Член Допълнение

  • Пълен член
  • Цифри и данни
  • Препратки
  • Цитати
  • Метрика
  • Препечатки и разрешения
  • PDF

Резюме

Диарията на пътниците (TD) се причинява от Escherichia coli в 30% от случаите. Разработихме фагов коктейл за профилактика на TD, причинен от E.coli, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Salmonella enterica, Listeria monocytogenes или Staphylococcus aureus, и изследвахме неговата ефективност срещу инфекция, причинена от непатогенния Lac (-) щам E .coli K12 C600 при опити върху животни и хора. На 6-ия ден от опитите както върху животни, така и върху хора е открит щам E. coli K12 C600 в титър от 10 4 CFU/g изпражнения на мишки и 10 6 CFU/g човешки изпражнения в контролните (нелекувани) групи, докато не открити в пробите на някоя от изследваните (третирани с фаг) групи. Тези резултати имат голямо значение, тъй като оригиналните колифаги, включени в коктейла, имат широк спектър от приемници, включително ETEC, EAEC и EHEC щамове, които причиняват тежки случаи на TD.

малък

Предистория и цели

Материали и методи

Публикувано онлайн:

Фигура 1. Сравнение на генома на колифага EcD7 с афинните фаги на Т4-подобни вируси Phi1 и RB49.

Фигура 1. Сравнение на генома на колифага EcD7 с афинните фаги на Т4-подобни вируси Phi1 и RB49.

Публикувано онлайн:

Фигура 2. Сравнение на генома на колифага V18 с афинните фаги на Myoviridae rv5, 2 JES-2013, vB_EcoM_FFH2 и vB_EcoM-FV3.

Фигура 2. Сравнение на генома на колифага V18 с афинните фаги на Myoviridae rv5, 2 JES-2013, vB_EcoM_FFH2 и vB_EcoM-FV3.

Публикувано онлайн:

Фигура 3. Електронна микрофотография на колифага EcD7 (увеличение × 80 000).

Фигура 3. Електронна микрофотография на колифага EcD7 (увеличение × 80 000).

Публикувано онлайн:

Фигура 4. Електронна микрофотография на колифага V18 (увеличение × 80 000).

Фигура 4. Електронна микрофотография на колифага V18 (увеличение × 80 000).

Бяха проведени няколко теста за характеризиране на стабилността на бактериофагите: устойчивост на повишена температура, вариране на pH и хлороформ. Устойчивостта на фагите към повишена температура се наблюдава в диапазона 50–85 ° C. Количественото определяне на плаката от нагрети проби беше проведено с помощта на метод за нанасяне на двоен агар на Gratia. Използвахме обработка с хлороформ (и допълнително центрофугиране) като най-евтиния метод за елиминиране на бактериални клетки и остатъци от фаги-лизати, за да ги стерилизираме предварително преди микрофилтрация. Нагряването на фаги-лизати също е добре известен етап на предварителна стерилизация. Така че тези характеристики са много важни за бъдещото производство на продукти, базирани на фаги. Фаговите лизати се инкубират за един час при стайна температура с буферни разтвори, калибрирани до специфични стойности на рН, за да се определи устойчивостта на бактериофагите към киселинни и алкални стойности на рН. Оценихме титъра на фагите във фаго-лизатите след инкубация, използвайки метода Gratia.

Хранителната добавка на базата на фаги е в течна форма и съдържа допълнително сироп от корен от женско биле, ябълков пектин и глицин. Сиропът от корен от женско биле може да е подходящ за спазмолитични, обвиващи свойства и за подобряване на органолептичните (вкусови) свойства. Ябълковият пектин може да бъде подходящ като токсинен сорбент и регулатор на вискозитета. Глицинът може да бъде подходящ като стабилизатор на фаговия титър при съхранение, а също и като антиоксидант.

Фармакокинетиката на базираната на фаги пробиотична хранителна добавка е проучена върху модел на безпородни мишки * (10 индивида) след еднократна интрагастрална инжекция.