L. Ceglia

1 Jean Mayer Министерство на земеделието, Изследователски център за човешко хранене в Университета Тъфтс, Бостън

измерване

С. А. Ейбрамс

2 Министерство на земеделието на САЩ/Служба за селскостопански изследвания, Център за изследване на детското хранене, Катедра по педиатрия, Медицински колеж Бейлор и Детска болница в Тексас, Хюстън

С. С. Харис

1 Jean Mayer Министерство на земеделието, Изследователски център за човешко хранене в Университета Тъфтс, Бостън

Х. М. Расмусен

1 Jean Mayer Министерство на земеделието, Изследователски център за човешко хранене в Университета Тъфтс, Бостън

G. E. Dallal

1 Jean Mayer Министерство на земеделието, Изследователски център за човешко хранене в Университета Тъфтс, Бостън

Б. Доусън-Хюз

1 Jean Mayer Министерство на земеделието, Изследователски център за човешко хранене в Университета Тъфтс, Бостън

Резюме

Двойният стабилен изотопен метод с 24-часово събиране на урина е златният стандартен подход за измерване на фракционната абсорбция на калций. Необходимостта от събиране на урина обаче за 24 часа прави тази техника трудоемка и трудоемка. Нашето проучване се стреми да определи дали методът с двоен изотоп, използващ единична серумна проба, получена 4 часа след приложението на първоначалния изотоп, предоставя полезен подход за измерване на фракционната абсорбция на калций. След метаболитна диета с фиксиран прием на калций от 30 mmol/ден в продължение на 10 дни, на деветнадесет здрави индивида на възраст 54–74 години е дадено пробно хранене с орален изотоп (44 Ca), последвано 2 часа по-късно от интравенозен изотоп (42 Ca). След като се приложи оралният изотоп, урината се събира за 24 часа и серумна проба се получава след 4 часа. Съотношението на оралните към интравенозните изотопи се измерва в урината и серума чрез масспектроскопия. Фракционната абсорбция на калций е 16,2 ± 7,7% при 4-часовия метод на единичен серум спрямо 18,5 ± 7,5% при 24-часовия метод на урината. Има малка средна разлика между методите на урината и серума от 2,33% с доверителен интервал -3,97 до 8,60%. Двата метода показаха силна линейна асоциация (r = 0,912, p Ключови думи: фракционна абсорбция на калций, стабилни изотопи, 44 Ca, 42 Ca

Въведение

Фракционната абсорбция на калций е процентът на калций, абсорбиран в червата от перорално натоварване с калций. Разработени са редица изотопни методи, които могат да измерват фракционната абсорбция на калций, използвайки радиоизотопи, стабилни изотопи или комбинация от двете. От наличните в момента методи, методът на двойния стабилен изотоп с 24-часово събиране на урина се счита за най-точен и надежден [Griffin et al., 2005; Хийни, 2001]. Освен това той не включва йонизиращо лъчение. Тази техника се състои от прилагането на два различни калциеви изотопа - един орален и втори интравенозен изотоп. След тяхното приложение урината се събира за 24 часа. Определя се относителната част от оралния прием в сравнение с интравенозната доза изотоп в урината и тя представлява частта от абсорбирания орален изотоп [Abrams, 1999]. Неудобството на този метод е необходимостта от събиране на урина за 24 часа, което отнема много време и е трудоемко за извършване.

Нашето проучване се стреми да установи дали методът с двоен изотоп, използващ единична серумна проба, получена 4 часа след приложението на първоначалния изотоп, осигурява жизнеспособен алтернативен подход за оценка на фракционната абсорбция на калций. 4-часовият единичен серумен метод беше извършен едновременно с установения 24-часов метод за урина при същите деветнадесет пациенти на фиксиран прием на калций и резултатите бяха сравнени.

Материали и методи

Проучване дизайн и предмети

Диета и добавки

Отделът за метаболитни изследвания осигури метаболитна диета, съдържаща 15 mmol/ден диетичен калций. Приемът на протеин е 1,5 g/kg/ден при девет субекта и 0,5 g/kg/ден при десет субекта (като част от различна цел, както е описано по-рано [Ceglia et al., 2009a; Ceglia et al., 2009b]). Други съдържания в диетата са описани по-рано [Ceglia etal., 2009a; Ceglia etal., 2009b]. Субектите са приемали таблетка, съдържаща 15 mmol калций (като трикалциев фосфат) и 125 IU витамин D3 (Поза D, US Rhodia, Cranbury, NJ) и мултивитамин (марка CVS), съдържащ 400 IU витамин D3 с вечерята.

Биохимични измервания

Кръвта е взета след 12-часово бързо гладуване през нощта между 7 и 10 сутринта. Всички проби от отделни субекти бяха групирани за анализи. Урината се събира в празна бутилка за събиране за 24 h и се измерва за калций в присъствието на 35% разтвор на HCl (15 μl за 1 ml урина). Измерихме екскрецията на калций в урината, серумния калций, нивото на 25-хидроксивитамин D в серума и непокътнатия PTH, както е описано по-горе [Ceglia et al., 2009a; Ceglia et al., 2009b].

4-часов единичен серумен метод

Субектите пристигнаха в центъра сутринта след пост през нощта, поставен им беше периферен интравенозен катетър, бяха помолени да изпразнят пикочния си мехур и им беше дадена закуска в 8 сутринта. Към края на закуската субектите получават 44 Ca (0,375 mmol за субекти 42 Ca (0,025-0,038 mmol за субекти 44 Ca доза в серум 4 часа след приложението до 42 Ca доза 2 часа след приложението.

24-часов метод за урина

Този метод се провежда на всеки субект едновременно с 4-часовия единичен серумен метод. 24-часовото събиране на урина започва веднага след прилагането на оралния изотоп със закуска и е завършено в 8 сутринта на следващия ден. Аликвотна част от 5–10 ml урина се отстранява от събраната 24-часова колекция и се замразява за по-късен анализ. Фракционната абсорбция на калций се определя като съотношението на кумулативното възстановяване на 44 Ca към кумулативното възстановяване на 42 Ca в урината.

Стабилни изотопи

маса 1

Изходни характеристики (индивидуални стойности и средна стойност ± SD) на деветнадесетте пациенти.

Тема Възраст (год) Пол (M/F) Телесно тегло (Kg) Серумен калций (mmol/L) PTH a (pmol/L) 25 (OH) D (nmol/L) UCa (mmol)
154F79.72.274.88405.96
254F58.92.326.26852.37
354М84,02.225.84454.54
455F68.32.40ND533.54
556F60.32.303.71751.80
657F53.12.353.82602.79
758F63.82.353.82831.80
859F64.22.22ND504.72
959F65.12.254.99604.62
1059F67.42.226.68802.42
11.60М88.82.226.05652.02
1261F67.22.224.35402.30
1362М81.12.303.29507.04
14.64М64,02.225.52551.20
1567М74.32.325.09453.24
16.69F58.72.275.62652.35
1769М83.12.324.14402.15
18.71F61.12.404.35900,37
19.82F60.82.27ND701.01
средно ± SD62 ± 7 68,6 ± 10,22,28 ± 0,064,90 ± 1,0260,5 ± 16,22,96 ± 1,73

Референтните граници за горните биохимични измервания са: серумен калций 2,08–2,55 mmol/L, PTH 1,06–7,32 pmol/L, 25 (OH) D нива 23–95 nmol/L и екскреция на uca 2,5–7,5 mmol/24 h