Сара А. Хейл

a Акушерство, гинекология и репродуктивни науки, 89 Beaumont Ave, University of Vermont, Burlington, VT, САЩ, 05405

Бъртън Собел

b Отдел за сърдечно-съдови изследвания, Университет на Върмонт, Бърлингтън, Вирджиния, САЩ, 05405

Ана Бенвенуто

a Акушерство, гинекология и репродуктивни науки, 89 Beaumont Ave, University of Vermont, Burlington, VT, САЩ, 05405

Адриен Шонберг

a Акушерство, гинекология и репродуктивни науки, 89 Beaumont Ave, University of Vermont, Burlington, VT, САЩ, 05405

Gary J. Badger

c Катедра по медицинска биостатистика, Университет на Върмонт, Бърлингтън, VT 05405

Ира М. Бърнстейн

a Акушерство, гинекология и репродуктивни науки, 89 Beaumont Ave, University of Vermont, Burlington, VT, САЩ, 05405

Резюме

Обективен

Настоящото проучване надлъжно оценява концентрациите на фибриноген (Fib), D-Dimer, активатор на плазминоген тип-1 (PAI-1) и активатор на плазминоген на тъканен тип (T-Pa) преди бременност и през първия и третия триместър на бременността с фокус на прехода на бременността.

Уча дизайн

Двадесет здрави, непушачи, неродени жени, на възраст 29,8 ± 3,0 години, ИТМ 23,3 ± 3,2 kg/m 2 са изследвани по време на менструалния цикъл ден 8 ± 4 и отново в ранна (11 - 15 седмици) и късна (31 - 34 седмици) бременност . Седемнадесет жени са имали едноплодни забременявания и са се родили на термин с неусложнена бременност (CTL), а три жени са развили усложнена хипертония (СН) по време на бременност след оценка на третия триместър (късна бременност). Данните са средни стойности ± SEM, Значението се основава на p Ключови думи: бременност, прееклампсия, коагулация, фибринолиза, T-Pa, фибриноген

Въведение

Бременността е придружена от промени в експресията на коагулацията и фибринолитичните протеини, които благоприятстват баланса към образуването на съсиреци. Увеличаването на активирането на коагулационната каскада допринася за намаляване на риска от кръвоизлив, който иначе би могъл да навреди на здравето на плода и майката. Промените както на външния, така и на вътрешния път на коагулация са добре характеризирани и показват, че протромбинът, факторите на коагулация VII, X, XII и VIII се увеличават по време на бременност [1]. Доказано е, че фибриногенът, предшественикът на фибрин, се увеличава по време на бременност, допринасяйки за прокоагулантна среда [1–3].

Протеините във фибринолитичната система, които инхибират фибринолизата, се регулират нагоре, като по този начин допълнително благоприятстват коагулацията. Инхибиторът на плазминогенния активатор тип-1 (PAI-1) е антифибринолитичен протеин, замесен в съдовото ремоделиране [4]. PAI-1 се секретира от ендотелни клетки, стимулирани от редица сигнални части, включително тромбин [5]. По време на бременност PAI-1 е основен инхибитор на тъканния тип активатор на плазминоген (T-Pa), ключов протеин, участващ в разграждането на фибрина [6, 7]. T-PA се произвежда от ендотелни клетки, секретирани локално в отговор на ендотелни увреждания, и в присъствието на фибрин, е мощен активатор на плазминоген, решаващ етап в разграждането на фибрина [5]. T-PA се увеличава по време на бременност; обаче, увеличенията на PAI-1 заместват тези в T-PA, като по този начин се поддържа прокоагулируема среда [8]. Въпреки че коагулационните процеси преобладават над фибринолизата по време на бременност, D-Dimer, продукт на разграждането на фибрина, се увеличава с напредване на бременността, което показва функционално активна фибринолитична система [8].

Докато нормалната бременност е придружена от повишена коагулация, жените, които развиват прееклампсия (PE), имат повишена коагулация в сравнение с тези с нормална бременност [9]. Клиничните прояви на повишена коагулация включват излишно отлагане на фибрин и образуване на микротромби, включващи както майчините органи, така и плацентата [10]. Хиперкоагулируемостта на PE се дължи на ендотелната дисфункция, намалените нива на антитромбин и повишените нива в маркерите за тромбинова активност [9, 11]. Съобщава се, че и други протеини, участващи в хемостазата, като фактор VIII, разтворим фибрин, тромбомодулин и D-димер, се променят в PE [12-16].

Целта на настоящото проучване е да се оцени концентрацията на коагулационните и фибринолитичните протеини в надлъжна форма при жени, които не са раждали преди бременност и по време на бременност с основен фокус върху прехода от небременното състояние към бременността. Оценихме концентрациите на фибриноген, PAI-1, T-Pa и фибринов фрагмент D-Dimer преди бременността и по време на ранна и късна бременност. В допълнение, ние оценихме разликите в тези моменти от време при жени, които впоследствие развиха прееклампсия.

Методи

Всяка периодична оценка се провежда между 8:00 и 10:00. Субектите бяха приети в Общия клиничен изследователски център на Университета на Върмонт в деня на изследването след пост през нощта. За посещението на субектите с бременност се получава урина с първа кухина, за да се потвърди небременното състояние. След определяне на височината и теглото, пациентите почиват в легнало положение до края на изследването с минимум 30 минути преди вземането на кръв.

Кръвни проби се събират в епруветки с EDTA или натриев цитрат, в зависимост от анализа, от антекубиталната ямка с използване на постоянен венозен солев разтвор и след изхвърляне от 2,5 ml. Те бяха центрофугирани в рамките на 60 минути в продължение на 15 минути при 3000 × g, за да се изолира плазмата. След това плазмата се разпределя в аликвотни части и се съхранява при -70 ° С до анализ.

Методи за анализ

Коагулация

Концентрациите на фибриноген в плазмата се определят с помощта на метода на Клаус [17]. Нивата на фибриноген са пряко свързани с времето на съсирване на разредена плазмена проба в присъствието на излишен тромбин. Концентрациите на фибриноген се определят количествено с автоматизиран анализатор на коагулация STAR (Diagnostica Stago, Parsippany, NJ). След това резултатите от пациентите с фибриноген бяха сравнени въз основа на резултатите от контрола. CV между пробите варира от 2 - 6%.

Фибринолиза

T-PA антигенът и PAI-1 антигенът бяха оценени с използването на налични в търговската мрежа ELISA, в съответствие с инструкциите на производителя (TriniLIZE T-Pa Antigen kit и TriniLIZE PAI-1 Antigen kit, Diagnostica Stago). PAI-1 антигенът отразява както активен, така и неактивен PAI-1, както и PAI-1, комплексиран с T-Pa и урокиназен плазминогенен активатор.

Активността на PAI-1 се оценява, както е описано по-рано, като се използва модифициран метод за ензимен анализ на хромогенен субстрат, разработен от Chmielewska и Wiman [18].

D-Dimer се измерва с използването на наличен в търговската мрежа имуно-турбидометричен анализ (Liatest D-Di, Diagnostica Stago) в съответствие с инструкциите на производителя. Интерактивната автобиография варира от 5 до 14%.

Статистически анализи

За демографска информация, изброена в таблица 1, беше използван t-тест на Student за определяне на статистическа значимост. P-стойността за процентил на тегло при раждане отразява пробитна трансформация на процентили в z-резултати преди анализ. Използвани са двуфакторни дисперсионни анализи за дисперсия, за да се сравнят жените с нормална бременност и тези, усложнени от хипертония при надлъжни промени в коагулацията и фибринолитичните протеини. Двата фактора в ANOVA представляват групата на бременността (фактор, обхващащ всички участници) и времето за оценка (фактор в рамките на субекта). Когато е подходящо, се използват F-тестове за прости ефекти, за да се изследват временните тенденции на всяка група след цялостната ANOVA. Сравненията по двойки бяха извършени с помощта на LSD на Fisher. Корелацията на ранга на Spearman (r) беше използвана за изследване на корелацията между измервателните мерки в рамките на и между времевите точки. Анализите бяха извършени с помощта на SAS статистически софтуер версия 9.2 (SAS Institute, Cary NC). Статистическата значимост беше определена въз основа на α = .05.

маса 1

Демографски характеристики на майката и резултати от бременността

Характеристика CTL (n = 17)
Средно ± SECH (n = 3) *
Средна стойност ± SEp-стойност #
Възраст на майката (години)28,9 ± 0,731,3 ± 1,2.21.
ИТМ (kg/m 2)23,6 ± 0,821,5 ± 0,9.31
Ден на цикъла на бременността8,6 ± 1,17,7 ± 1,2.71
Първи триместър ден на изследване † 93,3 ± 2,697 ± 7,6.60
Трети триместър учебен ден227,8 ± 2,0212,0 ± 0,6.005
Гестационна възраст при раждане (седмици)39,7 ± 0,338 ± 1,0.13
Тегло при раждане (g)3582 ± 962514 ± 421.001
Персентил с тегло при раждане55,2 ± 6,012 ± 9,1.003

Резултати

Характеристики на предмета

Всички бременности са били единични и по-голямата част от пациентите са били от Кавказка, 90% (18/20). Клиничните и демографските характеристики са представени в таблица 1. Няма значителни разлики между нехипертоничните (CTL) и жените с усложнена хипертония (СН) във възрастта, индекса на телесна маса (ИТМ), деня на цикъла на бременност, деня на ранното проучване на бременността и гестационната възраст при раждането (Таблица 1). Имаше значителна разлика между CTL и CH от третия триместър на изследването, когато CTL бяха изследвани шестнадесет дни по-късно от CH. Тегло при раждане и персентил на новородените са значително по-ниски при пациенти с СН в сравнение с CTL (p = .001 и p = .01, съответно). Две от CH новородените са били малки за гестационна възраст (1-ви и 5-ти персентил с тегло при раждане), докато третото новородено CH е било в 30-ия процентил. CTL новородените тежести за новородени варират от 15-ти до 95-ти процентил.

Средните стойности и SE за всяка от хемостатичните оценки и в двете групи са изброени в таблица 2 и представени на фигури 1 и и 2 2 .

система

Коагулация

Нашето надлъжно проучване подчертава времевия характер на промените в коагулационните и фибринолизните каскади, започващи преди бременността и преминаващи през бременността. Първоначално повишаването на фибриногена (и вероятно генериране на тромбин) се случва при нормална бременност. По време на края на бременността увеличаване на T-Pa увеличава фибринолиза, обаче, постоянни увеличения на фибриноген, съчетани с едновременно повишаване на PAI-1 може да измести баланса към коагулация. При СН T-Pa се увеличава допълнително, може би като компенсаторен отговор на прекомерна коагулация и образуване на микротромби, характерни за хипертонично усложнена бременност или потенциално отразяващи ендотелни увреждания.

Благодарности

Изследванията са извършени в университета във Върмонт, Бърлингтън, Вирджиния

Безвъзмездна помощ: NIH HL 71944 (IMB) M01 RR109 (UVM GCRC)

Съкращения

CTLконтрол
CHсложна хипертония
PAI-1инхибитор на плазминогенен активатор-1
T-Paактиватор на плазминоген от тъканен тип

Бележки под линия

Отказ от отговорност на издателя: Това е PDF файл на нередактиран ръкопис, който е приет за публикуване. Като услуга за нашите клиенти ние предоставяме тази ранна версия на ръкописа. Ръкописът ще бъде подложен на редактиране, набиране и преглед на полученото доказателство, преди да бъде публикуван в окончателния си вид. Моля, обърнете внимание, че по време на производствения процес могат да бъдат открити грешки, които биха могли да повлияят на съдържанието, и всички правни откази от отговорност, които се отнасят до списанието, се отнасят до.