Богатият на лутеолин екстракт от цветя на хризантема потиска изходната серумна пикочна киселина при японски пациенти с лека хиперурикемия

Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd., 1 Numata, Kitagata-cho, Ichinomiya, Aichi, 493-8001, Япония

Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd., 1 Numata, Kitagata-cho, Ichinomiya, Aichi, 493-8001, Япония

Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd., 1 Numata, Kitagata-cho, Ichinomiya, Aichi, 493-8001, Япония

Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd., 1 Numata, Kitagata-cho, Ichinomiya, Aichi, 493-8001, Япония

Резюме

Заден план: Лутеолинът е флавоноид, открит в различни ядливи растения, който показва различни ползи за здравето, включително противовъзпалителни и подагра ефекти. Въпреки това, има малко клинични изследвания на лутеолин от гледна точка на превенцията на подагра. Проведохме клинично изпитване на добавки с екстракт от цветя на хризантема, богат на лутеолин (LCE), за да оценим ефекта върху нивата на серумната пикочна киселина при японски мъже.

Методи: Изследвахме ефекта на LCE, съдържащ 10% лутеолин в две двойно-сляпи плацебо-контролирани проучвания. В проучването с единична доза субектите на гладно са приемали капсула, съдържаща 100 mg LCE (10 mg лутеолин) или плацебо преди поглъщане на тестово хранене с високо съдържание на пурини и нивото на серумната пикочна киселина се определя с течение на времето. За проучването с многократно приложение субектите са приемали плацебо или LCE капсула в продължение на 4 седмици. Серумната пикочна киселина на гладно се оценява преди и след поглъщане.

Резултати: Пероралният прием на LCE няма значително влияние върху серумната пикочна киселина. След 4 седмици LCE поглъщане, серумната пикочна киселина има тенденция да намалява в групата на LCE. След прием на LCE при пациенти с изходно ниво на пикочна киселина от 5,5 до 7,0 mg/dL се наблюдава значително намаляване на серумната пикочна киселина. Няма аномалии, предполагащи неблагоприятни ефекти по време или след поглъщане на LCE.

Заключение: Поглъщането на LCE в продължение на 4 седмици намалява нивото на пикочната киселина в серума. Лутеолинът може да предотврати подагра, като контролира пикочната киселина.

Ключови думи

лутеолин, хризантема, подагра, пикочна киселина, пуринова основа

Съкращения

XOD: ксантиноксидаза; LCE: богат на лутеолин екстракт от цветя на хризантема; CRP: С-реактивен протеин; AUC: площ под кривата на концентрацията спрямо времето; CFO: масло от цветя на хризантема

Фонове

Подаграта е нарушение, при което се натрупват иглевидни кристали на пикочна киселина в периферните тъкани поради хиперурикемия [1]. За потискане на острата болка и възпаление се предписват нестероидни противовъзпалителни лекарства [2], стероиди [3] и колхицини [4], докато инхибиторите на ксантиноксидазата (XOD) като алопуринол се използват за намаляване на високите нива на пикочна киселина в кръвта [5] ]. Няколко японски храни имат високо съдържание на пуринови основи, като нори (водорасли), шийтаке (гъби), пилешки дробчета и скариди от сакура [6]. Японците обаче са склонни да са по-наясно с съдържанието на пуринова основа в бирата и алкохолните напитки, въпреки че е по-ниско, отколкото в споменатите по-горе храни [7]. Приблизително 30% от японските мъже имат хиперурикемия, а 0,8% от амбулаторните пациенти са на лечение за подагра [8].

Материали и методи

Субекти

За проучването с една доза са наети 39 мъже служители на Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd. на възраст от 22 до 71 години. След като получиха пълно обяснение за целта на изследването и протокола, кандидат-субектите се съгласиха на скринингов тест, който включваше прием на тестово хранене с високо съдържание на пурини. Динатриев 5'-гуанилат (1.62 g, Cheil Jedang Indonesia PT) и натриев 5'-изозиат (1.63 g, Ajinomoto, Япония) се смесват с предлаганата на пазара прахообразна супа от царевица (17.6 g, супа Knoll cup, Ajinomoto, Япония). След това се добавят 180 ml гореща вода за разтваряне на сместа и тя се използва като тестово хранене с високо съдържание на пурини. Кандидат-субектите са гладували от 22:00 вечерта в нощта преди теста и е взета кръвна проба сутринта на теста. След това те погълнаха тестовото хранене и кръвните проби бяха събрани след 60 минути, 120 минути и 240 минути. Субектите са били включени, ако нивото на пикочната киселина на гладно е 5,5 до 8,0 mg/dL и е потвърдено повишаване на серумната пикочна киселина след поглъщане на тестовото хранене. Избрани са 20 субекта и те са на възраст от 22 до 70 години.

За проучването с повторно приложение на LCE бяха наети здрави мъже на възраст 20 години или повече сред служителите на Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd., които свободно дадоха съгласие за проучването. Сред тях за кандидати бяха избрани 39 мъже на възраст от 22 до 71 години (42,8 ± 13,3) години, които не отговарят на нито един от „критериите за изключване“ по-долу. След потвърждение на информираното съгласие се събира кръв на гладно, за да се измери изходната стойност на серумната пикочна киселина и след това се избират 30 участници, от най-високото до най-ниското ниво на пикочна киселина. Субектите са групирани така, че средната възраст да е сходна във всяка група. Нивата на пикочната киселина варират от 4,5 до 7,8 mg/dL (6,0 ± 0,9 mg/dL). Критериите за изключване бяха следните.

  1. Настоящи лекарства за всеки хроничен симптом.
  2. Тежка алергия към храни или лекарства.
  3. Текущо лечение на хиперурикемия или подагра.

Подготовка и разпределяне на проби за изпитване

LCE се получава чрез водна етанолова екстракция от цветята на Chrysanthemum indicum, култивирани в Китай и на прах от Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd. LCE (търговско наименование: Kiku Flower Extract-P; Lot. T-519) съдържа 10% лутеолин, и 100 mg LCE се поставят в цветни твърди капсули за поглъщане. Бяха направени и плацебо капсули със същия външен вид като LCE капсулите, които съдържаха 100 mg декстрин. Капсулите бяха оцветени и пълнежът не се виждаше отвън. Листът за разпределение, посочващ разпределението на тестовата проба, беше строго защитен от контролер, който не участва пряко в изследването.

За проучването с единична доза 20-те субекта са разпределени в 2 групи, така че средната възраст и нивото на пикочната киселина са сходни. За проучването с многократно приложение 30-те субекта са разпределени в 2 групи от най-високата до най-ниската стойност на пикочната киселина.

Протокол

Проучванията и статистическият анализ са извършени в Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd. Проучванията са направени като плацебо-контролирани двойно-слепи кръстосани проучвания. Основният резултат е нивото на серумната пикочна киселина в двете проучвания.

За еднодозовото проучване (проведено на 8 юли 2016 г.), една група (n = 10) поглъща плацебо капсула, а другата група LCE капсула (n = 10). Всички субекти гладуват от 22:00 ч. В нощта преди теста и първото вземане на кръв се извършва сутринта на тестовия ден. След това субектите погълнаха тестовото хранене с високо съдържание на пурин и второто, третото и четвъртото вземане на кръв бяха извършени след 60, 120, 180 и 240 минути. Урината се събира 2 часа след приемане на тестовото хранене. На седем дни след първия преглед се повтаря същия тест. Субектите от всяка група поглъщат другия тип капсула и тестовото хранене и кръвта се събира по начин, подобен на описания по-горе.

За проучването с многократно приложение, кръвта и урината бяха събрани от гладуващи пациенти и в двете групи на 6 септември 2016 г. Субектите от всяка група (N = 15) поглъщаха по една плацебо капсула или една LCE капсула дневно с вода след хранене в продължение на 4 седмици. След това се вземат проби от кръв и урина от субекти на гладно. След 13-дневен период на измиване, проби от кръв и урина бяха събрани отново на гладно. След това субектите от всяка група поглъщат другия тип капсула (LCE или плацебо) в продължение на 4 седмици, след което проби от кръв и урина се събират при гладуване.

Анализ на кръв и урина

В еднодозовото проучване, събраните кръвни проби се центрофугират, за да се получи серум. Нивата на пикочната киселина в серума и урината са определени от FALCO Biosystems Ltd. (Киото, Япония).

В проучването с многократно приложение е получен серум за определяне на пикочна киселина и С-реактивен протеин (CRP), докато пълна кръв е използвана за измерване на скоростта на утаяване на еритроцитите и броя на белите кръвни клетки. Тези параметри бяха определени от FALCO Biosystems Ltd. pH на урината беше измерен с pH хартия в диапазона от 3,8 до 5,4 и 5,5 до 9,0.

Етика и съответствие

Това проучване беше проведено в съответствие с Декларацията на WMA от Хелзинки (64-то Общо събрание на WMA през 2013 г., Бразилия) и беше проведено в съответствие с етичните съображения. Правата на човека и безопасността на всеки субект бяха взети под внимание. Комитетът по етика на Oryza Oil & Fat Chemical е съставен от учени от Oryza Oil & Fat Chemical Co. Ltd. с докторска степен по фармация, както и от лекар и адвокат от юридическа фирма. Комитетът е свикан, за да оцени етичния характер и целесъобразността на протокола. Двете проучвания бяха изпълнени въз основа на протокола, одобрен от комисията по етика и всички съществени отклонения от протокола, изискващи разрешение от комисията. И двете проучвания са регистрирани в Медицинската информационна мрежа на университетската болница - Регистър на клиничните изпитвания (UMIN000023818 и UMIN000022823).

Разследване на нежелани събития

Извършва се оценка на нежеланите събития и се определя причинно-следствената връзка с тестваните вещества. Решението дали да продължи проучването е взето от отговорния лекар, ако е необходимо. Нежеланите събития се определят като симптоми, резултат от поглъщане на LCE, които са неприятни за субекта. Ако субект поиска да прекрати проучването, то незабавно се спира и се взема предвид, за да се предотврати неблагоприятно положение на субекта.

Критерии за изключване

Ако някое от следните събития се случи по време на проучването с многократно приложение, случаят се обсъжда на клиничната конференция и въпросният субект е изключен от анализ след преглед.

  1. Ако субектът е закъснял, когато е участвал във всеки тест.
  2. Ако броят на дните без прием на тествания продукт (т.е. не е достигнато определеното дневно количество за поглъщане) е по-голям от 15% от общия брой планирани дни на поглъщане.
  3. Ако имаше големи проблеми по отношение на надеждността на данните поради проблеми с тестването или други причини.
  4. Други причини предполагат, че е уместно да се изключи темата.

Статистически анализ

Резултатите се отчитат като средна стойност и SD (с изключение на параметрите на урината). Използва се двустранен сдвоен t-тест за сравнение между преди и след поглъщане на капсули. Несдвоеният t-тест беше използван за сравняване на плацебо групата с LCE групите. Вероятността по-малка от 5% се счита за значима.

Резултати

Проучване с една доза

Резултатите от тестовете, проведени преди и след периода на измиване, бяха комбинирани (общо 20 субекта). Серумното ниво на пикочна киселина преди поглъщане на плацебо или LCE капсулите е съответно 6,8 ± 1,0 mg/dL и 6,6 ± 1,0 mg/dL. На 2 часа след поглъщането на тестовото хранене, серумната пикочна киселина се повишава до 9,1 ± 1,3 mg/dL (плацебо) и 9,0 ± 1,3 mg/dL (LCE). Пикочната киселина остава над 8,5 mg/dL на 4 часа след тестовото хранене. Площта под кривата концентрация спрямо време (AUC) е почти еднаква и в двете групи, като е 457 ± 179 mg/dL · 4 часа в групата на плацебо и 469 ± 201 mg/dL · 4 часа в групата на LCE. Фигура 1А показва увеличението на серумната пикочна киселина при всички пациенти и при пациенти с ниво на пикочна киселина по-малко от 7,0 mg/dL. Няма значителни разлики до 4 часа след тестовото хранене. Екскрецията на пикочна киселина с урината е сходна и в двете групи (Фигура 1В).

богатият

Фигура 1. Промяна на серумната пикочна киселина след еднократна перорална доза LCE при субекти, получаващи тестово хранене с високо съдържание на пурин.

Четириседмично проучване с многократно приложение

По време на периода на обучение двама субекти отпаднаха от всяка от плацебо и LCE групите по лични причини. Таблица 1 показва промените в серумната пикочна киселина след поглъщане на плацебо капсули или LSE капсули. Поглъщането на LSE води до значително намаляване на пикочната киселина (-0,18 mg/dL). Статистически анализ е извършен и при пациенти с ниво на пикочна киселина над 5,5 и по-малко от 7,0 mg/dL. В резултат на това се наблюдава значително намаляване на нивото на пикочната киселина в групата на LCE в сравнение с групата на плацебо. Промените в кръвното налягане, честотата на пулса и рН на урината (параметри за оценка на безопасността) са посочени в таблица 2. Всички стойности са в нормалните граници и не са открити значителни разлики между преди и след поглъщане или между двете групи. Освен това възпалителните параметри (CRP, скоростта на утаяване на еритроцитите и броя на белите кръвни клетки) не се променят по време на поглъщане на плацебо капсули или LCE капсули (Таблица 3).

маса 1. Ниво на пикочна киселина в серума преди и след поглъщане на плацебо или LCE в продължение на 4 седмици