Франк Лоринг ван Бийк

1 Катедра по клинични науки за домашни животни и отдел по имунология, Факултет по ветеринарна медицина, Университет Утрехт, Утрехт, Холандия

Адриан Уотсън

Margriet Bos

3 Royal Canin, Veghel, Холандия

Винсент Биоург

Тон Вилемс

1 Катедра по клинични науки за домашни животни и отдел по имунология, Факултет по ветеринарна медицина, Университет Утрехт, Утрехт, Холандия

Атопичният дерматит (АД) е често срещано кожно заболяване на кучета, дефинирано като генетично предразположено възпалително и сърбежно кожно разстройство с характерни клинични характеристики, свързани с IgE антитела, най-често срещу алергени от околната среда (, 1). Диагнозата на AD се основава на историята на животното и наличието на сърбеж и дерматит на определени места в тялото, като муцуната, ушите, краката, аксилите и корема. Това се комбинира с реактивност на кожния тест към алергени от околната среда или наличието на алерген-специфичен IgE в серума. Алергените, които често се свързват с тези клинични прояви, включват акари от домашен прах, акари, полени и епители.

По-рано беше показано, че някои хранителни компоненти, когато се хранят в комбинация, могат да повлияят на свойствата на бариера на кожата, както и на синтеза на липиди (, ​​10). Тези компоненти стимулират синтеза на керамид в in vitro модели и впоследствие е показано, че намаляват трансепидермалната загуба на вода след 9 седмици хранене, с допълнително намаляване след 12 седмици.

Целта на настоящото проучване е да се установи дали храненето с диета, показана преди това за подобряване на функцията на бариера на кожата, може да повлияе на появата на признаци на AD при предразположена порода кучета, когато се храни през ранните етапи от живота.

Материали и методи

От 5 седмици след чифтосването, единадесет бременни язовири от лабрадор ретривър са били хранени на случаен принцип или с контролна диета, предназначена за бременност, кърмене и отбиване (за подробности относно диетата, вж. Приложение А: пантотенат (7,75 mg), никотинамид (6,75 mg), хистидин (1,85 g), инозитол (125 mg), холин (288 mg), пиридоксин (2,5 mg) само от съставки; диета B,/4184 kJ) или същата диета с допълнително обогатяване за пантотенат (50 mg), никотинамид (163 mg), хистидин (1,85 g), инозитол (350 mg), холин (392 mg) и пиридоксин (20 mg) (/ 4184 kJ; диета А, крайни концентрации в дадени диети). EPA/DHA (1 g/4184 kJ), n-6 мастни киселини (7,5 g/4184 kJ) и витамин Е (195 mg/4184 kJ) не се различават между двете диетични групи.

Впоследствие общо осемдесет кученца от единадесетте котила бяха включени в сляпото, контролирано проучване: тридесет и три женски и петдесет и седем мъжки. След това пълните котила са хранени с една от същите две диети, допълнени (тестова диета A; n 35) или без добавки (контролна диета B; n 45), съответстващи на тези, хранени на майка им, до 8-седмична възраст. Между 8 седмици и 1 година кучетата са били хранени с продукт, предназначен за растеж, подобно допълнен или недопълнен (за подробности за диетата, вижте Приложение А). Всички партиди храни, използвани в проучването, бяха анализирани и доказано, че са насочени. Храните, дадени на паралелните групи, са идентични, освен добавените съставки, включително източници на протеини и енергийна плътност. Животновъдите и собствениците бяха снабдени с един вид диета, за да се избегнат грешки при пресичане и бяха разпитани относно приема на храна. Приемането на кучета беше 100%. Всички диети бяха в сух формат.

Кръвният IgE за алергени от домашни прахове на Der f и Der p е измерен на 6 и 12 месеца с помощта на теста Heska Allercept® (Heska). Allercept е неконкурентен, твърдофазен ензимен имуноанализ, който включва биотинилиран Fc рецептор (FcεRIα) като основно свързващо вещество за специфични за алергена IgE молекули, стрептавидин алкална фосфатаза като вторичен слой и р-нтирофенил фосфат като субстрат (, 11 ). Долният праг за положителен тест се препоръчва от производителя при 150 единици за абсорбция ELISA (EA). От всяко куче се взема количество от 2 ml кръв, от което се приготвя 1 ml плазма за теста. Тестовете за всяка точка от времето се провеждаха на партиди срещу контролни проби за калибриране.

Между 8 и 12 седмична възраст кученцата бяха продадени на своите постоянни собственици. Всички кученца бяха настанени индивидуално. Собствениците бяха информирани за проучването и помолени да продължат да участват. За своето участие те получиха безплатна храна за кученца, допълнена според тяхната група и предоставена в неутрална опаковка. Подписан бе формуляр за съгласие. На всеки интервал от време един от изследователите (F. L. V. B.) извиква собственици, за да осигури спазването и да събере информация относно приема, вкуса и толерантността на храносмилането на диетата, както и телесното тегло и оценките на телесното състояние. В края на 1-годишното проследяване собствениците получиха две торби с търговска храна за кученца и кучешка енциклопедия, за да ги възнаградят за участието си. При 6- и 12-месечните проследявания 2 ml кръвни проби бяха събрани от редовните ветеринарни лекари на животновъдите и изпратени в университета в Утрехт за изследване на антитела (вж. По-горе).

След приключване на проследяването на всички носилки (февруари 2011 г.) и след като резултатите бяха наблюдавани за плазмените антитела на праховия акар, беше взето решение да се следват кучетата в продължение на още 22 месеца, за да се оцени честотата на клиничните признаци, съвместими с AD . Всички въпросници бяха изпратени на собствениците едновременно (декември 2011 г.). В резултат на това по време на това първо проучване кучетата са били на възраст между 22 и 36 месеца. Втори въпросник беше изпратен 1 година по-късно, когато кучетата бяха на възраст между 34 и 48 месеца. Във въпросниците (приложение Б) беше идентифицирано участието на кожни места, често свързани с AD. В допълнение, интензивността на сърбежа се оценява от собственика на кучето чрез визуална аналогова скала на сърбеж (диапазон 1 до 10 (, 12)).

Диетата, хранена с кучета след приключване на 12-месечното контролирано проучване на диетата, също е записана (както съобщават собствениците).

Статистика

Статистическите анализи бяха извършени със софтуер SAS версия 9 · 3 (SAS Institute Inc.). Обобщен линеен смесен модел (procGLIMIX) с Der f или Der p (2, за да се определи дали признаците са по-чести при кучета, хранени с диета B, отколкото диета A.

Декларация за етика

Всички протоколи се придържат към европейските регулаторни правила за хуманно отношение към животните; всички експериментални протоколи са в съответствие с насоките на Европейския съюз за хуманно отношение към животните и са одобрени както от комитетите по етика и хуманно отношение към животните на Royal Canin и University of Utrecht.

С животновъдите, участващи в проучването, се свърза чрез холандския клуб „Лабрадор“. Развъдчиците не получават заплащане за участието си, но цялата храна се предоставя безплатно. Използвани са общо осем животновъди, пет за групата хранени диета А и три за групата хранени диета Б.

Резултати

Общите тегла и темпове на растеж за двете групи са равни до 12 месеца (многофакторна ANOVA; не е показана). Въпреки това, ANOVA за период предполага, че жените растат по-бързо през два месечни интервала на диета А (на възраст между 2 до 3 и от 4 до 5 месеца), което води до значителна разлика в теглото между групите на 5 месеца. Тази разлика в теглото обаче изчезна между 5 и 6 месец.

Шансовете да бъде назначен Der f = 1 са по-ниски на 6 месеца в сравнение с 12 месеца (OR 0,38; 95% CI 0 · 172, 0 · 837; P = 0 · 017). Не се наблюдава ефект от диетата или взаимодействието на диетата × време (P = 0 · 153 и P = 0 · 107, съответно). Шансовете да бъде назначен Der p = 1 са по-големи за диета B в сравнение с A (OR 0 · 299; 95% CI 0 · 12, 0 · 712; P = 0 · 01). Шансовете Der p = 1 да бъде назначен е бил по-нисък на 6 месеца в сравнение с 12 месеца (OR 0 · 298; 95% CI 0 · 133, 0 · 669; P = 0 · 004). Не се наблюдава взаимодействие на диета × време (P = 0 · 584).

подсилени

Циркулиращи концентрации на анти-Der f и -Der p IgE за две диетични групи на 6 и 12 месеца. (а) Съответни влияния на диетата (допълнена тестова диета А и недопълнена контролна диета В) и времето (6 и 12 месеца) върху циркулиращия Der p IgE (взаимодействие NS). (б) Ефект във времето в рамките на диетата (взаимодействие P Таблица 1). От кучетата трима от всяка група показват признаци на сърбеж на определени места. В групата, хранена с диета А, две от трите кучета са от едно котило (различни стопани). И двамата са имали повишен Der f IgE на 1 година (> 162 A). Третото куче също има повишен Der f IgE на 1 година (192 EA). И трите кучета показаха ясни доказателства за сърбеж по корема и краката. От трите кучета с пруритус в групата, хранени с диета В, две отново са от едно котило (различни стопани). Две от трите кучета са повишили IgE до Der f на 1 година (> 508 EA).

маса 1.

Честота на признаци на сърбеж/атопичен дерматит при кучета, хранени през първите 12 месеца с диета А (тестова диета) или диета Б (контролна диета), оценена чрез последващи въпросници 1 и 2

(Брой кучета във всяка категория)

Тип диета Без сърбеж Сърбеж
Проследяване 1 (възраст 22–36 месеца) †A22.3
Б.313
Проследяване 2 (възраст 34–48 месеца) *A22.2
Б.23.10

* Втори последващ анализ: значителна разлика (P = 0 · 048; χ 2 с 1 df).

† Първи последващ анализ: няма значителна разлика.

Въпросник 2

Вторият въпросник беше изпратен на шестдесет и седем собственика на домашни любимци; петдесет и деветте респонденти на първия въпросник и още осем, които върнаха своите въпросници след крайния срок при първия случай (Таблица 1). След 4 седмици имаше петдесет и седем респонденти; Кучета 24/29 диета А (83%) и 33/38 кучета диета B (87%). От кучетата, хранени с диета А, две демонстрират признаци на АД (8,3%). Едно от тези кучета беше положително за сърбежни признаци при първия въпросник; другото куче е развило признаци през предходната година. И двете кучета показват високи Der f и Der p IgE на 12 месеца (> 192 EA). Две от първоначално положителните кучета разрешиха признаците си без клинично лечение или промяна в диетата. От кучетата, които са били хранени с диета В, десет сега показват признаци на сърбеж (30,3%). От тези кучета три също са показали признаци първоначално. Също така, шест от десетте са имали положителни Der f и Der p IgE на 12 месеца (> 205 EA); един беше положителен само за Der f и друг положителен само за Der p.

В групата, хранена с диета А, двете положителни кучета при второто проследяване произхождат от едно и също кучило. В групата, хранена с диета B при второто проследяване, десетте положителни кучета произхождат от пет различни котила от включените шест. От последните пет от тези кучета бяха от един и същи развъдчик, три от друг и две от друг. Няма значителна разлика в разпределението на възрастта на кучетата между диетичните групи A и B за фазата на въпросника на проучването (P = 0 · 93; тест на Kolmogorov – Smirnov). Честотата на сърбеж не се различава значително между двете групи по време на първия въпросник (със или без добавянето на осемте късни отговора). Честотата на сърбеж между двете групи се различава значително при втория въпросник; имаше повече симптоматични животни в контролната (B) диетична група, отколкото тестовата диетична група (A) (χ 2; P = 0 · 048; Таблица 1), когато бяха включени всички върнати въпросници. Ако петте точки от данни са изключени, когато собствениците не са успели да върнат двата въпросника, анализът χ 2 връща значимост от P = 0 · 046.

Не е открита връзка между честотата на признаците на АД и промените в диетата, преживени от кучетата след 1 година, нито за последващ въпросник.

Дискусия

В настоящото проучване две групи кучета са били хранени с два отделни диетични режима за първата година от живота. След това кучетата бяха проследявани чрез въпросник на собственика в два момента, докато навършиха 34- до 48-месечна възраст. Във втория момент от въпросника по-голям брой от групата, хранена с контролната диета (В), е развила признаци, показващи АД (свързани с храни или нехранителни продукти) в сравнение с групата, хранена с тестовата диета, съдържаща добавка за бариера на кожата (група В: 30 · 3% срещу група А: 8 · 3%; P = 0 · 048). Подобна разлика между двата комплекта кучета не се наблюдава по време на първото проучване на собственика (възрастови граници 22–36 месеца).

Описаното тук надлъжно проучване беше трудно да се контролира напълно. Например, диетата не се контролира след първата година и е непрактично да се контролира средата, в която се отглеждат животните. Изследването обаче е предназначено да разгледа влиянието на ранното хранене върху експресията на алерген IgE и последващите признаци на AD на кучетата в нормалната им среда. Следователно променливостта, която изпитват кучетата, може би е отражение на тази нормалност. Все пак се признава, че използването на данни от въпросника на собственика не е идеално, като се разчита, както и на субективната преценка на необучени лица.

Способността за увеличаване на кожната бариера чрез осигуряване на подходящо хранене може да бъде ценен инструмент за подпомагане на естествената защита на животното срещу алергенни агенти от околната среда. Последващите проучвания, фокусирани върху пълната диагностика и характеризиране на AD при кучета, хранени с добавено хранене за по-дълъг период, ще дадат по-ясна картина на потенциалната стойност на този подход.

Благодарности

Финансова подкрепа за настоящото проучване беше предоставена от Royal Canin®. Диетите бяха осигурени от Royal Canin®. Статистическа експертиза беше предоставена от Алекс Фойе, Royal Canin®.

Ф. Л. В. Б. беше докторант, отговорен за извършването на проучването и анализа на данните; A. W. беше съветник по хранителните аспекти/дизайна на изследването, анализа на данните и отговаряше за написването на ръкописа; М. Б. беше съветник по проучването и отговорен за координирането на всички аспекти на диетичните режими; В. Б. отговаряше за експерименталния дизайн и е докторски съветник за Royal Canin®; T. W. беше ръководител на докторска степен в университета в Утрехт и директор на изследването.

В. Б., М. Б. и А. В. са служители на Royal Canin®. Останалите автори нямат конфликт на интереси.

Приложение А. Подробности за диетата

Диети А и Б: рано

Дехидратирано птиче месо, ориз, царевица, животински мазнини, пшеничен глутен, птичи черен дроб, птичи протеини, пулпа от цвекло, минерали, рибено масло, соево масло, фрукто-олигозахариди, люспи и семена от псилиум, l-лизин, екстракт от мая, таурин, яйце прах, екстракт от невен, хидролизирани ракообразни, хидролизиран хрущял, витамини.

Протеини 30%, мазнини 22%, въглехидрати 28 · 1%, екстракт без N 31,5%, метаболизираща се енергия 4200 kcal/kg.

Диети А и Б: растеж

Ориз, дехидратирано птиче месо, царевичен глутен, царевица, животински мазнини, пшеничен глутен, ечемик, птичи протеини, хидролизиран животински протеин, минерали, цвекло, пулпа, рибено масло, растително масло (соя, пореч), яйчен прах, фрукто-олигозахариди, псилиум люспи и семена, l-лизин, натриев полифосфат, екстракт от мая, таурин, хидролизирани ракообразни, dl-метионин, хидролизиран хондроитин, l-карнитин, екстракт от невен.

Протеини 33%, мазнини 14%, въглехидрати 31,2%, екстракт без азот 36%, метаболизираща се енергия 3900 kcal/kg.

Приложение Б. Подробности за въпросника на собственика

Q1. Сърби ли кучето ви редовно след края на проучването за хранене? Да не*

* Ако „не“, моля, продължете с въпрос 6.

Q2. Колко месеца след прекратяване на проучването, сърбежът започна:

Q3. Колко силен е сърбежът по скала от 1 (много незначителен и случайно) - 10 (много силен и постоянно):………. . (попълнете номер)

Q4. На коя възраст започна този сърбеж? ... ... ... години ... ... ... месеци

Q5. Посочете местата, на които кучето редовно се чеше, ближе, трие и/или хапе:

  • □ муцуна
  • □ уши
  • □ крака
  • □ крака
  • □ подмишници
  • □ корем
  • □ другаде: ... ... ...

Q6. Местният ветеринарен лекар диагностицира ли алергия? Да/не * (ако е „не“, моля, продължете с въпрос 11)

Q7. Как вашият ветеринарен лекар е диагностицирал тази алергия?

  • □ само въз основа на клинични прояви
  • □ с помощта на кръвен тест
  • □ с помощта на кожен убоден тест (с различни вещества)
  • □ с помощта както на кръвен тест, така и на кожен убоден тест