1%) котки са положителни за ретровирусна инфекция, включително 10 FIV-положителни котки и 3 FeLV-положителни; никой не е заразен едновременно с двата вируса. Средната серумна концентрация на креатинин е била 3,3 ± 2,3 mg/dL (медиана: 2,6 mg/dL; min-max: 0,6–11,1 mg/dL). Средното съотношение на UPC при диагнозата е 7 ± 3,2 (медиана: 2,6; мин-макс 2,4–18,6). Средната стойност на SBP беше 154 ± 25 mmHg (медиана: 160 mmHg; min-max 110-200 mmHg); SBP не е бил наличен при 10 котки. Пет (13,5%) котки бяха в IRIS етап 1, 15 (40,5%) във етап 2, 11 (29,7%) в етап 3 и 6 (16,2%) в етап 4.

Морфологичните диагнози на котки, засегнати от ICGN, са MGN (фиг. 1А, В) при 18 (48,6%), MPGN (фиг. 1С, D) при 14 (37,8%) и MeGN при 5 (13,5%). От 10 FIV-положителни котки, 5 са ​​имали MGN, 4 MPGN и 1 MeGN; от 3 FeLV-положителни котки, всяка от тях имаше MGN, MPGN и MeGN.

ретроспективно

Хистологични и ултраструктурни находки в случаи на MGN (а, б) и MPGN (° С, д). Трихромен участък на Masson’s на гломерул с умерена мезангиална склероза и удебеляване на гломерулната базална мембрана, свързана с протеинови отлагания (а). Електронната микроскопия показва суб-епителни електронни плътни отлагания в GBM (стрелки) (б). Разрезът на PAS на гломерула показва ремоделиране на гломерулната базална мембрана, мезангиална интерпозиция и увеличаване на мезангиалната матрица (° С). Електронната микроскопия разкрива имунни комплекси в базалната мембрана, свързани с увеличаване на удебеляването (стрелки) (д)

Порода, пол, възраст, FIV и FeLV статус, UPC съотношение, серумна концентрация на креатинин, SBP и IRIS стадий при котки с различни подтипове ICGN са показани в Таблица 1.

Нито една от изследваните променливи не е свързана значително с диагнозите ICGN.

Котки с не ICGN и клинични характеристики, свързани с CIN степени

Като цяло 31 котки са имали бъбречно заболяване без ICGN, включително 11 (35,5%) в краен стадий на ХБН, 9 (29%) фокална сегментарна гломерулосклероза, 6 (19,4%) глобална и мултифокална гломерулосклероза, по 2 с гломерулна атрофия (6,5%) и бъбречна дисплазия (6,5%) и 1 амилоидоза (3,1%).

Двадесет и пет (80,6%) са DSH и 6 (19,4%) са чистокръвни, включително 2 персийци, по 1 от сиамски, шартре, мейн куун и норвежки горски породи. Двадесет и една котки бяха тествани за FIV и FeLV инфекция и нито една не беше положителна.

Концентрация на серумен креатинин и съотношение UPC са налични при всички котки, а средните стойности са 3.6 ± 2.3 mg/dL (медиана: 3.2 mg/dL; min-max: 0.6–11.0 mg/dL) и 2.6 ± 0.9 (медиана: 2.6; минимум-максимум 1,0–4,5), съответно. SBP е известен за 18 котки и средната стойност е 154 ± 30 mmHg (медиана: 150 mmHg; min-max 110-200 mmHg). Седем (22,6%) котки бяха в IRIS етап 1, 6 (19,4%) във етап 2, 11 (35,5%) в етап 3 и 7 (22,6%) в етап 4.

Осем (25,8%) котки, диагностицирани с не-ICGN, са имали степен 1 ​​на CIN, 13 (41,9%) са имали степен 2 и 10 (32,3%) са имали степен 3. Клинично-патологични данни за всяка степен на CIN са представени в таблица 2. Там не е имало разлика в пола и разпределението на породата сред CIN степени, както и за средната възраст и SBP. Обратно, серумната концентрация на креатинин и UPC съотношението значително варира в зависимост от степента на CIN (стр = 0,001 и стр Таблица 2 Порода, пол, възраст, серумна концентрация на креатинин, UPC съотношение, SBP и IRIS стадий при котки за всеки CIN клас

Делът на котките, класифицирани в различните етапи на IRIS, значително варира в зависимост от степента на CIN (стр = 0,005). По-специално, нито една от котките с CIN степен 1 ​​не е била в IRIS етап 4 и нито една от котките с CIN степен 3 не е била в IRIS етап 1 или 2. Котките с CIN степен 2 са разпределени хомогенно между четирите етапа на IRIS.

Диагностика на ICGN или не-ICGN въз основа на клинични и лабораторни данни

Според логистичен регресионен анализ, FIV или FeLV инфекция, възрастта и UPC съотношението са били значително свързани с вероятността за диагностициране на ICGN, а не на ICGN (стр = 0,024, стр = 0,042 и стр 3,8 (стр 3.8, докато 29 от 31 котки, диагностицирани с не-ICGN (93.5%), имат UPC съотношение 3.8. Двете котки, диагностицирани с не-ICGN и с UPC съотношение> 3,8, имат серумна концентрация на креатинин 5,0 и 7,8 mg/dL и тежко гломерулно участие, както и CIN степен 2 и 3, съответно.

Котките, диагностицирани с ICGN, са имали по-високо UPC съотношение от котките, които не са ICGN с CIN степен 1, степен 2 и степен 3 (p Таблица 3 Порода, пол, възраст, FIV и FeLV статус, серумна концентрация на креатинин, UPC съотношение, SBP и IRIS етап в котки с ICGN и при котки с не-ICGN и тяхното влияние върху шанса да се постави една от двете диагнози

Дискусия

Към днешна дата има малко налични данни за ICGN при котки [2,3,4,5,6]. В настоящото проучване MGN и MPGN са двата най-често срещани типа, представляващи приблизително повече от три четвърти от всички случаи на ICGN. Това се различава от предишни изследвания, където MGN е най-честата форма на ICGN при котки [2,3,4,5,6]. Едно от възможните обяснения е, че броят на FeLV-положителни котки с ICGN е много нисък (само 3 случая) в сравнение с предишни проучвания [4, 6,7,8] и тази ретровирусна инфекция е свързана най-често с развитието на MGN [7]. Трябва да се отбележи, че въпреки че само 3 котки в настоящото проучване са имали инфекция с FeLV, една от трите има MGN, докато останалите 2 имат MPGN и MeGN, което предполага, че FeLV-положителните котки могат да бъдат засегнати и от други видове ICGN.

ICGN не е свързан с порода, възраст, пол, серумна концентрация на креатинин, UPC съотношение и SBP. Следователно, за съжаление, горните клинични и лабораторни находки не могат да се използват в ежедневната практика за прогнозиране на вида на ICGN. Липсата на връзка между степента на протеинурия и вида на ICGN се съобщава и при кучета [1, 18].

По отношение на вероятността от диагностициране на ICGN спрямо не-ICGN въз основа на клинични и лабораторни данни, стойностите на съотношението UPC са потенциално полезни за предвиждане на категорията на бъбречните заболявания при котките. По-специално, по-високата тежест на протеинурията е свързана значително с ICGN.

В това проучване съотношението UPC на котки с ICGN е 7 ± 3,2 (медиана: 2,6; мин-макс 2,4–18,6). Въз основа на схващането, че животните с гломерулни заболявания се очаква да имат изразена протеинурия [20, 21], би се очаквало по-високо съотношение на UPC, ако се диагностицира ICGN, а не non-ICGN, което е в съответствие с нашите констатации. По-специално, всички котки с ICGN имат UPC съотношение ≥ 2, което се счита за показателно за наличието на гломерулна болест при персистираща протеинурия [20, 21].

За отбелязване е, че тубуларната протеинурия, свързана с CIN, обикновено е нискостепенна, а гломерулната протеинурия може да бъде от всякакъв мащаб, варираща от нискостепенна до значителна [22]. В настоящата серия най-добрият дискриминационен предел за съотношението UPC е 3,8 с висока чувствителност и специфичност (и двата> 91%). Този резултат потвърждава, че котките с ICGN са по-склонни да имат значителна протеинурия, докато някои може да имат по-ниска степен на загуба на протеин. Клиницистите обаче трябва да са наясно, че котките с по-висока степен на протеинурия не е задължително да имат ICGN, а неимунно комплексно заболяване като амилоидоза или фокална и сегментна гломерулосклероза с висока степен на CIN. Следователно, всяка терапия с имуносупресивни лекарства трябва да бъде внимателно обмислена и с оглед на имунни отлагания, потенциално открити при ТЕМ.

Котките с FIV или FeLV инфекция са имали 11 пъти по-голяма вероятност да бъдат диагностицирани с ICGN, отколкото не-ICGN. Възможно обяснение е, че ретровирусните инфекции играят роля в гломерулните увреждания, като насърчават отлагането на имунни комплекси, получени от вирусни антигени и антитела гостоприемници [6, 7]. Демонстрирано е значително увеличение на циркулиращите имунни комплекси при FIV-положителни котки в сравнение с отрицателните [23]. Въпреки че общият брой инфектирани с ретровирус котки е сравнително нисък в това проучване, FIV е три пъти по-често срещан от FeLV и котките с предишното заболяване имат различни видове ICGN. В предишни проучвания ICGN често се свързва с инфекция с FeLV [4, 6,7,8], докато при FIV-положителни котки ICGN е рядкост и в тези случаи се съобщава само за MeGN [9]. По този начин данните от настоящото проучване показват, че инфекцията с FIV може да е в основата на ICGN при котките и може да доведе до различни видове ICGN.

Освен това, появата на ICGN и не-ICGN не са свързани с порода, пол, концентрация на креатинин и стойности на SBP. Трябва да се отбележи, че котките с не-ICGN се очаква да имат по-висок креатинин в сравнение с котките с ICGN, тъй като тубулоинтерстициалното увреждане обикновено се свързва с намалена скорост на гломерулна филтрация и повишени серумни маркери на бъбречната функция [16].

Концентрациите на серумен креатинин и съотношението на UPC са значително по-високи при котки с CIN степен 2 и 3, отколкото при тези с степен 1; в допълнение, степента на CIN варира значително между четирите стадии на IRIS и нито една от котките с IRIS етапи 1 и 2 не е имала степен на CIN 3. Тези данни потвърждават предишни проучвания, при които степента на протеинурия е свързана с тежестта на тубулна дегенерация, възпаление, фиброза и некроза, както и с наличие на гломерулна хипертрофия, докато тежестта на азотемия, хиперфосфатемия и анемия са свързани с степента на фиброза [16, 17].

Интересното е, че редица котки с не-ICGN имат UPC съотношения> 2. Тази констатация може да се обясни с факта, че при тази група котки CIN са диагностицирани заедно с различни гломерулни лезии и че последните вероятно представляват най-важните фактори за загуба на протеин.

Това проучване има някои ограничения, като неговия ретроспективен характер и факта, че данните са предоставени от различни ветеринарни лекари. Всъщност присъстваха непълни записи и информацията, отнасяща се до серумни концентрации на албумин или до асцит, беше оскъдна. Тъй като обаче липсващи данни са документирани както при ICGN, така и при котки, които не са ICGN, отклонението вероятно е намалено. Друго важно ограничение е, че кръвни тестове и анализ на урината са били извършвани в различни лаборатории, с референтни граници, които може да са се различавали. В допълнение, съотношенията на UPC, предоставени в това проучване, вероятно се основават на единични определяния при повечето котки, без да се отчита ежедневната променливост на протеинурията. Авторите обаче предполагат, че потенциалното пристрастие от наличието на различни лаборатории и събирането на единични проби от урина вероятно е било равномерно разпределено между морфологичните диагнози и категориите заболявания, намалявайки неговия объркващ ефект. Друга граница на това проучване е липсата на данни за имунофлуоресценция. Всъщност имунофлуоресценцията, както и LM и TEM, могат да помогнат за характеризиране на гломерулонефрит при котки и да осигурят пълна оценка на бъбречните биопсии.

Заключения

MGN и MPGN са двете най-чести морфологични диагнози на ICGN при котките. За съжаление клиничните и лабораторни находки не бяха полезни за разграничаване на специфичните видове ICGN. При котки с не-ICGN само серумната концентрация на креатинин и UPC съотношението са значително свързани с CIN степени. Котките с ICGN са по-склонни да бъдат заразени с FIV или FeLV, имат по-тежка протеинурия и са по-млади от котките с не ICGN. Подобно на кучетата, бъбречните биопсии при котки с гломерулопатия трябва да включват както LM, така и TEM изследване, за да се постигне окончателна морфологична диагноза и евентуално да се адаптира лечението.

Методи

Котки и бъбречни проби

Прекъснатите бъбречни биопсии на котки с бъбречно заболяване, причинено от ICGN, които бяха предоставени на Европейската ветеринарно-бъбречна патологична служба (http://www.evrps.net) и Департамент по ветеринарни науки в Университета в Торино между 2010 и 2019 г. бяха направени с ретроспекция анализирани. Освен това се включват проби от бъбреци, получени от аутопсии на котки за някакво заболяване, ако се идентифицира не-ICGN. Бяха разгледани случаи, ако бъбречните проби бяха събрани в рамките на 1 час след смъртта и ако имаше достатъчно количество тъкан за постигане на диагноза както с LM, така и с TEM. Освен това, последните налични клинични и лабораторни данни, съобщени в медицинските записи, бяха извлечени, ако бяха получени в рамките на един месец преди вземане на проби от бъбреците. Шестдесет и осем котки изпълниха критериите за включване. Сред тях 37 (54,4%) са диагностицирани с ICGN и 31 (45,6%) с не-ICGN. Сред котките с ICGN 21 (56,8%) са кастрирани мъжки и 16 (43,2%) са стерилизирани жени. Нито една от котките не е непокътната. Средната възраст е 9,2 ± 3,3 години (медиана: 9 години; min-max: 4-15 години). От котки с не ICGN, 19 (61,3%) са били стерилизирани жени и 12 (38,7%) са кастрирани мъже. Нито една от котките не е непокътната. Средната възраст е 10,9 ± 3,3 години (медиана: 11 години; min-max: 4-17 години).

По отношение на пробите от бъбреците, фиксираните с формалин и вложени в парафин бъбречни тъкани бяха оцветени с хематоксилин и еозин (HE), периодична киселина-Schiff (PAS), трихром на Masson и периодична киселина-Schiff метенамин сребро (PASM) или Jones Methenamine silver . Бъбречните тъкани за ТЕМ винаги са били фиксирани в глутаралдехид и анализът се извършва, като се използват стандартни процедури, както е описано по-горе [18]. За да се постигне окончателна диагноза на ICGN, гломерулните имунни депозити трябваше да бъдат идентифицирани с TEM и според тяхното местоположение ICGN бяха допълнително класифицирани в MPGN, MGN и MeGN, следвайки класификационната схема WSAVA-RSSG, използвана при кучета [1].

Бъбречните проби от котки, диагностицирани с не-ICGN, са хистологично характеризирани с различен морфологичен модел на гломерулни заболявания, включително отлагане на амилоиди, увреждане на подоцитите, глобална и мултифокална гломерулосклероза и бъбречно недоразвитие. Увреждането на тубулоинтерстициума е често срещана характеристика [16, 17]. TEM винаги е бил на разположение и се използва за потвърждаване на отсъствието на гломерулни имунни депозити и за характеризиране на гломерулни лезии. Освен това при тези котки CIN се оценява по скала от 1 до 3, както следва: 1 = леки или разпръснати мултифокални области на фиброза и възпаление, засягащи

Наличност на данни и материали

Наборите от данни, използвани и/или анализирани по време на настоящото проучване, са достъпни от съответния автор при разумна заявка.