кошница

Поставяне на яйца в кошница, стъпка 1: Възстановяване на яйцата - Процедура за вземане на яйцеклетка (OPU)

Може би си спомняте, че имах късмета да пътувам до Южна Африка, за да тренирам по процедура, наречена яйцеклетка (OPU) с нашия сътрудник д-р Morné de la Rey. Наскоро извършихме тази процедура върху някои от жените в Спасителния център за носорози, с д-р де ла Рей, за да можем да опитаме нашата система за ин витро култура и да се надяваме да произведем ембриони от носорог.

Има много планиране, което върви при подобна процедура. На първо място е безопасността на животното. Тази процедура наистина изисква анестезия, която нашите ветеринарни служби наблюдават много внимателно. Но искам да поговоря малко за техническите аспекти на процедурата OPU и как получаваме ооцити (яйцеклетка), за да произвеждаме ембриони in vitro.

След като носорогът спокойно заспи, се поставя сонда, която да започне да събира ооцитите. Сондата е специално проектирано оборудване, което държи ултразвуков преобразувател (микроконвекс, за да бъде конкретен) и игли, които ще се простират до „улавяне“ на ооцитите. Зрителното поле, което ултразвукът произвежда, е приведено в съответствие с пътя, по който ще поеме иглата, следователно тази процедура е „насочена с ултразвук.“ Знаем, че иглата ще премине през зрителното поле на ултразвука, поради което поддържането на визуалното зрение яйчниците и фоликулите, които възнамеряваме да аспирираме, са толкова важни. Може да си спомните от предишни публикации, че фоликулът е структурата на яйчника, в която се помещава яйцеклетката. Така че, теоретично, във всеки видим фоликул на ултразвука има ооцит.

След това отделяме време, като се грижим за възстановяването на цялото съдържание на фоликула и, надяваме се, окото в него. За целта използваме игла с двоен лумен (основно игла в иглата). Външната игла е свързана с източник на промивна среда, докато вътрешната игла е свързана към събирателен съд, който също е прикрепен към аспирационна единица, която създава отрицателно налягане. Външната игла изтласква течност във фоликула, вътрешната игла изсмуква течността навън. Когато иглата е във фоликул, аспирационната помпа се включва, за да изсмуче течността; едновременно с това течността се изтласква във фоликула и създава турбуленция. Надяваме се, че тази турбуленция измества ооцита и му позволява да се изсмуче с останалата част от течността. Най-готината част е, че всичко това може да се види на ултразвуковия екран. След като фоликулът е достатъчно промит и аспириран за последен път, без да оставя течност във фоликула, иглата се прибира и подравнява с друг фоликул и процесът се повтаря.

Този процес е завършен на толкова фоликули, колкото могат да бъдат безопасно достъпни и на двата яйчника. Цялата течност, която е изсмукана, вече е в съда за събиране - надяваме се, че има и ооцитите! По време на тази сложна процедура трябва да се вземат няколко съображения: първо, безопасността на животното, но също така и жизнеспособността на яйцата. Ние затопляме средата, която се промива във фоликула, както и събирателния съд, който задържа течността, отстранена от фоликула. Средата, която използваме за промиване на фоликула, е формулирана така, че да подхранва ооцитите, събиращият съд е стъклен, така че яйцата да не полепват по стените, а налягането, с което аспирираме течността, е внимателно регулирано, за да не се повредят ооцитите, докато пътуват събирателният съд.

След като процедурата приключи, съдът за събиране незабавно се отвежда в лабораторията, където течността се търси за яйцата, за да могат да бъдат култивирани и да се надяваме да станат ембрион след оплождането. Това също е завладяващ процес и ще оставя това на Карли Йънг, за да ви разкажа. Ще кажа, че процедурата беше успешна! Възстановихме яйчници от четирите животни, които аспирирахме - дори огромен 13 от RRC женски Ливия!

Толкова сме развълнувани да видим как тази процедура безопасно възстановява ооцитите от тези жени и очакваме с нетърпение какво ще ни позволи да направим.

Видео по-долу: Това видео показва ултразвуковото изображение на яйчника по време на процедура на OPU, в този случай еднокопитно. Големите тъмни кръгове са фоликули, всеки съдържа яйце. Тъй като ултразвуковият преобразувател и иглата са подравнени, когато фоликулите са разположени в „зрителното поле“ на ултразвука, иглата има предсказуем път. В това видео фоликулът е разположен в горния ляв ъгъл на ултразвуковия екран. След това иглата ще влезе в горния ляв ъгъл и ще пробие фоликула, фоликулът се срива незабавно, съдържанието му се аспирира - и да се надяваме на яйцето!

Забележка: ориентацията на видеото е правилна, ултразвуковата единица е отстрани, за да помогне на зрителния фоликул и иглата за подравняване.