Експериментално
и терапевтични
Лекарство

• Последните две години
• Обща сума

• Миналата година 0
• Обща сума

• Миналият месец
• Изминалата година
• Обща сума

• Цян Гао
• Нушенг Лианг

Тази статия се споменава в:

Резюме

Етиологията на AP обаче е сложна и подходящата терапия за заболяването остава оспорена (2,17). Прилагането на акупунктура, когато се комбинира със западна медицина, се счита за ефективна терапия за AP (18). Повечето лечения за AP имат очевидни странични ефекти (19), които ограничават използването им при лечението на AP. Интегрираната традиционна китайска медицина (ITCM) се практикува повече от 1000 години и се използва широко като външно лечение на AP, с малко странични ефекти (20–22). Настоящото проучване отчита ново ITCM лечение, което е ефективна терапия за AP. Механизмът, залегнал в основата на ефекта на ITCM при лечението на AP, остава неизвестен. Протеинът, серин 1 (PRSS1) ген, който експресира катионен трипсиноген, е свързан с наследствен панкреатит и се характеризира с остро възпаление на панкреаса (23). SPINK1, който кодира инхибитора на сериновата протеаза Kazal тип 1, е допълнителен ген, считан за модификатор на болестта на AP (24,25). По този начин е доказано, че AP е свързан с експресията на PRSS1 и инхибитор на серин пептидаза, Kazal тип 1 (SPINK1) (24,26,27). Целта на настоящото проучване беше да се изследва дали ITCM може да подобри AP чрез регулиране на експресията на PRSS1 и SPINK1.

Материали и методи

Участници

Протоколите за изследване върху човешки субекти и документите за съгласие бяха одобрени от Комитета по етика на човешките изследвания на болница за традиционна китайска медицина Янтай (Янтай, Китай). Освен това бяха получени документи за писмено съгласие и данните бяха събрани със сертификат за поверителност, защитаващ поверителността на пациентите. Общо 100 пациенти с AP са наети от болницата за традиционна китайска медицина Yantai между март 2009 г. и март 2014 г., за да управляват нашите или да предотвратят някакви генетични различия. Всички пациенти не са свързани, етнически хан китайци със сходни културни и икономически произход.

Пациентите с AP са разделени на случаен принцип в две групи (Таблица I). Общо са изследвани 100 пациенти (възрастов диапазон, 40–55 години), за които се съобщава, че страдат от AP, но нямат симптоми на други чревни или възпалителни заболявания. Диагнозата на всички допустими случаи беше потвърдена чрез хистологично изследване. Курсът на заболяването варира между 3 часа и три дни. От 100 случая 48 са били с жлъчен произход, 40 случая се дължат на преяждане и прекомерно пиене, а 12 случая са резултат от неидентифицирани причини. В 94 случая пациентът страда от AP за първи път, докато останалите шест случая са повтарящи се.

Таблица I

Характеристики на пациента преди лечение с ITCM.

Таблица I

Характеристики на пациента преди лечение с ITCM.

< label (or @symbol) needed for fn[@id='tfn4-etm-09-03-0947'] >ITCM, интегрирана традиционна китайска медицина; ИТМ, индекс на телесна маса; AP, остър панкреатит.

Диагностични критерии и класификация на заболяванията

AP може да се класифицира като лека, умерена или тежка, в зависимост от тежестта на заболяването (31). Леките пациенти с АП нямат органна недостатъчност, нито локални или системни усложнения. Умереният AP се характеризира с наличие на преходна органна недостатъчност, докато тежките пациенти с AP имат трайна органна недостатъчност за> 48 h.

Терапевтични методи

Пациентите от експериментална група са прилагани външно с ITCM препарат. Препаратът ITCM е съставен и приготвен в съответствие с предишни проучвания (32,33), както следва: 30 g китайски ревен, 15 g Citrus aurantium, 15 g кора от магнолия, 10 g mirabilite, 10 g Pinellia ternata, 10 g Coptis chinensis, 15 g Scutellaria baicalensis, 10 g Gardenia, 15 g Radix Paeoniae Alba, 15 g кора от божур от дърво, 15 g Radix Paeoniae Rubra, 15 g Rhizoma Corydalis, 10 g Bupleurum и 10 g женско биле. Материалите се смилат на прах с помощта на хомогенизатор под високо налягане (Jiangsu Makwell Machinery Co., Ltd., Huai’an, China). Тези прахове се разтварят в 500 ml вода с 200 g нишесте и сместа се концентрира и изсушава, за да се образуват пасти от

5 × 5 × 1 см. Пастите се прилагат върху акупунктурните точки (18,34), Yishu, Zhongwan, Tianshu, Zusanli, Guan Yuan и Pishu, два пъти дневно. Дозата на ревен и мирабилит се коригира в зависимост от тежестта на коремното раздуване и болка на пациентите. В допълнение, съставът на праха е модифициран според симптомите на пациента, покритието на езика и пулса. Пациентите от контролната група са получили приложение на акупунктурна точка с плацебо лечение, съдържащо смес от царевично брашно, нишесте и брашно.

Лечебен стандарт

Определен е лечебен стандарт, за да се категоризира ефикасността на лечението с ITCM. Стандартът се дефинира като регресия на симптомите, включително коремна болка и разтягане, треска, повръщане и преминаване на изпражнения или вятър. Освен това, подобренията на напрежението в коремните мускули на пациента, нежността на корема, нежността на отскок и звукът на червата се считат за успешна терапия. В допълнение, нивата на амилаза в кръвта и урината, както и рутинните тестове за кръвна и чернодробна функция, бяха върнати към нормалното и степента на панкреатичния оток се подобри в сравнение с предишните изследвания в САЩ и CT на коремен B-режим. За определяне на терапевтичните резултати бяха използвани следните категории: Отличен, достигащ гореспоменатия стандарт за четири дни; ефективно, достигайки гореспоменатия стандарт за седем дни; неефективен, като не успява да достигне стандарта след осем дни.

Изолация на пробата

Ендоскопската субмукозна дисекция (ESD), подпомагана от Sinker, е ефективна техника за отстраняване на минус повърхностни тъкани на панкреаса (35); по този начин, тази техника е предпочитаният подход за получаване на хирургични проби от пациенти с AP. Етичните въпроси се смятаха за много важни. Приоритет беше да се гарантира, че участието на пациентите е изцяло доброволно и че се запазва поверителността на пациента. Експертите, провеждащи проучването, не трябва да се опитват да убедят участниците да дарят тъкани, ако участникът изобщо се съмнява по отношение на безопасността или етиката на изследването.

Потенциални медииращи фактори

Съобщава се, че редица объркващи фактори са свързани с повишен риск от AP (36-40). Предишен мета-анализ показа, че затлъстяването е свързано с по-висок риск от AP (41); поради това в настоящото проучване е измерен индексът на телесна маса (ИТМ) на пациентите. Полът също се разглежда като важен фактор, определящ резултата при пациенти с AP (42); по този начин бяха проучени и данните за относителните женски и мъжки реакции към лечението на AP. Консумацията на алкохол може да увеличи риска от AP (43,44); следователно всички субекти са непиещи, никога не са консумирали алкохол, за да се избегне намеса. За да се избегнат проблеми, свързани с възрастта (45,46), всички лица са били на възраст между 40 и 55 години. Всички доброволци съобщават за честота на консумация на храна от три хранения на ден и консумацията на храна съответства на здравословния индекс на скандинавската храна (47,48). Приемът на калории се изчислява според самооценката на дневния прием на калории (49).

ELISA

Концентрацията на липаза беше изследвана с помощта на ELISA, с липазни антитела, закупени от Wuhan Jiacheng Biotechnology Co., Ltd. (Wuhan, Китай). Образците за биопсия се смилат с течен азот. Заземените проби се разреждат с 1/200 във фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS) и се прехвърлят в ямки, покрити с антитела. Следвайки инструкциите на производителя, всички ямки се промиват три пъти с PBS и се добавя IgG (конюгиран с Immuno Pure ® пероксидаза кози анти-човешки IgG; 21348; Beijing Jiamay Biotechnology Ltd., Пекин, Китай) и се инкубира за 30 минути. След измиване, 3,3 ′, 5,5′-тетраметилбензидин (54827-17-7; Robiot Co., Ltd., Нанкин, Китай) се добавя и култивира в продължение на 10 минути за визуализация. Накрая, абсорбцията на сместа беше изследвана при 450 nm с помощта на SM600 ELISA четец за плочи (Shanghai Utrao Medical Instrument Co., Ltd., Shanghai, China). Концентрацията на липаза се изчислява съгласно стандартна крива на калибратор.

Количествена верижна реакция на полимеразна обратна транскрипция (qRT-PCR)

Нивата на експресия на mRNA на PRSS1 и SPINK1 бяха оценени с помощта на qRT-PCR. РНК се извлича от AP тъкани с помощта на GenElute ™ Mammalian Total RNA Miniprep kit (RTN10; Sigma-Aldrich Trading Co., Ltd., Шанхай, Китай). Първоначалната cDNA се амплифицира от РНК, използвайки произволен праймер. Молекулите cDNA бяха използвани като шаблон за qRT-PCR на PRSS1 и SPINK1 транскриптите на бърз qTOWER 2.0 (Analytik Jena AG, Тюрингия, Германия). Праймерите за qRT-PCR бяха както следва: PRSS1 (GenBank №. BC103998.2) смисъл, 5′-AGGGGAATGAGCAGTTCATC-3 ′ и антисенс, 5′-CACCAGAACTCAGAGTGTTG-3 ′; SPINK1 (GenBank №. NM003122.3), смисъл, 5′-GAAGAGACGTGG TAAGTGCG-3 ′ и антисенс, 5′-CCATCAGTCCCACAG ACAGGG-3 ′; GAPDH смисъл, 5′-CCCTTCATTGACCTCAAC TAC-3 ′ и антисенс, 5′-CCACCTTCTTGATGTCATCAT-3 ′. GAPDH се използва като вътрешен контрол. Всички гени се амплифицират чрез 30 цикъла на нагряване в продължение на 30 секунди при 94 ° С, последвано от 1 минута при 60 ° С. Качеството на синтезираната cDNA се определя, като се използва GAPDH като референтен ген.

Нива на експресия на протеин на PRSS1 и SPINK1

Нивата на експресия на протеини на PRSS1 и SPINK1 бяха определени чрез Western blot анализ. Протеинът се изолира от избрани AP тъкани и се разделя, използвайки 12% SDS-PAGE. Отделеният протеин беше електротрансфериран върху мембрани от поливинилиден флуорид (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA), които бяха блокирани с 5% обезмаслено сухо мляко в продължение на 1 час и след това инкубирани с първично антитяло: Mouse anti -човешко моноклонално антитяло PRSS1 (MAB3848; 1: 5000; R&D Systems Китай, Шанхай, Китай) и мишко античовешко моноклонално антитяло SPINK1 (70R-5308; 1: 2000; Beijing Dakewei Bio-Technology Co, Ltd., Пекин, Китай ). Добавено е вторично антитяло (конюгирано с пероксидаза на хрян против мишка; кат. № 201201; 1: 10 000; Shanghai Guoyuan Biotechnology Co., Ltd., Шанхай, Китай) и е извършено откриване на хемилуминесценция с помощта на комплект от GE Healthcare (Piscataway Ню Джърси, САЩ).

Статистически анализ

T-тестът и χ2 тестът бяха използвани за откриване на статистическата значимост за променливите между експерименталната и контролната групи. Данните бяха анализирани с помощта на софтуера SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Чикаго, IL, САЩ) и P 0.05). Всички тези фактори бяха изключени между експерименталната и контролната групи по време на събирането на данни. Броят на случаите на всеки етап от AP е сходен между експерименталната и контролната групи (Таблица I).

Ефекти на ITCM върху пациенти с AP

Таблица II

Сравнение на клиничните характеристики за пациенти с АП преди и след лечение с ITCM.

Таблица II

Сравнение на клиничните характеристики за пациенти с АП преди и след лечение с ITCM.

• Влияние на мастния черен дроб върху тежестта и клиничния резултат при остър панкреатит
• Как китайската медицина убива раковите клетки - ScienceDaily
• Как да лекуваме остър панкреатит в Аюрведа
• Подобрява се! Остър панкреатит Панкреатит и панкреатични разстройства Форуми Пациент
• То; s Време за вашето есенно почистване! Използвайте китайска медицина, за да ядете за сезона