•  

Цинхуа Яо

1 Отделение по онкология, Първата асоциирана болница на традиционния китайски медицински университет в Zhejiang, Ханджоу, провинция Zhejiang, Китай

Xiaozheng Ye

1 Отделение по онкология, Първата асоциирана болница на традиционния китайски медицински университет в Zhejiang, Ханджоу, провинция Zhejiang, Китай

Лу Уанг

2 Катедра по традиционна китайска медицина, Zhejiang Traditional Chinese University University, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Jianzhong Gu

1 Отделение по онкология, Първата асоциирана болница на традиционния китайски медицински университет в Zhejiang, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Тинг Фу

2 Катедра по традиционна китайска медицина, Zhejiang Traditional Chinese University University, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Юн Уанг

2 Катедра по традиционна китайска медицина, Zhejiang Traditional Chinese University University, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Юебяо Лай

2 Катедра по традиционна китайска медицина, Zhejiang Traditional Chinese University University, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Юки Уанг

2 Катедра по традиционна китайска медицина, Zhejiang Traditional Chinese University University, Hangzhou, провинция Zhejiang, Китай

Сиан Уанг

3 Катедра по медицинска онкология, Институт по клинична наука, болница Sir Runrun Shaw, Медицинско училище, Университет Zhejiang, Ханджоу, провинция Zhejiang, Китай

Хонгчуан Джин

3 Катедра по медицинска онкология, Институт по клинична наука, болница Sir Runrun Shaw, Медицинско училище, Университет Zhejiang, Ханджоу, провинция Zhejiang, Китай

Йонг Го

1 Отделение по онкология, Първата асоциирана болница на традиционния китайски медицински университет в Zhejiang, Ханджоу, провинция Zhejiang, Китай

Резюме

Въведение

Въпреки бързия напредък в развитието на противоракови лечения, химиотерапията остава един от най-важните подходи при лечението на много, ако не и на всички видове рак на човека [1]. Химиотерапията е основната адювантна терапия след или преди операция и първична терапия на напреднали злокачествени тумори. Страничните ефекти са основната клинична загриженост и ограничаващ дозата фактор, който влияе върху клиничната ефикасност на химиотерапията. Сред тях миелосупресията и храносмилателната дисфункция са най-честите нежелани реакции в крайна сметка засягат по-нататъшно клинично лечение. Напоследък миелосупресията може успешно да бъде предотвратена или управлявана с развитието на производството на рекомбинантни миостимулиращи фактори като GM-CSF (гранулоцит-макрофаг колония стимулиращ фактор) или G-CSF (гранулоцит колония стимулиращ фактор) и профилактично приложение на високоефективни антибиотици. Храносмилателната дисфункция обаче остава основното предизвикателство пред медицинските онколози за подобряване на ефикасността на химиотерапията и качеството на живот на пациенти с рак, които се подлагат на химиотерапия [2].

Поради високата си скорост на обмен епителът на стомашно-чревния тракт е податлив на химиотерапевтично увреждане, което води до разрушаване на бариерата на чревната лигавица (IMB) и последващи клинични прояви като лека температура, гадене, диария, повръщане и анорексия 6]. Следователно агенти или подходи, които могат да поддържат функцията и структурната цялост на IMB, ще предотвратят или облекчат причинената от химиотерапия чревна дисфункция [7]. Наскоро комбинациите от химиотерапия и традиционни китайски лекарства (ТКМ) или природни продукти наскоро се появиха като нов метод за лечение на рак, разчитайки на способността на ТКМ да предизвикат клетъчна смърт с малко странични ефекти [8-10]. Освен това беше установено, че ТКМ имат интригуващи фармакологични ефекти и терапевтични предимства за управление на чревната дисфункция. Изолиран от коренищата на растението Curcuma Longa, куркуминът е основният активен компонент на джинджифила и е установено, че има много биологични ефекти като противовъзпалителни, антиоксидантни, отстраняване на свободните радикали и противоракови [11,12]. В това проучване ние оценихме защитния ефект на куркумин върху чревна дисфункция и увреждане на IMB, предизвикано от 5-флуороурацил (5-FU) при плъхове.

Материали и методи

Реактиви

Куркуминът и 5-флуороурацилът (5-FU) са закупени съответно от Dawen Bio-Technology (Хангжу, Китай) и Jinyao Bio-Technology (Тиендзин, Китай). Комплектите за анализ ELISA са закупени от Huamei Bio-Technology (Ухан, Китай). Всички праймери са синтезирани от Huada Gene (Пекин, Китай).

Животни и дизайн на експерименти

Шестдесет здрави плъхове Wistar с тегло около 200 g са закупени от Лабораторния център за животни (Китайски медицински университет Zhejiang, Ханджоу, Китай) и са разделени на случаен принцип в 3 групи: контролна група, 5-FU и 5-FU + група куркумин. Третирането на животни в различни групи е показано на Фигура 1. Теглото на плъховете се записва преди и след лечението. Кръвни проби бяха взети на Ден 2, 4 и 6. Тъкани бяха събрани след прекратяване на експеримента с животни.

куркумин

Дизайнът на експеримента. 5-FU или нормален физиологичен разтвор (N.S.) се дава интраперитонеално (i.p.) от ден 1 до ден 6, а куркумин (Cur.) Се дава чрез интрагастрално приложение (i.g.).

ELISA (ензимно-свързан имуносорбентен анализ)

Серумните нива на ендотоксин, D-аминокиселинна оксидаза (DAO) и D-лактат са измерени чрез ELISA. Всички кръвни проби се центрофугират при 3000 rpm в продължение на 10 минути и супернатантата се съхранява в -80 ° С хладилник. ELISA са извършени съгласно протокола на производителя.

Анализ на морфологията на тъканите

Образци на около 3 см илеум са получени само на 3 см над илеоцеакума. Всички тъкани бяха фиксирани в 10% неутрален формалин и вградени в парафин, след това разделени и оцветени с хематоксилин-еозин. Хистоморфологичните промени в чревната лигавица бяха оценени под светлинна микроскопия. За анализ на ултраструктурната морфология фрагменти на илеума от три плъхове от всяка група бяха фиксирани с 2,5% глутаралдехид и изследвани под пропускаща електронна микроскопия.

Имунохистохимично оцветяване

Експресията на Bax, Bcl-2 и Caspase-3 се определя чрез оцветяване с имунохистохимия (IHC) съгласно описаните по-рано [13]. Накратко, след извличане на антигена, секциите бяха блокирани с нормален кози серум (Dako, Glostrup, Дания) и след това инкубирани с първични антитела за една нощ при 4 ° С. Детекцията на комплекса антиген-антитяло се извършва с помощта на козе анти-заешко вторично антитяло и комплект Streptavidin-HRP Systems (Dako).

Резултати

Ефект на куркумин върху промени в поведението на плъхове, лекувани с 5-FU

На ден 3 (Фигура 1) плъховете в групите с 5-FU и 5-FU + куркумин са безволни, движат се бавно и се представят с течни изпражнения. Един ден след лечението с куркумин (ден 4), плъховете в групата с 5-FU + куркумин са имали по-малко диария, по-добър дух и апетит, докато плъховете в групата с 5-FU не са имали промяна. На 6-ия ден плъхове от група 5-FU все още имаха тежка диария, докато плъховете от други групи изобщо нямаха симптоми.

Няма значителна разлика в теглото на плъхове от различни групи в изходното ниво (данните не са показани). На ден 3 теглото на плъховете в контролните, 5-FU и 5-FU + Cur групи е съответно 178,0 ± 2,6 g, 175,4 ± 6,4 g и 175,8 ± 3,5 g (Фигура 2А). Теглото на плъховете с 5-FU лечение е значително намалено (Control vs 5-FU, p 0,05). На 6-ия ден теглото на плъхове в три групи е съответно 180,3 ± 2,1 g, 165,2 ± 2,3 g и 173,0 ± 6,5 g (Фигура 2В). Теглото на плъховете в групата с 5-FU все още е значително по-ниско от теглото на плъховете в контролната група (Control vs 5-FU, p 0,05).