Оригинална статия
Интензивността на свободните радикални процеси и нивата на тестостерон и естрадиол в семенната течност на мъже с различни видове патоспермия - персонализиран подход

федерален университет

Автори
Татяна Шкурат, Професор, катедра по генетика, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия,
Ксения Савикина, Ембриолог, отдел по ембриогенеза, Център за човешка репродукция и IVF, Ростов на Дон, Руска федерация,
Светлана Ломтева, Ембриолог, отдел по ембриогенеза, Център за човешка репродукция и IVF, Ростов на Дон, Руска федерация,
Карина Сагамонова, Професор, Център за човешка репродукция и IVF, Ростов на Дон, Руска федерация,
Александър Шестел, Андролог, Център за човешка репродукция и IVF, Ростов на Дон, Руска федерация,
Виктор Прокофев, Изследовател, Катедра по биомедицина, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия,
Татяна Шерчкова, Старши изследовател, Катедра по генетика, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия,
Елена Шиманская, Старши изследовател, Катедра по генетика, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия,
Екатерина Деревянчук, Старши изследовател, Катедра по генетика, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия,
Анжела Александрова, Изследовател, Катедра по биомедицина, Южен федерален университет, Ростов на Дон, Русия.

Адрес за кореспонденция
Татяна Шкурат,
Професор, катедра по генетика,
Южен федерален университет,
Ростов на Дон, Русия,
194/1, бул. Стачки, Ростов на Дон, 344090, Руска федерация.
Електронна поща: [email protected]

Цитат
Shkurat T, Savikina K, Lomteva S, Sagamonova K, Shestel A, Prokofev V, Sherchkova T, Shimanskaya E, Derevyanchuk E, Aleksandrova A. Интензивността на свободните радикални процеси и нивата на тестостерон и естрадиол в семенната течност на мъже с различни типове на Патоспермия - персонализиран подход. Онлайн J Health Allied Scs. 2016; 15 (1): 5. Достъпно на URL: http://www.ojhas.org/issue57/2016-1-5.html

Изпратено: 28 март 2016 г .; Приет: 29 април 2016 г .; Публикувано: 30 май 2016 г.

Въведение:

Последните години бяха посветени многобройни изследвания за изследване на оксидативния стрес, влиянието на активните форми на кислородните видове (ROS) и антиоксидантите върху репродуктивната система на мъжете. (1-3) Умерените количества ROS са необходими за физиологичната регулация на функцията на сперматозоидите, хиперактивността и акрозомната реакция. (4,5) При физиологични условия сперматозоидите произвеждат малко количество ROS, които са необходими за оплождането, капацитирането и акрозомната реакция. Повишената интензивност на процесите на свободни радикали се разглеждат от някои автори като водеща екзогенна причина за нарушения на процесите на сперматогенеза. (6)

Молекулярният кислород е естественият субстрат и метаболит за аеробни форми на живот, като основен източник на енергия и следователно няма мутагенна активност в концентрация, която не надвишава 20%, за разлика от неговите посредници - активни кислородни видове. (7-10) Повишената концентрация на кислородът и ROS са способни да предизвикат мутации в сперматогонията и сперматозоидите. (11,12)

Показано е, че оксидативният стрес може да намали подвижността на сперматозоидите, както и да предотврати проникването на сперматозоидите в ооцита. (13) Оксидативният стрес, причинен от повишаване на ROS или намаляване на нивото на антиоксиданти в семенната плазма, играе важна роля при появата на нарушения на параметрите на сперматозоидите. (14) Известно е също така, че повече от 25% от безплодните мъже имат повишено ниво на ROS в семенната течност. (15)

Стандартните методи за диагностика на фертилитета при мъжете, като изследване на параметрите на еякулата, което включва макроскопични, микроскопични, биохимични и функционални показатели, не винаги позволяват да се преценява за такива причини за мъжкото безплодие, като повишено производство на ROS от сперматозоиди.

Целта на тази работа е да се направи сравнителен анализ на интензивността на окислителните процеси и нивото на хормоните, произведени в семенната течност в норма и при патоспермия.

Материали и методи:

Проучихме 88 соматично здрави мъже на възраст от 20 до 50 години, които са кандидатствали през 2014 г. в Центъра за човешка репродукция и IVF с проблема с безплодието в брака и патоспермията в анамнезата. От този брой са изключени пациенти с азооспермия, генетични заболявания, възпалителни процеси с различна етиология, както и пациенти от двойки с недоказано женско безплодие. Контролната група се състоеше от 22 здрави мъже с нормозооспермия и с доказана плодовитост.

Пациентите бяха разделени на пет групи: 1) пациенти с нормозооспермия (контролна група); 2) с астенозооспермия (n = 28) олигозооспермия (n = 26), тератозооспермия (n = 20), олигоастенозооспермия (n = 14). Анализът на еякулата се извършва съгласно препоръките на СЗО. (16) Спермоплазмата се получава чрез центрофугиране на сперма при 2800 об/мин за 10 минути. Интензивността на процесите на свободни радикали и нивата на тестостерон и естрадиол бяха определени в спермоплазмата.

За оценка на окислителния статус на сперматозоидите в плазмата използвахме метод на индуцирана хемилуминесценция (CL) в системата H2O2-луминол (5-амино-2,3-дихидро-1,4-фталазиндион). Той се отнася до химически активатори на CL и реагира със свободните радикали, за да образува възбудени молекули. Luminol, без неблагоприятен цитотоксичен ефект и фото ефект, осигурява висок квантов добив по време на процеса на окисляване и образува широк спектър от реактивни кислородни видове. (17) Изследванията бяха проведени на автоматизиран анализатор на хемилуминесценция Berthold Autolumat Plus LB 953 (Berthold Technologies, GmbH).

Нивата на тестостерон и естрадиол се определят чрез ензимен имуноанализ на автоматичен ELISA анализатор «ALISEI QS» (Италия) в Центъра за колективна употреба «Високи технологии» (Южен федерален университет).

Статистически анализ: Статистическият анализ беше извършен с помощта на софтуерния пакет Excel и Statistica v.6.0. Сравнението на различни данни беше извършено с помощта на С-теста на Student и Pearson (c 2). Разликите се считат за значими при 95% ниво на значимост (стр Резултати и дискусия:

Според анализа на профила на спермата и въз основа на насоките на СЗО (16) сме образували следните групи:

1) Нормозооспермия (контрол) - профилът на спермата съответства на нормативни стойности;

2) Олигоастенозооспермия - концентрацията на сперматозоиди е по-малка от 15 милиона/ml, подвижността A + B е по-малка от 40%;

3) Астенозооспермия - концентрацията на сперматозоидите е нормална, подвижността на сперматозоидите A + B е по-малка от 40%, морфологията по строгите критерии на Крюгер е повече от 4%;

4) Олигозооспермия - концентрацията на сперматозоиди е по-малка от 15 милиона/ml, подвижността A + B е повече от 40%;

5) Тератозооспермия - концентрацията на сперматозоидите е нормална, подвижността на сперматозоидите A + B е повече от 40%, морфологията по критерии на Крюгер е по-малка от 4%.

Таблица 1 показва резултатите от средната концентрация, подвижност и морфология на сперматозоидите в изследваните групи. Беше получено, че групите се различават значително по параметрите на подвижността и броя на сперматозоидите. Увеличаването на броя на незрелите зародишни клетки в групата с олигозооспермия предполага, че узряването на зародишните клетки в тази група е имало недовършен характер.

Таблица 1: Показатели за концентрация, подвижност и морфология на сперматозоидите в изследваните групи

Групи за параметри на сперма

Концентрация, милион/мл

Мобилност (%)

Морфология от Крюгер (N)

бели кръвни телца

Клетките на сперматогенезата