Аниина Кескитало

1 Институт по биомедицина, Университет в Турку, Турку, Финландия

предизвиква

2 Катедра по клинична микробиология, Университетска болница в Турку, Турку, Финландия

Евелия Мунука

2 Катедра по клинична микробиология, Университетска болница в Турку, Турку, Финландия

Рейн Тойвонен

1 Институт по биомедицина, Университет в Турку, Турку, Финландия

Maija Hollmén

1 Институт по биомедицина, Университет в Турку, Турку, Финландия

3 Лаборатория за медицински изследвания, Университет в Турку, Турку, Финландия

Хейки Кайнулайнен

4 Факултет по спорт и здравни науки, Университет в Ювяскюла, Ювяскюла, Финландия

Пенти Хуовинен

1 Институт по биомедицина, Университет в Турку, Турку, Финландия

Сирпа Ялканен

1 Институт по биомедицина, Университет в Турку, Турку, Финландия

3 Лаборатория за медицински изследвания, Университет в Турку, Турку, Финландия

Сату Пекала

4 Факултет по спорт и здравни науки, Университет в Ювяскюла, Ювяскюла, Финландия

Свързани данни

Всички релевантни данни се намират в хартията и нейните поддържащи информационни файлове.

Резюме

Въведение

Според СЗО [1] разпространението на затлъстяването се е увеличило почти три пъти през последните четири десетилетия. Следователно, честотата на свързаните със затлъстяването метаболитни нарушения, включително неалкохолна мастна чернодробна болест (NAFLD), се е влошила. Счита се, че разпространението на затлъстяването и метаболитните нарушения се увеличава поради промени в факторите на околната среда, като диета и начин на живот, а натрупването на доказателства сочи, че чревната микробиота играе роля в развитието на тези заболявания [2]. Чревните микроби играят важна роля в метаболизма на гостоприемника, тъй като те, например, ферментират иначе несмилаеми диетични полизахариди в мастни киселини с къса верига, насърчават абсорбцията на монозахариди, влияят върху дейността на някои чревни ензими и увеличават анаболния метаболизъм [3,4] . През последните десетилетия няколко проучвания отчитат връзки между състава на микробиотата на червата и затлъстяването; затлъстелите индивиди изглежда са намалили разнообразието на чревната микробиота в сравнение с слабите индивиди (за преглед вж. [5]), а изобилието от специфични микробни таксони, функционални гени, както и метаболитни дейности се различават значително между затлъстелите и слабите индивиди [6, 7]. Освен това е доказано, че чревните микроби участват в регулирането на липогенезата на гостоприемника и съхранението на мазнини [3,8].

Повишеното изобилие от E. cloacae при хората първоначално е свързано със затлъстяването в казус от Zhao et al., Където намаляването на чревния E. cloacae щам B29, от 35% до неоткриваеми нива, е свързано с паралелно намаляване при натоварване с ендотоксини и значителна загуба на тегло при пациент с морбидно затлъстяване [14]. Освен това, същият бактериален щам, изолиран от този пациент, инициира затлъстяване и предизвиква възпаление, когато се въвежда на мишки без HFD без микроби [14,19]. Споменатите по-горе проучвания предполагат, че E. cloacae може да допринесе за затлъстяването, вероятно чрез ендотоксин или индуциран от бичури механизъм, медииран от възпаление. В това проучване изследвахме ефектите от прилагането на E. cloacae върху HFD женски мишки. Изследвани са женски мишки, тъй като въпреки че надлъжните проучвания отчитат по-висока честота на NAFLD при мъжете, изследванията в напречно сечение предполагат, че женските могат да бъдат по-склонни да развият неалкохолен стеатохепатит (NASH; за преглед вж. [20]). E. cloacae subsp. cloacae (ATCC® 13047 ™) е използван в експериментите, тъй като е тип щам на E. cloacae с напълно секвениран геном и филогенетично близък по отношение на E. cloacae щам B29 [14].

Материали и методи

Ин витро култури

Е. cloacae подвид cloacae ATCC® 13047 ™ се поддържа при + 37 ° C върху платките с агарови анаеробни кръвни агари (Lab M Limited, Lancashire, UK). Интрагастралните инокулуми се приготвят чрез суспендиране на бактериалните клетки във фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS) при приблизителна плътност на клетките, базирана на мътност, 9 × 10 8 CFU/ml. Обемът на един инокулум, включващ приблизително 2 × 108 бактериални клетки, е 220 μl. По време на прехвърлянето на суспензията в спринцовката жизнеспособността на суспендираните бактериални клетки се потвърждава чрез поставяне на аликвотна част от суспензията върху плака за кръвен агар Fastidious anaerobe. След това спринцовката беше запечатана и транспортирана до съоръжението за животни.

Животни