Комбинираното насочване на CDK9 и BRD4 води до инхибиране на пролиферацията и индукция на апоптоза. (А) Анти-пролиферативна активност на JQ1 и/или CDKI-73 срещу клетки A673, EW7 и SKNMC чрез анализ xCELLigence, измерващ клетъчния импеданс на всеки 4 часа (относителен клетъчен индекс). Данните са средни ± SEM (шестнадесетични/група); Еднопосочен ANOVA; *** p-стойност B) Фазова контрастна микроскопия (увеличение 10 ×) на клетки 48 часа след третиране с инхибитори. Клетките A673 или SKNMC се третират в продължение на 48 часа с 500 nM JQ1, 100 nM CDKI-73, или и двете, в сравнение с DMSO контролата. (C) Western blot анализ на чувствителността към апоптоза след лечение JQ1 и/или CDKI-73 (I-73), съответно. Нива на протеин, измерени чрез антитела срещу EWS-FLI1, PARP, CASP7 и GAPDH като контрол на натоварването. Клетките A673 или SKNMC се третират в продължение на 24 часа с инхибитори, както е показано.

Резюме

инхибиране

Комбинираното насочване на CDK9 и BRD4 води до инхибиране на пролиферацията и индукция на апоптоза. (А) Анти-пролиферативна активност на JQ1 и/или CDKI-73 срещу клетки A673, EW7 и SKNMC чрез анализ xCELLigence, измерващ клетъчния импеданс на всеки 4 часа (относителен клетъчен индекс). Данните са средни ± SEM (шестнадесетични/група); Еднопосочен ANOVA; *** p-стойност B) Фазова контрастна микроскопия (увеличение 10 ×) на клетки 48 часа след третиране с инхибитори. Клетките A673 или SKNMC се третират в продължение на 48 часа с 500 nM JQ1, 100 nM CDKI-73, или и двете, в сравнение с DMSO контролата. (C) Western blot анализ на чувствителността към апоптоза след лечение JQ1 и/или CDKI-73 (I-73), съответно. Нива на протеин, измерени чрез антитела срещу EWS-FLI1, PARP, CASP7 и GAPDH като контрол на натоварването. Клетките A673 или SKNMC се третират в продължение на 24 часа с инхибитори, както е показано.