Нова техника за обеззаразяване на органи преди трансплантация с помощта на облъчване с ултравиолетова и червена светлина е разработена от бразилски и канадски изследователи и е описана в статия, озаглавена „Инактивиране на вируса на хепатит С в белите дробове донори с помощта на лечебни терапии по време на нормотична белодробна перфузия ex vivo“. публикувано в списанието Nature Communications. Изследването е частично проведено в Изследователския център по оптика и фотоника (CEPOF), организиран от Университета на Сао Пауло (USP) в Сао Карлос в щата Сао Пауло (Бразилия).

биофотонната

„Тази биофотонна техника е революционна, тъй като помага да се избегне предаването на болести по време на трансплантация на органи“, каза Вандерлей Банято, редовен професор в Университета в Сао Пауло, директор на Физическия институт на Сао Карлос (IFSC-USP) и главен изследовател на CEPOF.

Групата на Багнато си партнира с изследователи от университета в Торонто в Канада, който има най-голямата програма за трансплантация на бели дробове в света, като е извършил 197 такива операции само през 2018 г. Според гръдния хирург Марсело Сипел, който ръководи службата, броят на трансплантациите може да бъде по-голям, ако органите могат да бъдат обеззаразени, особено когато бъдещият донор има хронична вирусна инфекция като хепатит С.

"Десет пациенти са тествани досега [с помощта на биофотонната терапия]", каза Сипъл. "Новата техника значително намали вирусния товар на трансплантирания орган при осем от тези пациенти. Процедурата почти елиминира вируса при двама други."

Методът, описан в статията, включва облъчване с ултравиолетова и червена светлина за намаляване на вирусни и бактериални натоварвания в заразените органи, за да се предотврати предаването на заболявания като хепатит на реципиенти. Според Багнато техниката първоначално е разработена за лечение на белите дробове, но се адаптира за черния дроб и бъбреците. "Това би трябвало значително да подобри следоперативните условия за реципиенти на трансплантация", каза той. "Това също ще ни позволи да използваме органи, които в момента трябва да отхвърлим поради нивото на замърсяване."

Обеззаразяване в две стъпки

Белите дробове се обеззаразяват преди трансплантация чрез заместване на кръвта с консервираща течност по процедура, известна като перфузия, разработена в Канада от Cypel. "Перфузията намалява вирусните и бактериални натоварвания, но не може да ги елиминира напълно. В резултат на това пациентът трябва да бъде лекуван с антибиотици и антивирусни средства в продължение на три месеца след трансплантацията", обясни Сипел.

„Мислейки за начини за по-нататъшно намаляване или премахване на вирусното натоварване в органите за трансплантация, по-специално на вируса на хепатит С, разгледах възможността да използвам методи за обеззаразяване с ултравиолетова светлина, които обикновено се използват за обеззаразяване на кръвта например. започнахме да си партнираме с Банято и неговия екип в Сао Карлос. Той и колегите му дойдоха да ни посетят и изучат техниката. Само месец по-късно ни изпратиха първия прототип на машината за обеззаразяване с ултравиолетово облъчване. "

„Техниката за биофотонно обеззаразяване, разработена в нашата лаборатория в Сао Карлос, се състои от две специфични процедури, извършвани едновременно“, каза Кристина Курачи, професор в IFSC-USP и участник в проекта.

По време на перфузия, докато течността циркулира в белия дроб, който ще бъде трансплантиран, клиницистите добавят молекули към белодробната тъкан и биофотонното обеззаразяване се извършва директно в органа чрез облъчване с червена светлина с дължина на вълната 660 нанометра (nm), докато фотодинамичното окисление елиминира микроорганизми в тъканта.

В същото време вирусният товар се отстранява от циркулиращата течност, която непрекъснато се обеззаразява чрез ултравиолетово облъчване с дължина на вълната 254 nm.

"Ултравиолетовото облъчване директно унищожава микроорганизмите, като разгражда молекулите, присъстващи в бактериите и вирусите. Бактериите се убиват и вирусите са напълно инактивирани. Облъчването с червена светлина обеззаразява индиректно чрез фотосенсибилизация", каза Курачи.

Тази биофотонна терапия включва въвеждането на фотосенсибилизиращо лекарство в перфузионната течност. Активирането на лекарството изисква молекули кислород (присъстващи във вируси) и облъчване с червена светлина при определена дължина на вълната (660 nm). Когато фотосенсибилизиращото лекарство се къпе в тази червена светлина, неговите молекули абсорбират енергия, която се прехвърля към кислородните молекули във вируса, което ги прави силно окислени. Това причинява необратими увреждания на мембраните и генетичния материал на няколко вируса, включително вируса на хепатит С и ХИВ-1.

"Перфузионният разтвор е специален и много скъп", каза Банято. "Той е направен по такъв начин, че да запази органа. Поради разходите се използва възможно най-малко процедура. Благодарение на техниката и оборудването, които сме разработили, литър перфузат може да се промие през органа стотици пъти, за да се отстранят напълно замърсителите. "

Методът беше първоначално тестван върху човешки бели дробове, отхвърлени за трансплантация, за да се определи дали тъканното вирусно натоварване може да бъде намалено чрез облъчване. Според Cypel е установено, че вирусният товар е спаднал драстично след процедурата. "Следващата стъпка беше да подложим свинските бели дробове на същата процедура и след това да ги трансплантираме, за да видим дали процедурата е причинила някакви биохимични или морфологични увреждания на тъканите. Това не е така", каза Cypel.

И накрая, техниката беше тествана върху пациенти. "При първите десет трансплантации, които извършихме, новата техника елиминира вируса на хепатит С от органи, дарени на двама пациенти. При останалите осем пациенти вирусният товар рязко спадна след операция, но се повиши отново седем дни по-късно и пациентите трябваше да получат антивирусни лечение в продължение на три месеца ", каза той.

„Важна констатация беше, че когато вирусът не беше елиминиран, той се появи отново в лабораторните тестове на пациента след седем дни. С тази информация оттогава направихме две други трансплантации, при които антивирусната терапия се концентрира през първата седмица след операцията. Вирусът беше елиминиран и в двата случая ", каза Cypel.

Според Багнато тази биофотонна терапия ще бъде усъвършенствана, за да осигури още по-рязко намаляване на вирусните и бактериални натоварвания, увеличавайки шансовете за успешна трансплантация. "Нашата цел е терапията на основата на светлина да елиминира всички вирусни и бактериални замърсители в органите, които ще бъдат трансплантирани. Ако е така, може дори да е възможно да се направи без перфузата", каза той.

Клиничната част на проекта се провежда от Cypel и неговата група в Торонто. Изследователите от IFSC-USP са проектирали новата биофотонна техника, разработили са инструментите и участват в анализа на резултатите. Освен Банято и Курачи, в бразилския отбор в IFSC-USP влиза и Наталия Инада.

В Канада е подадена заявка за патент и две мултинационални компании са изразили интерес да проучат възможността за производство и предлагане на пазара на оборудването. Сега изследователите работят по прилагането на програма за обеззаразяване на черния дроб и бъбреците в Бразилия.

„Всичко това е възможно само благодарение на философията, въведена от програмата RIDC на FAPESP, която ни насърчи да си сътрудничим в международен план и в същото време да създадем практически подходящи знания“, каза Банято.

Повече информация: Marcos Galasso et al, Инактивиране на вируса на хепатит С в белите дробове на донори, използвайки светлинни терапии по време на нормотермична ех vivo белодробна перфузия, Nature Communications (2019). DOI: 10.1038/s41467-018-08261-z