Статии

  • Пълен член
  • Цифри и данни
  • Препратки
  • Цитати
  • Метрика
  • Лицензиране
  • Препечатки и разрешения
  • PDF

РЕЗЮМЕ

2. Материали и методи

2.1. Птици, диети и управление

Всички експериментални процедури, използвани в това изследване, са одобрени от Комитета по етика на животните към Университета в Гилан. Подробности за управлението и отглеждането на птиците са докладвани другаде (Mohiti-Asli & Ghanaatparast-Rashti 2017). Накратко, в това проучване бяха използвани 200 еднодневни пилета с бройлери Ross 308 с равномерно BW. Пилетата бяха поставени на случаен принцип в 20 подови кошари (1 m × 1 m). Писалките бяха разпределени на случаен принцип за 4 обработки, като всяка обработка имаше 5 повторения на 10 птици. Предлагаха се фураж и прясна вода ad libitum през целия експеримент. Бройлерите са били хранени с диета на основата на царевично-соево брашно (стартер, d 0–10; производител, d 11–24; довършител, d 25–42, каша), а подробности са описани по-рано (Mohiti-Asli & Ghanaatparast-Rashti 2017). Включени диетични лечения: (1) Контрол (без фитогенни), (2) CBP (150 ppm), (3) OEO (300 ppm) и (4) OEO (500 ppm). Прилага се CBP (Digestarom ® Biomin GmbH, Херцогенбург, Австрия), който съдържа смес от етерични масла от риган, анасон и цитрусова кора при 150 ppm. Въз основа на SPME-GC анализ (Mountzouris et al. 2011), карвакролът, основното активно съединение на сместа от етерично масло, е 102 g от химическия компонент на kg CBP. Orego-Stim ® (Meriden Animal Health Ltd., Luton, UK), търговската добавка на базата на риган, използвана в настоящото проучване, съдържа 5% етерично масло от Origanum vulgare subsp. Hirtum растения и 95% естествен фуражен носител (Giannenas et al. 2003).

пълна

2.2. Тегло на храносмилателните органи и дължина на червата

Определено е теглото на празната реколта, стомаха, черния дроб и задстомашната жлеза на евтаназираните птици на възраст 42 d и са изчислени относителните тегла за живо BW. Чревните отдели на двете евтаназирани птици бяха отстранени от йеюнума и илеума, както следва: (1) по средата между точката на влизане на жлъчните пътища и дивертикула на Мекел (йеюнум) и (2) на 10 см близо до цексалната връзка (илеум). Измерва се дължината на всеки участък от червата и се изчислява относителната дължина към цялата дължина на червата.

2.3. Чревни микробни популации

Две птици от всяка писалка бяха произволно избрани и евтаназирани чрез цервикална дислокация на 21 d възраст. Последната половина на илеума (дисталната половина на тънкочревния участък, обхваната между дивертикула на Мекел до илеоцекалната връзка) тъканите бяха бързо изрязани, съдържанието веднага се събираше в стъклени съдове под CO2 и се замразяваше при -70 ° C, за да се определи Е. coli и Лактобацилус преброяване чрез използване на културни техники, описани от Hu et al. (2012). Илеалното съдържание (0,2 g) се разрежда в 2 ml стерилизиран физиологичен разтвор и се правят три 10-кратни серийни разреждания (10 -4, 10-5 и 10-6) от разредено илеално съдържание. Порция от 100 ul от последните три разреждания се разпределя равномерно върху плаки. Лактобацилус бяха изброени на MRS агар при 37 ° С за 48 часа и Е. coli колониите бяха определени върху агар на MacConkey, инкубиран за 24 h при 37 ° С. Единиците, образуващи колонии (CFU) от плочи с преброими колонии, са номерирани и осреднени, за да изразят 1 g CFU на грам илеално съдържание.

2.4. Хистоморфометрия на тънките черва

Взети са пробни участъци (3 см) от низходящата йеюнум и илеумната област; изплаква се с нормален физиологичен разтвор (рН 7.2) и се поставя в 10% буфериран неутрален разтвор на формалдехид (рН 7.2–7.4). Две филийки на проба се изрязват перпендикулярно на надлъжната ос на червата и се фиксират в парафин. Напречните сечения бяха нарязани (3 µm), оцветени от хематоксилин-еозин и анализирани под светлинния микроскоп Olympus BH-2 и камерата Olympus DV50 (Olympus Белгия, Aartselaar, Белгия), за да се определят морфометричните показатели с помощта на софтуер за анализ на изображения (версия на софтуера Optimus 6.5, Медийна кибергенетика, Северно четене, Масачузетс). Измерените морфометрични променливи включват височина на вилусите (VH), дълбочина на криптата (CD), ширина на вилусите, lamina properia и tunica muscularis.

От всяка секция бяха измерени десет вили и свързани крипти. Измерванията за VH бяха направени от върха на вилуса до кръстовището на вилуса – крипта. CD беше дефиниран като дълбочината на инвагинацията между съседни вили и ширината на вилусите беше измерена от горната и долната част на вили. Изчислено е съотношението VH към CD. Площта на повърхността се изчислява, като се използва формулата = (2π) × (VW/2) × (VH), в която VW = ширина на вилуса и VH = височина на вилуса (Sakamoto et al. 2000). Дебелината на ламина проприа е измерена в пространството между основата на ворсинките и върха на лигавицата на мускулатурата. Мускулният слой се измерва от върха на muscularis propria до серозата. Измерването на дебелината на мускулатурата се извършва от долната част на субмукозата до външната част на външния мускулести слой. Средната стойност от 10 измервания на проба е използвана като средна стойност за по-нататъшен анализ (Sakamoto et al. 2000).

2.5. статистически анализи

Нормалното разпределение на остатъците и дисперсионната хомогенност на данните бяха тествани съответно по UNIVARIATE процедура и тест на Levene’s. Експерименталната единица беше пилетата за клане за хистоморфологични параметри на тънките черва, тегло на храносмилателния орган и броя на илеалните бактерии, съставляващи две наблюдения във всяка реплика. Данните бяха анализирани като напълно рандомизиран дизайн, използвайки GLM процедура на SAS (SAS Institute 2002) и разликите между отделните средства бяха сравнени чрез теста на Tukey (P 2017). Накратко, средният дневен прием на фураж при птиците, хранени с CBP, е по-нисък от контролния, но не се различава сред CBP и нивото на OEO. Въпреки това, наддаването на телесно тегло и съотношението на преобразуване на фуражите не се повлиява от диетични лечения; Европейският фактор за ефективност на производството е по-голям за бройлери, хранени с 300 ppm OEO, отколкото тези, хранени с контролна диета или CBP.

3.1. Тегло на храносмилателния орган и дължина на червата

Относителното тегло на храносмилателните органи не се влияе от диетите (P > .05; Маса 1). Бройлери, хранени с CBP в диетата, са имали по-висока относителна дължина на дванадесетопръстника от тези, хранени с диети, допълнени с 500 ppm OEO (P .05; Таблица 2).

Публикувано онлайн:

Таблица 1. Ефектът на диетичните фитогенни добавки върху относителното тегло на храносмилателния орган (% телесно тегло), червата, на бройлери на 42 d възраст.

Публикувано онлайн:

Таблица 2. Ефектът на диетичните фитогенни добавки върху относителната дължина на сегментите на тънките черва (% тънки черва) на бройлери на възраст 42 d.

3.2. Микробиология на тънките черва

Брой на илеални бактерии, включително Е. coli и Лактобацилус са обобщени в Таблица 3. Бройлери, хранени с OEO или CBP в диетата, са имали по-ниски Е. coli в сравнение с тези, хранени с контролна диета (P .05).

Публикувано онлайн:

Таблица 3. Ефектът на диетичните фитогенни добавки върху илеала Лактобацилус и Е. coli на 21 г възраст.

3.3. Морфология на тънките черва

Включването на 300 ppm диетични OEO значително повишава VH (P .05; Таблица 4). В сравнение с контролната група, бройлерите, хранени с добавки с ОЕО, имат по-ниска дебелина на маскулиса в йеюнума (P Сравняване на ефектите на комбинирана фитогенна фуражна добавка с индивидуално етерично масло от риган върху чревната морфология и микрофлората при бройлери

Публикувано онлайн:

Таблица 4. Ефектът на диетичните фитогенни добавки върху морфологичните свойства на йеюнума на бройлери на 21 d възраст.

Бройлери, хранени с диета, допълнена с 300 ppm OEO, са имали по-висок VH (P .05).

Публикувано онлайн:

Таблица 5. Ефектът на диетичните фитогенни добавки върху морфологичните свойства на илеума на бройлери на 21 d възраст.

4. Дискусия

Резултатите показват, че относителното тегло на панкреаса, черния дроб, стомаха и провентрикулуса не се влияе нито от CBP, нито от отделните OEO. Тази констатация е в съответствие с резултатите от предишни доклади (Amad et al. 2011; Khaligh et al. 2011; Akbarian et al. 2013). Amad et al. (2011) съобщават, че прилагането на смес от етерични масла от тимол и анетол намалява относителното тегло на черния дроб, без никакъв ефект върху теглото на пилешкото сърце, бъбреците или далака. Akbarian et al. (2013) демонстрира, че теглото на панкреаса, стомаха, черния дроб и провентрикулуса не се променя чрез използване на растителни екстракти (екстракт от лимонова кора или екстракт от портокалова кора или Curcuma xanthorrhiza). Освен това, Cherian et al. (2013) съобщават, че храненето на бройлери с Artemisia annua в диетата не повлиява теглото на черния дроб От друга страна, Debersac et al. (2001) посочват, че билков екстракт от розмарин, съдържащ розмаринова киселина, флавони и монотерпени, засилва чернодробния метаболизъм и увеличава чернодробното тегло при плъхове.

В настоящото проучване бройлерите, хранени с CBP, имат по-висока относителна дължина на дванадесетопръстника от тези, хранени с 500 ppm OEO. Сарика и др. (2014) посочват, че OEO (250 или 500 ppm) не влияе върху относителната дължина на йеюнума при 3-d пилета, въпреки че относителната дължина на илеума е по-висока с 500 ppm OEO при d 14 в сравнение с контрола. Brenes et al. (2008) посочват, че относителното тегло на панкреаса и черния дроб и относителните дължини на дванадесетопръстника, йеюнума и цеката се увеличават в отговор на увеличаване на семената от нахут, които съдържат антинутриционни фактори като протеазни инхибитори и полифеноли. Освен това, Miles et al. (2006) съобщават, че диетичното включване на антибиотични стимулатори на растежа намалява чревната дължина. Предполага се, че увеличаването на размера на червата може да бъде адаптивна реакция за увеличаване на нуждата от ензими; въпреки това намаляването на теглото на храносмилателните органи има пряка икономическа полза, тъй като може да се увеличи делът на добива на бройлери (Brenes et al. 1993).

Вукич-Враньеш и др. (2013) и Hong et al. (2012) посочват, че хранителните добавки на CBP не засягат VH, CD и VH към CD в йеюнума на 21 и 42 d възраст. За разлика от тях, Peric et al. (2010) съобщават, че бройлерите, хранени с CBP в диета, имат по-ниско CD и по-малко съотношение VH към CD. Те също така съобщават, че фитогенните добавки нямат ефект върху VH, VW и повърхността и дебелината на tunica muscularis, без никакъв ефект върху морфологичните параметри на йеюнума на 21 d възраст. Хатак и др. (2014) съобщават, че хранителните добавки на CBP (риган и мащерка) увеличават VH (100 ppm фитогенни смеси), VW (200, 300 и 500 ppm фитогенни смеси) и повърхността на вилусите (300 и 500 ppm фитогенни смеси) . Фенолните съединения, включително тимол и карвакрол, потенциално подобряват чревната цялост, която е отговорна за усвояването на хранителните вещества (Du et al. 2016). Предполага се също така, че диетичните ОЕО чрез намаляване на броя на общо вредните бактерии в чревната стена, чрез по-ниска адхезия към епитела, намаляват производството на токсични съединения и увреждането на чревните епителни клетки на бройлери (Garcia et al. 2007; Sarica et 2014 г.).

5. Заключение

Диетичните добавки от 300 ppm OEO подобряват хистоморфологичните свойства на тънките черва, като височина на вилусите и площ, също облекчени Е. coli се считат за патогенни микроорганизми в пилешките черва. Може да се заключи, че двата тествани фитогеника имат еднаква антимикробна активност, въпреки че оказват различно въздействие върху морфологичните признаци на червата. Следователно решението за избор на фитогеника за диетата на бройлери не може да се основава на тяхната антимикробна активност и трябва да се вземе от резултатите от хистоморфометрията на тънките черва.