Резюме

Обективен: Да се ​​изследва абсорбцията на тирозол и хидрокситирозол от умерени и продължителни дози консумация на необработен зехтин. Изследването също има за цел да изследва дали тези фенолни съединения могат да се използват като биомаркери за прием на необработен зехтин.

Проектиране и интервенции: Поглъщане на единична доза необработен зехтин (50 ml). След това в продължение на една седмица участниците спазваха обичайната си диета, която включваше 25 ml/ден същия девствен зехтин като източник на сурови мазнини.

Настройка: Unitat de Recerca en Farmacologia. Institut Municipal d'Investigació Mèdica (IMIM).

Субекти: Седем здрави доброволци.

Резултати: Увеличаване на 24 часа тирозол и хидрокситирозол в урината, след поглъщане на еднократна доза (50 ml) и краткосрочна консумация (една седмица, 25 ml/ден) необработен зехтин (P

Въведение

Средиземноморската диета, при която зехтинът е основният мастен компонент, е свързана с по-ниска честота на коронарна болест на сърцето и някои видове рак (Renaud et al, 1995). Вирджинският зехтин е богат на фенолни съединения, за които е доказано, че забавят инвитро индуцирано от метал и радикално зависимо LDL окисление (Visioli et al, 1995; Fitó et al, 2000; Owen et al, 2000). Други биологични свойства на фенолните съединения на маслиновото масло включват антитромбоцитна агрегация и индукция на апоптоза в HL-60 клетки (Manna et al, 1999).

Данните от модели на клетъчни култури предполагат, че хидрокситирозолът се абсорбира количествено на чревно ниво (Manna et al, 2000). Перорално приложеното дозиране на маслена основа при плъхове води до значително по-голямо елиминиране на тирозол и хидрокситирозол в рамките на 24 часа урина, отколкото дозиране във вода (Tuck et al, 2001). Първите експериментални доказателства за абсорбцията на тирозол и хидрокситирозол от зехтин при хора са получени от Visioli et al (2000) от единична орална доза от 50 ml обогатени с фенол маслинови масла. След поглъщане на добавки, съдържащи 100 mg феноли от зехтин, голяма част от фенолите на зехтин се абсорбират, като абсорбираните феноли на маслиновото масло, силно модифицирани в организма (Vissiers et al, 2002). Съобщава се и за бионаличността на тирозол и хидрокситирозол при хора от еднократна перорална доза от 50 ml необработен зехтин в естествената му форма (Miró-Casas et al, 2001a, b). Нивата на тирозол и хидрокситирозол в урината се повишават след консумация на необработен зехтин, достигайки пик на 0–4 часа и връщайки се към базовите стойности на 12–24 часа (Miró-Casas et al, 2001a, b).

Това проучване има за цел да определи дали тирозолът и хидрокситирозолът могат да се абсорбират от умерени и продължителни дози от консумация на необработен зехтин. Изследването има за цел също да изследва дали тези фенолни съединения могат да се използват като биомаркери за прием на необработено зехтин.

Методи

Субекти

Изследването е направено в съответствие с Хелзинкската декларация от 1975 г., преработена през 1989 г. Протоколът е одобрен от местната комисия по етика (CEIC-IMAS). Субектите са дали писмено информирано съгласие. Седем здрави доброволци (четири жени и трима мъже), на възраст между 22 и 63 години, бяха наети от персонала на лабораторията. Субектите са имали тегло 64,1 ± 14,2 kg (средно ± sdd; мъже 75,7 ± 14,0 kg и жени 55,5 ± 6,4 kg) и индекс на телесна маса 22,8 ± 3,0 (средно ± sd; мъже 24,7 ± 3,8 и жени 21,1 ± 0,95). Те се считаха за здрави въз основа на резултатите, получени след физически преглед и рутинни лабораторни тестове.

Характеристики на зехтина

Уча дизайн

Експериментът продължи 12 дни. Доброволците са спазвали диета със зехтин и ниски антиоксиданти през 4 дни (период на измиване). Диетолог ги инструктира да изключат няколко храни от диетата си (кафе, чай, плодове, зеленчуци, вино и зехтин). В 8 часа сутринта на ден 5, 50 ml (44,5 g) необработена маслина бяха приложени на участниците в единична доза, погълната директно или с малко хляб. След това в продължение на една седмица всички участници спазваха обичайната си диета, която включваше 25 ml (22,5 g)/ден същия девствен зехтин, погълнат на 5-ти ден като източник на сурови мазнини. Двадесет и четири часа урина се събира на изходно ниво (ден 4), след приложението на 50 ml необработен зехтин (ден 5) и след седмица от 25 ml/ден консумация на необработен зехтин (ден 12). Пробите от урина се съхраняват при -80 ° C до техния анализ. Двадесет и четиричасовите обеми на урината варират от 0,8 до 2,8 l, от 0,98 до 2,55 l и от 0,78 до 3 l, съответно на 4, 5 и 12 дни. Участниците бяха помолени да избягват висок прием на храни, съдържащи фенолни съединения. Ежедневни диетични записи бяха получени от всеки доброволец.

Диетична оценка

Приемът на хранителни вещества се изчислява от седем дневни диетични записа със софтуера Diet Analysis Nutritionist IV (N Squared Computing, Сан Бруно, Калифорния). Дневният енергиен прием на субектите през седмицата на продължително поглъщане на маслиново масло варира от 1465 до 2284 kcal (средно 1748 ± 331 kcal) и се състои от липиди 37,5 ± 3% (PUFA 4,8 ± 1,2%, MUFA 17,9 ± 2,1% и SFA 14,7 ± 1,58%), въглехидрати 44,2 ± 5,1% и протеини 18,3 ± 2,7%.

Лабораторни измервания

статистически анализи

Разликите между групите бяха оценени чрез теста на Wilcoxon за сдвоени проби. Статистическата значимост беше определена като P

Резултати

Нивата на тирозол и хидрокситирозол в урината на изходно ниво, след единична доза (50 ml) и след продължителни дози (една седмица, 25 ml на ден) необработен зехтин се отчитат на фигура 1. Нивата на тирозол и хидрокситирозол в урината се увеличават след еднократна доза (P Фигура 1

умерени

Тирозол и хидрокситирозол в 24-часова урина след еднократна доза (50 ml) и продължителни дози (една седмица, 25 ml/ден) консумация на необработен зехтин.

Таблица 1 показва 24-часовото възстановяване на тирозол и хидрокситирозол в урината като процент от очакваното администрирано количество и през двата интервенционни периода. Възстановяването на тирозол в урината е сходно. Средните стойности на възстановяване за хидрокситирозол след една седмица от 25 ml/дневно поддържани дози необработен зехтин са 1,5 пъти повече от тези, получени след еднократна доза от 50 ml. Също така, в края на продължителния период средното количество хидрокситирозол в урината в 24 часа урина (822 µg) е по-високо от дневно приложената доза (685 µg).

Дискусия

Данните, получени в настоящото проучване, потвърждават абсорбцията на тирозол и хидрокситирозол след консумация на необработен зехтин. Важна констатация от това изследване е, че тирозолът и хидрокситирозолът в урината се абсорбират от продължителна и умерена доза необработен зехтин в естествената му форма. Тази доза е близка до тази, използвана като дневен прием при типична средиземноморска диета.

Въпреки това изглежда, че съществуват разлики в метаболизма на фенолните съединения. Нивата на тирозол в урината, получени след една седмица продължителни дози (25 ml/ден) необработен зехтин, са по-ниски от тези, получени след еднократна доза от 50 ml. Възстановяването на тирозол в урината е сходно и през двата интервенционни периода. Нивата на хидрокситирозол в урината обаче са сходни и през двата интервенционни периода, като прогнозното възстановяване на хидрокситирозол в урината след продължителни дози от 25 ml необработен зехтин над 100%.

Понастоящем не знаем кои метаболитни или диетични фактори биха могли да бъдат включени. Бихме могли да отхвърлим аналитичните методологични разлики, като се има предвид, че междудневните коефициенти на вариация (CV%) и точността (% грешка) са само малко по-добри за тирозола, отколкото за хидрокситирозола (CV, 2.8 срещу 6% и грешка 2.7 срещу Съответно 5%; Miró-Casas et al, 2001b). След приемане на единична доза необработен зехтин полуживотът на тирозол и хидрокситирозол се оценява на около 8 часа (Miró-Casas et al, 2001b). Въпреки че продължителното излагане на зехтин може да доведе до дългосрочно натрупване на хидрокситирозол, концентрациите на хидрокситирозол в урината и възстановяването на урината, наблюдавани след продължителни дози от 25 ml зехтин, могат да бъдат обяснени с трудност само чрез достигане на стабилно състояние.

Не се съобщава за присъствието на хидрокситирозол и неговите конюгирани форми (олевропеин и гликозиди на хидрокситирозол) в други храни. Алтернативно, дихидроксифенилетанолът е идентифициран като метаболит от метаболизма на допамин в допаминергичните клетъчни линии (Lamensdorf et al, 2000). Други инвитро проучвания са показали образуването на хидрокситирозол в резултат на 3,4-дихидроксифенил-ацеталдехид (DOPAL), метаболит на допамин, редукция от човешкия чернодробен алкохол дехидрогеназен изоензим (Mardh & Vallee, 1986). Тирозинът, получен от разграждането на хранителния протеин, може да бъде предшественик на ендогенното образуване на допамин в клетки, съдържащи ензима тирозин хидроксилаза (Goldstein et al, 1999). Следователно, ендогенното образуване на хидрокситирозол може да бъде получено от човешкия метаболизъм на диетичния тирозин. Не може да се отхвърли, че може да има екзогенен източник на хидрокситирозолни прекурсори като допамин или други биогенни амини, като тирамин, които присъстват в храната (Novella-Rodríguez et al, 2000).

В заключение, докладваните данни показват, че 24 часа тирозол и хидрокситирозол в урината се абсорбират от продължителни и умерени дози консумация на необработен зехтин. Въз основа на нашите резултати обаче, тирозолът в урината изглежда е по-добър биомаркер за консумация на необработен зехтин, отколкото хидрокситирозол в урината. За потвърждаване на тези резултати са необходими по-нататъшни проучвания с по-дълги интервенционни периоди и използване на необработени маслинови масла с разлики в тяхното фенолно съдържание.

Препратки

Caruso, D, Berra, B, Giavarini, F, Cortesi, N, Fedeli, E & Galli, G (1999). Ефект на необработените съединения зехтин върху in vitro окисляването на човешки липопротеини с ниска плътност. Nutr. Metab. Кардиоваск. Дис., 9, 102–107.

Deiana, M, Aruoma, OI, Spencer, JP, Kaur, H, Halliwell, B, Aeschbach, R, Dessi, MA & Corongiu, FP (1999). Инхибиране на зависимата от пероксинитрит модификация на базата на ДНК и нитрозирането на тирозин чрез антиоксидант хидрокситирозол, получен от екстра върджин. Безплатен Рад. Biol. Med., 26, 762–769.

De la Puerta, R, Ruíz-Gutierrez, V & Hoult, JR (1999). Инхибиране на левкоцитна 5-липоксигеназа от феноли от необработен зехтин. Biochem. Pharmac., 57, 445–449.

Fitó, M, Covas, MI, Lamuela-Raventós, RM, Vila, J, Torrents, J, de la Torre, C & Marrugat, J (2000). Защитен ефект на зехтина и неговите фенолни съединения срещу окисляване на липопротеини с ниска плътност. Липиди, 35, 633–638.

Джованини, C, Straface, E, Modesti, D, Coni, E, Cantafora, A, de Vincenzi, M, Malorni, W & Masella, R (1999). Тирозолът, основният биофенол от зехтин, предпазва от увреждане, причинено от оксидиран LDL в клетки Caco-2. J. Nutr., 129, 1269–1277.

Goldstein, DS, Swoboda, KJ, Miles, JM, Coppack, SW, Nemman, A, Holmes, C, Lamensdorf, I & Eisenhofer, G (1999). Източници и физиологично значение на плазмения допамин сулфат. J. Clin. Ендокринол. Metab., 84, 2528–2531.

Hedelin, H, Grenabo, L & Pettersson, S (1986). Ефектите на уреазата в неразредена човешка урина. J. Urol., 136, 743–745.

Lamensdorf, I, Eisenhofer, G, Harvey-White, J, Nechustan, A, Kirk, K & Kopin, IJ (2000). 3,4-дихидроксифенилацеталдехидът усилва токсичните ефекти на метаболитния стрес в PC12 клетките. Brain Res., 868, 191–201.

Manna, C, Della Ragione, F, Cucciolla, V, Borriello, A, D'Angelo, S, Galletti, P & Zappia, V (1999). Напредък в храненето и рака 2, изд. V Zappia, F Della Ragione, A Barbarisi, GL Russo и R Dello Iacovo, pp115–130, Ню Йорк: Kluwer Academic/Plenum Publishers

Manna, C, Galletti, P, Maisto, G, Cucciolla, V, D'Angelo, S & Zappia, V (2000). Транспортен механизъм и метаболизъм на маслиново масло хидрокситирозол в клетки Caco-2. FEBS Lett., 470, 341–344.

Mardh, G & Vallee, BL (1986). Човешки алкохол дехидрогенази от клас I катализират взаимопревръщането на алкохоли и алдехиди в метаболизма на допамина. Биохимия, 25, 7279–7282.

Miró-Casas, E, Farré Albadalejo, M, Covas Planells, MI, Fitó Colomer, M, Lamuela Raventós, R & de la Torre, R (2001a). Бионаличност на тирозол при хора след поглъщане на необработен зехтин. Clin. Chem., 47, 341–343.

Miró-Casas, E, Farré Albadalejo, M, Covas, MI, Ortuño Rodriguez, J, Menoyo Colomer, E, Lamuela Raventós, R & de la Torre, R (2001b). Капилярна газова хроматография-масспектрометрия количествено определяне на хидрокситирозол и тирозол в човешката урина след прием на зехтин. Анален. Biochem., 294, 63–72.

Novella-Rodríguez, S, Veciana-Nogués, MT & Vidal-Carou, MC (2000). Биогенни амини и полиамини в млека и сирена чрез йонна двойка високоефективна течна хроматография. J. Agric. Храна Chem., 48, 5117–5123.

Owen, RW, Mier, W, Giacosa, A, Hull, WE, Spiegelhalder, B & Bartsch, H (2000). Фенолни съединения и сквален в маслиновите масла: концентрацията и антиоксидантният потенциал на общите феноли, прости феноли, секороиди, лигнани и сквален. Храна Chem. Токсикол., 38, 647–659.

Renaud, S, de Lorgeril, M, Delaye, M, Guidollet, J, Jacquard, F, Mamelle, N, Martin, JL, Monjaud, I, Salen, P & Toubol, P (1995). Критска средиземноморска диета за профилактика на коронарна болест на сърцето. Am. J. Clin. Nutr., 61, 1360–1365.

Salami, M, Galli, C, de Angelis, L & Visioli, F (1995). Образуване на F2-изопростани в окислен липопротеин с ниска плътност: инхибиторен ефект на хидрокситирозола. Pharmac. Рез., 31, 275–279.

Сингълтън, VL и Рос, JA (1965). Колориметрия на общите фенолни съединения с реактив фосфомолибдна-фосфотунгстикова киселина. Am. J. Enol. Витич., 16., 144–158.

Tsimidou, M, Papadopoulos, G & Boskou, D (1992). Определяне на фенолни съединения в необработено маслиново масло чрез обратнофазова HPLC с акцент върху UV детекцията. Храна Chem., 44, 53–60.

Tuck, KL, Freeman, MP, Hayball, PJ, Stretch, GL & Stupans, I (2001). The in vivo съдба на хидрокситирозол и тирозол, антиоксидантни фенолни съставки на зехтин, след интравенозно и орално дозиране на маркирани съединения на плъхове. J. Nutr., 131, 1993–1996.

Visioli, F, Bellomo, G, Montedoro, G & Galli, C (1995). Инхибира се окисляването на липопротеините с ниска плътност инвитро от съставките на зехтина. Атеросклероза, 117, 25–32.

Visioli, F, Galli, C, Bornet, F, Mattei, A, Patelli, R, Galli, G & Caruso, D (2000). Фенолните зехтини се абсорбират в зависимост от дозата при хората. FEBS Lett., 468, 159–160.

Vissiers, MN, Zock, PL, Roodenburg, AJ, Leenen, R & Katan, MB (2002). Фенолите от зехтин се абсорбират при хората. J. Nutr., 132, 409–417.