Резюме
1. ВЪВЕДЕНИЕ
Бабезиозата е болест, предавана от кърлежи, причинена от протозои от рода Babesia и се характеризира с хемолитична анемия и треска, с случайни хемоглобинурия и смърт [1]. Това е заболяване с широко разпространение в световен мащаб, засягащо много видове бозайници с голямо въздействие върху говедата и човека [2, 3]. С пълната последователност на генома на Babesia bovis [4], постгеномната ера носи нова светлина върху развитието на диагностичните методи, подобрените ваксини и новите химиотерапевтични цели.
Бабезиозата е съобщена за първи път през 1888 г. от Виктор Бабес в Румъния, който е открил наличието на кръгли, интраеритроцитни тела в кръвта на заразените говеда [5]. Бейбс не успя да съобщи за наличието на кърлежи при болни говеда, но през 1893 г. Теобалд Смит и Фредерик Килборн от Бюрото по животинска индустрия на САЩ публикуваха резултатите си от поредица от експерименти, демонстриращи, че южният кърлеж за говеда Boophilus (Rhipicephalus) annulatus отпадащи от заразени говеда, са били отговорни за предаването на болест, наречена кърлежи, на чувствителни говеда [6]. Това наблюдение се счита за първото, което описва векторни членестоноги като носител на болестта. Наблюденията на Смит и Килборн бяха подсилени от собствената хипотеза на Купър Къртис, че елиминирането на говедата ще премахне болестта и те бяха в основата на създаването на програма за ликвидиране на кърлежите, която завърши с изкореняването на южния кърлеж от говедата и бабезиозата от територията на САЩ през 1943 г. [7]. Въпреки че в южната граница с Мексико има карантинна зона със спорадични огнища на кърлежи и бабезиоза [8], тя се счита за единствената успешна програма за ликвидиране на кърлежи някога.
2. МЕТОДИ ЗА ОТКРИВАНЕ НА БАБЕЗИОЗАТА
Диагнозата бабезиоза по говедата е важен инструмент за контрол и предотвратяване на разпространението на болестта. По време на острия стадий на заболяването броят на паразитите вътре в еритроцитите се увеличава по такъв начин, че да могат да бъдат открити микроскопски, но при хронично заразени животни, при които се появява субклинична форма на заболяването, този метод е безполезен и друг, по-сложен трябва да се използват методи.
2.1. Методи за откриване на микроскопия
Паразитите Babesia имат сложен жизнен цикъл, както е описано на фиг. 1 1 ). Идентифицирането на различните стадии на паразита в тъканите гостоприемници на бозайници или членестоноги може да се използва за целите на директната диагностика.
Жизненият цикъл на Babesia bovis.
A. Спорозоитът на B. bovis нахлува в еритроцит и се трансформира в трофозоит.
Б.. Трофозоитът във форма на пръстен.
° С. Два мерозоита се генерират от всеки трофозоит чрез бинарно делене.
д. Мерозоитите първоначално са свързани помежду си, наподобяващи две круши под остър ъгъл.
Е.. Зрелите мерозоити се отделят, преди да избягат от еритроцита.
F. Мерозоитите се освобождават от еритроцитите. Някои от тях ще нахлуят в нови еритроцити и ще се развият в трофозоити, докато други ще бъдат уловени от възрастни кърлежи, за да продължат цикъла си в безгръбначния гостоприемник.
G. Половите стадии се освобождават от червените кръвни клетки в лумена на чревния кърлеж и се развиват до гаметоцити.
З.. Гаметоцитите се трансформират в мъжки и женски гамети, които след сливане образуват зигота.
Аз. Зиготата се развива в стадий на заразяване и прониква в чревните клетки на кърлежите.
J. Тела на делене се образуват и от тях се развиват подвижни кинети.
К. Kinetes унищожават чревните клетки, избягват в хемолимфата и се разпределят в различните видове клетки и тъкани, включително яйчниците.
L. В яйчника ембрионните клетки са заразени от кинети (трансовариално предаване).
М. Когато женският кърлеж снася яйцата си, ембрионите вече са заразени.
н. Излюпените заразени ларви се прикрепват към едър рогат добитък и кинетите мигрират към слюнчените жлези на кърлежа, където образуват споробласт.
О. Хиляди спорозоити се развиват от всеки споробласт.
P. Ларвите на кърлежите се хранят от говедата кръв и спорозоитите се освобождават със слюнка в кръвоносната система на животното.
2.1.1. Тънки и дебели кръвни мазки
Babesia especies в различни гостоприемници и тъкани. A) Babesia bigemina в говежди еритроцити. Кръвна мазка, оцветена с Giemsa. Б.) Babesia bovis в говежди еритроцити. Кръвна мазка, оцветена с Giemsa. ° С) Babesia microti в миши еритроцити. Кръвна мазка, оцветена с Giemsa. д) Babesia bigemina kinetes в Rhipicephalus (Boophilus) microplus хемолимфа. Хемолимфна цитонамазка, оцветена с Giemsa. Е.) Babesia bovis в говежди мозъчен капиляр. Хистологичен разрез на мозъчна тъкан, оцветен с Giemsa. F) Откриване на антитела срещу Babesia bigemina чрез непряк тест за флуоресцентни антитела (IFAT). Говежди антитела бяха открити от вторичен, магарешки IgG анти-говежди IgG, свързан с Alexa-Fluor 488. Изображенията бяха получени с цел 100X.
Друга техника, разработена за откриване на ниски нива на паразитемия, особено в случаите, когато участва B. bovis, се основава на дебели цитонамазки от заразена кръв, оцветени с Giemsa [13, 18]. За тази техника, за да се получат добри резултати, в центъра на предметното стъкло се поставя малка капка кръв и тя се фиксира от топлина, без да се размазва, след което се оцветява рутинно, като се измива внимателно, за да се избегне загубата на тъканта, докато излишъкът от петно се отстранява. След като се изсуши, може да се наблюдава с микроскоп, подобно на тънката намазка [19]. Предимството на дебелата цитонамазка е, че голямо количество еритроцити се анализират в намалено пространство, поради което вероятността за откриване на заразени клетки е десет пъти по-висока, отколкото в тънката цитонамазка [18]. Методът обикновено се препоръчва при съмнения за инфекции с B. bovis или когато възникне субклинично заболяване. Този метод разчита на много опитен микроскопист, който трябва да идентифицира заразените с Babesia клетки сред маса конгломерирани еритроцити.
2.1.2. Мозъчни намазки
Когато говедо умре и се предполага, че е от бабезиоза, причинена от B. bovis поради наличие на нервни клинични признаци, идентифицирането на паразита може да се извърши чрез мозъчни цитонамазки. В този случай малка проба от сиво вещество на мозъчната кора се поставя върху предметно стъкло и тъканта се намазва с помощта на друг предмет. Мозъчната тъкан е фиксирана и оцветена, както бе споменато по-горе. Диагнозата се основава на наблюдение на мозъчни капиляри, пълни със заразени еритроцити [1]. Почти сто процента от еритроцитите, присъстващи в мозъчните капиляри, са заразени (Фиг. 2E 2E ) [20]. С добри резултати могат да се направят и цитонамазки на други органи като бъбреци или черен дроб.
2.1.3. Хемолимфни намазки
2.2. Имунологични методи
2.2.1. Непряк тест за флуоресцентни антитела (IFAT)
Откриването на антитела срещу Babesia от видове диви животни може да се постигне чрез използване на конюгиран с оцветител протеин G или A [34]. Първоначално протеините G и A са бактериални протеини, които се свързват с висок афинитет към Fc региона на няколко класа антитела. Налични са търговски, рекомбинантни протеини и те са проектирани така, че Fab свързващият домен и албуминовият домен, присъстващи в нативните протеини, са били премахнати, оставяйки само техния Fc домен с висок афинитет. Например, антитела от белоопашати елени (Odocoileus virginianus) срещу B. bovis или B. bigemina са открити с помощта на протеин G, съчетан с FITC или Alexa-488 [35, 36]. Тъй като протеините G и A се различават по афинитета си да свързват антитела от различни видове, оценката и подборът на подходящия протеин са необходими.
2.2.2. Имуносорбентен анализ, свързан с ензими (ELISA)
2.2.3. Имунохроматографски тест (ИКТ)
2.3. Молекулярни методи
Имунологичните методи за откриване на паразити Babesia имат недостатъка да разчитат на наличието на специфични антитела срещу тези паразити, което може да отнеме дни или седмици, за да се развие в заразено животно или те присъстват в продължение на месеци след изчезването на инфекцията, което прави полезността им много ограничена в случаи на остри заболявания, ваксинирани животни или изчистени чрез лечение животни. Молекулярните методи, насочени към откриване на нуклеинови киселини, са много полезни, когато имунологичните методи не работят. Откриването на нуклеинови киселини е косвен начин за откриване на паразита, така че те все още се считат за непреки методи. Чувствителността и специфичността на тези методи обаче са много високи и през последните години са разработени много различни подходи за откриване на видове Babesia в техните гостоприемници и техните вектори.
2.3.1. ДНК сонди
2.3.2. Полимеразна верижна реакция (PCR)
2.3.3. Хибридизация на петна с обратна линия (RLB)
2.3.4. PCR в реално време (RT-PCR)
2.3.5. Петлично медиирано изотермично усилване (LAMP)
3. АНТИ-БАБЕЗИЯ НАРКОТИЦИ
маса 1.
Химически лекарства, използвани за лечение на бабезиоза
| Имидокарб | 3,3’-бис (2-имидазолин-2-ил) -карбаналиди | B. bovis | 1-3 mg kg -1 | IM, SC | Да | [105] |
| B. bigemina | ||||||
| Б. дивергени | ||||||
| B. caballi | ||||||
| Диминазен ацетурат | 4,4´ (азоамино) дибензамидин | B. bovis | 3-5 mg kg -1 | АЗ СЪМ | Да | [105] |
| B. bigemina | ||||||
| Б. дивергени | ||||||
| B. caballi | ||||||
| Неролидол | цис-3,7,11-триметил-1,6,10-додекатриен-3-ол | B. bovis | 10 цМ | - | На изследвания | [110] |
| B. bigemina | 25 цМ | |||||
| B. ovata | ||||||
| B. caballi | ||||||
| Artesunate | 3R, 5aS, 6R, 8aS, 9R, 10S, 12R, 12aR) -декахидридо-3,6,9-триметил-3,12-епокси-12Н-пиранол (4,4/l-1,2-бензодиоепин-10 -ол водороден сукцинат | B. bovis | 2.6 цМ | - | На изследвания | [108] |
| Б. гибсони | 10 µg ml -1 | |||||
| B. caballi | 10 mg kg -1 | |||||
| Б. микроти | ||||||
| Триклозан | 2 ’, 4’, 4’-триклоро-2’-хидроксифенил етер | B. bovis | 100 ug ml -1 | - | На изследвания | [111] |
| B. bigemina | 50 µg ml -1 | |||||
| B. caballi | ||||||
| Епоксомицин | α´, β´-епоксикетон | B. bovis | 10 нм | - | На изследвания | [161] |
| B. bigemina | 5 нм | |||||
| B. ovata | 0,05-0,5 mg kg -1 | |||||
| B. caballi | ||||||
| Б. микроти | ||||||
| Госипол | 1,1 ’, 6,6’, 7,7’-хексахидрокси-5,5’-диизопропил-3,3’диметил [2,2’-бинафтален1,8,8’-дикар-боксалдехид. | B. bovis | 100 цМ | - | На изследвания | [174] |
| Atovaquone | 1,4-хидроксинафтохинон | Б. дивергени | 1 mg kg -1 | - | На изследвания | [189] |
IM интрамускулно, SC подкожно.
3.1. Конвенционални лекарства
3.1.1. Имидокарб
Химични структури на настоящи и нови лекарства срещу бабезиоза.
3.1.2. Диминазен ацетурат
3.2. Нови лекарства против бабезия
3.2.1. Триклозан
3.2.2. Неролидол
3.2.3. Artesunate
3.2.4. Епоксомицин
3.2.5. Госипол
3.2.6. Atovaquone
3.2.7. Изследвани нови лекарства
4. ЗАКЛЮЧЕНИЯ
ПРИЗНАВАНИЯ
Тази работа беше частично финансирана от CONACyT и PROMEP.
- Съвременни постижения в диагностиката и лечението на нерозивна рефлуксна болест
- Gale Academic OneFile - Документ - Последни постижения в билколечението на безалкохолни мазнини
- Цялостно лечение на ангина при жени с микроваскуларна дисфункция - изглед в пълен текст
- Изчерпателен преглед на затлъстяването и психологически съображения за лечение Психология, здраве
- Натрапчиво лечение на преяждане Центрове от розово дърво