Rawiwan Charoensup

Училище за здравни науки, Университет Mae Fah Luang, Chiang Rai 57100, Тайланд

Тидарат Дуангьод

Училище за здравни науки, Университет Mae Fah Luang, Chiang Rai 57100, Тайланд

Pravaree Phuneerub

Училище за здравни науки, Университет Mae Fah Luang, Chiang Rai 57100, Тайланд

Chatubhong Singharachai

Училище за здравни науки, Университет Mae Fah Luang, Chiang Rai 57100, Тайланд

Резюме

Zanthoxylum limonella (Dennst.) Alston. (Rutaceae) или Ma-khwaen е едно от лечебните растения в традиционната тайландска медицина. Да изследва фармакологичните спецификации и химичните съставки на плодовете и семената на Z. limonella. Плодовете и семената на Z. limonella са събрани от 15 източника в цял Тайланд; след това разгледа фармакологичната спецификация, следвайки насоките на СЗО за метода за контрол на качеството на лечебните растителни материали. Микроскопско определяне на прахове Z. limonella демонстрира фрагмент от мезокарп, фрагмент от кафява вита, маслени жлези, фрагмент от ендокарп и ендосперм, съдържащ маслена глобула, трихом и бледокафяви каменни клетки. Стоматен индекс и пелуцидни точки в mm 2 са съответно 19,87 и 4,2. Физико-химичните параметри разкриха, че загубата при сушене, водно съдържание, обща пепел и неразтворима в киселина пепел не трябва да бъде> 17,90%, 9,18%, 4,50% и 0,60% от изсушеното тегло; докато екстрактивните стойности на етанол, вода и хексан и съдържанието на летливи масла не трябва да са ключови думи: Газова хроматография/масспектрометрия, фармакогностична спецификация, физико-химичен параметър, тънкослоен хроматографски пръстов отпечатък, Zanthoxylum limonella

ВЪВЕДЕНИЕ

Zanthoxylum limonella (Dennst.) Alston., Наричана в Тайланд „Ma-khwaen“, принадлежи към семейство Rutaceae и е вечнозелено дърво. Използва се като традиционна медицина, включително плодовете и семената се използват като подправка и има етерични масла, които заемат стимулиращ ефект за намаляване на мускулното натоварване [1], а някои метаболити имат цитотоксични, антибактериални, противовъзпалителни, противогъбични и анестетични свойства. [2,3] Лимоненът е едно от основните съединения в Z. limonella, което е монотерпен с миризма на портокали. Обикновено се прилага за хранителни и козметични продукти. [4,5] Газовата хроматография/масспектрометрия (GC/MS) са приети методи за анализ на летливи съставки на растителни лекарства поради нейната чувствителност, стабилност и висока ефективност. [6] Докладът за фармакогностична оценка на Z. limonella не е извършен цялостно в Тайланд. В това проучване плодовете и семената на Z. limonella от 15 източника в Тайланд бяха инспектирани в съответствие с насоките на СЗО за метода за контрол на качеството на лечебните растителни суровини, за да се установят фармакогностичните параметри и стандартизация, предоставени, за да се гарантира качество и чистота.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Химикали и реактиви

n-хексан (клас AR), дихлорометан (клас AR), толуен (клас AR), 99,9% етанол (абсолютен денатуриран) (клас AR) и 37% солна киселина (клас AR) са закупени от QRëC (Нова Зеландия). 98/100% мравчена киселина (AR клас) е закупена от Fisher Scientific (Loughborough, UK). Метанол (клас AR) и етилацетат (клас AR) са закупени от RCI Labscan (Банкок, Тайланд).

Растителни материали

Петнадесет проби от плодове и семена от Z. limonella са събрани от различни географски райони в Тайланд, включително; Mae Hong Son, Chiang Mai, Chiang Rai (Mae Sai District), Chiang Rai (Doi Hang Subdistrict), Chiang Rai (Wiang Chai District), Tak, Lam Pang, Uttaradit, Nan (Chetawan District), Nan (Na Muen District), Нан (област Song Kawe), Phrae (област Muang), Phrae (област Song), Lam Phun и Phayao. Всички комплекти сурови наркотици са удостоверени от Ruangrungsi N. Образци на ваучери са депозирани в Училището по здравни науки, Университет Mae Fah Luang, Тайланд.

Макроскопска и микроскопска идентификация

Макроскопичният характер на Z. limonella е илюстриран като рисунка на растението от автора. Анатомичните и хистологичните характеристики на напречния разрез и праха от плодовете и семената на Z. limonella бяха изследвани под микроскоп, за да се идентифицират структурните характеристики, клетките и ергастичните вещества на растителните проби. [7,8,9,10,11,12,13 ]

Определяне на стоматен индекс

Стомалният индекс се изчислява от 3 точки в 1 mm 2 на точка върху повърхността на 30 листа с помощта на тази формула. Стоматен индекс = брой устици/(брой устици + брой епидермални клетки) × 100. [7,13]

Определяне на пелуцидни точки

Пелуцидните точки са малка площ, която има светло оцветени кръгови области, видими с листовка, поднесена на светлина. Има ефирно масло, ароматни летливи нефт вторични растителни продукти, които светят ярко, когато се държат срещу слънцето и обикновено се срещат в Rutaceae. [7,13]

Физико-химично определяне

Общата пепел, неразтворимата в киселина пепел, загубите при сушене, съдържанието на вода, съдържанието на летливи масла и екстрактивните вещества на плодовете и семената на Z. limonella са извършени съгласно насоките на СЗО за методи за контрол на качеството на лечебните растителни суровини, както е описано накратко по-долу: ]

Три грама смляна проба се сушат при 105 ° С до постоянно тегло, за да се определи процентът на загуба при сушене. След това 3 g смляна проба се изгарят при 500 ° C до побеляване, за да се получи общата безвъглеродна пепел. Пепелта се кипва с 25 ml НС1 (70 g/l); неразтворимото вещество се изгаря отново при 500 ° С в продължение на 5 часа, за да се получи процентът на неразтворима в киселина пепел. Съдържанието на вода се определя чрез метод на азеотропна дестилация с използване на наситен с вода толуен. Съдържанието на летливи вещества се определя с помощта на апарат Clevenger. Определянето на екстрактивни вещества се извършва с хексан, 95% етанол и вода като разтворители. Пет грама смляна проба се мацерират със 100 ml разтворител при разклащане в продължение на 6 часа и престой в продължение на 18 часа преди филтриране. Двадесет милилитра от филтрата се изпаряват на водна баня и се сушат допълнително при 105 ° С, докато се получи постоянно тегло.

Анализ на данни

Физико-химичните параметри бяха изразени като големи средни стойности ± обединени стойности на стандартно отклонение (SD) (тегловни%). Средните и обединените стойности на SD бяха изчислени от 15 източника в цял Тайланд и всяка проба беше направена в три екземпляра. [7]

Тънкослойна хроматографска идентификация

Етанолните екстракти от плодове и семена от Z. limonella се разтварят в етанол (10 mg/ml). Пет микролитра от всяка проба бяха приложени в тънкослойната хроматографска (TLC) плака. Като вещество за покритие се използва силикагел 60 F254. Подвижната фаза беше използвана смес от хексан, толуен, етилацетат, мравчена киселина (2: 5: 2: 1). Петната се визуализират под ултравиолетова (UV) светлина при 254 nm и 366 nm; след това се напръсква с детектиращ реагент (10% сярна киселина в метанол) и се загрява при 105 ° С в продължение на 10 минути [9,14]

Газова хроматография/анализ на масспектрометрията

Сместа от 15 източника на масло от Z. лимонела в концентрация 10 μl/ml в хексан се използва за GC/MS анализ. GC пръстовите отпечатъци се определят, като се използва Agilent 6890N GC, оборудван с капилярна колона HP-5ms (30 m × 0,25 mm, дебелина на филма 0,25 μm) и Agilent 5973N MS детектор. Температурата на фурната беше увеличена от 60 ° C до 240 ° C с постоянна скорост от 3 ° C/min. Инжекционният отвор се задържа при 220 ° С по време на разделянето. Носещият газ е хелий със скорост на потока 1 ml/min. MS се извършва чрез електронен йонизационен режим при 70 eV. Масовият обхват беше от 30-300 amu. Химичните съставки на маслото от Z. limonella бяха идентифицирани чрез съпоставяне на техните масови спектри и индекси на задържане с библиотеката на Wiley Mass Spectral.

РЕЗУЛТАТИ И ДИСКУСИЯ

Макроскопска и микроскопска идентификация

Z. limonella (Dennst.) Alston е дърво с височина до 50 m. Кората има кафяв бодлив, 3-5 см × 2-4 см. Листата са редуващи се сложни листа, острие, странно перисто, ланцетна форма, 5-6 см × 7-11 см, ръб серрулат, връх арисат, неравна основа, повърхността на листата е скраб. Цветята са многобройни в големи, сложни дихазий, полипетален розов венче и 5 бяло-жълти венчелистчета с 5 епипетални тичинки. Плодовете са кълбовидни хесперидии с диаметър 1-2 mm. [15]

Макроскопските и микроскопските оценки са илюстрирани на фигури Фигури 1 1 - 6. Цитологичната и хистологична характеристика демонстрира фрагмент от мезокарп, фрагмент от кафява вита, маслени жлези, фрагмент от ендокарп и ендосперм, съдържащ маслена глобула, трихом и бледокафяви каменни клетки. Това е ценно оборудване за идентифициране на всяка съставка в Z. limonella. Семейството Rutaceae има изключителни характеристики от други растения, съдържащи маслена жлеза в част от растението. Най-важният и диагностичен характер на това семейство е наличието на пелуцидни жлезни точки в листата [16], при които Z. limonella има среден брой пелуцидни точки средно 4,2 точки/mm2. Освен това индексът на устицата е изследван под микроскоп с обектив × 40 и окуляр × 6. Стомата на Z. limonella е вид аномоцитна или ранункулатна (неправилна клетка), заобиколена от различен брой клетки, обикновено не различни от тези на епидермиса. [7] След това, за да се преброи броят на епидермалната клетка за всяка стома в квадратни милиметри (mm 2), индексът на устицата е 19,43.

спецификация

Плодният клон на Zanthoxylum limonella