Акрам Ахангарпур

1 Институт за здравни изследвания, Център за изследвания на диабета, Катедра по физиология, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран

хиполипидемични

Хамид Хайдари

2 Катедра по физиология, Институт за здравни изследвания, Център за изследване на диабета, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран. Катедра по физиология, Медицински факултет, Университет по медицински науки Кум, Кум, Иран

Али Акбар Ороджан

3 Катедра по физиология, Изследователски комитет на студентите, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран

Фарханг Мирзаванди

4 Катедра по хранене, Студентски изследователски комитет, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран

Халил Наср Есфехани

4 Катедра по хранене, Студентски изследователски комитет, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран

Зейнаб Дехган Мохамади

1 Институт за здравни изследвания, Център за изследване на диабета, Катедра по физиология, Университет по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран

Резюме

Обективен:

Arctium lappa (репей), (A. lappa) корен има хипогликемични и антиоксидантни ефекти и се използва за лечение на диабет в традиционната медицина. Това проучване е проведено за оценка на антидиабетните и хиполипидемичните свойства на екстракта от корена на A. lappa върху индуциран от никотинамид-стрептозотоцин (NA-STZ) диабет тип 2 при мишки.

Материали и методи:

В това разследване 70 възрастни мъжки NMRI мишки (30-35g) са разделени на случаен принцип в 7 групи (n = 10), както следва: 1-контролни, 2-тип 2 диабетни мишки, 3-диабетни мишки, които са получили глибенкламид (0,25 mg/kg ) като антидиабетно лекарство, 4, 5, 6 и 7- диабетни и нормални животни, които са били предварително третирани с 200 и 300 mg/kg екстракт от корена на A. lappa, съответно, в продължение на 28 дни. Диабетът се предизвиква чрез интраперитонеално инжектиране на NA и STZ. Накрая беше взета кръвната проба и бяха оценени нивата на инсулин, глюкоза, SGOT, SGPT, алкална фосфатаза, лептин и липиди.

Резултати:

Индукцията на диабет намалява нивото на инсулин, лептин и липопротеин с висока плътност (HDL) и значително повишава нивото на други липиди, глюкоза и чернодробни ензими (p Ключови думи: Arctium Lappa, диабет тип 2, инсулин, липиден профил, чернодробен ензим

Въведение

Материали и методи

Растителен материал

Свежи корени на A. lappa са получени от планините на провинция Исфахан, Иран и са научно потвърдени от Катедрата по ботаника на Университета по медицински науки Ahvaz Jundishapur, Ahvaz, Иран. Образец на ваучер от A. lappa е депозиран в хербариума на Земеделския факултет на Университета Шахид Бехещи (№ AR337E). Корените бяха смачкани с помощта на механични мелнички.

Приготвяне на екстракт

За приготвяне на хидроалкохолен екстракт от корен A. lappa, 50 g от неговия прах се мацерират в 200 ml смес (60-40; дестилирана вода-метанол) и се държат 72 часа при стайна температура. След това тази смес се филтрира с помощта на филтърни хартии Whatman (№ 1) и се центрофугира при 3500 об/мин за 20 минути. В крайна сметка сместа се изсушава при стайна температура, разтворителят се изпарява и получената полутвърда маса се поддържа при 4 ° C, докато се използва (Ahangarpour et al., 2014 ▶).

Животни

Седемдесет възрастни мъжки мишки NMRI (30-35 g) са закупени от къща за животни на Университета по медицински науки Ahvaz Jundishapur (AJUMS) и са държани в клетки при температура 20 ± 4 ° C с 12 часа светлина/12 часа тъмен цикъл и свободен достъп до вода от чешмата и търговска чау. Всички експериментални протоколи бяха в съответствие с насоките и стандартите за грижа за животните, одобрени от Институционалния комитет по етика на животните на AJUMS (Ahvaz, Иран) с етичен номер D-9103.

Модел тип 2 на захарен диабет индукция

Този модел на диабет е индуциран при възрастни мъжки NMRI мишки с гладно през нощта чрез еднократна интраперитонеална (IP) инжекция на NA (110 mg/kg телесно тегло, разтворена в нормален физиологичен разтвор) (Merck, Германия) 15 минути преди IP приложение на STZ 50 mg/kg телесно тегло, разтворено в цитратен буфер, рН 4,5) (Sigma Aldrich, САЩ) (Ahangarpour et al., 2015 ▶). Нивото на кръвната захар е измерено преди и 72 часа след инжектиране на NA-STZ, за потвърждение на хипергликемия и развитие на диабет тип 2. В крайна сметка нивата на кръвната захар над 250 mg/dL се считат за диабет и се използват за експериментите (Ahangarpour et al., 2014 ▶).

Експериментален дизайн

Всички мишки бяха разделени на случаен принцип в седем групи (10 мишки на група) и третирани веднъж дневно в продължение на 28 последователни дни в следните групи: контролна група, която получава нормален физиологичен разтвор; диабетна група тип 2; диабетна група тип 2, лекувана с глибенкламид (0,25 mg/kg) (Sigma Aldrich, САЩ), като стандартно хипогликемично лекарство; две групи за лечение на диабет, които са получавали хидроалкохолен екстракт от корен A. lappa перорално чрез стомашна сонда в дози съответно 200 и 300 mg/kg телесно тегло; и две групи нормални животни, които са получили хидроалкохолен екстракт от корен A. lappa 200 и 300 mg/kg перорално съответно чрез стомашна сонда (Ahangarpour et al., 2015 ▶).

Биохимична оценка

Един ден след последното приложение на лекарството, гладуващите през нощта животни се упояват с етер. Нивата на кръвната захар на гладно се оценяват от глюкометър Elegance (CT-X10, Convergent Technologies, Германия), като се използва страничната вена на опашката на мишките през първия и последния ден от експеримента. След това кръвни проби се събират директно чрез сърдечна пункция и се центрофугират при 3500 rpm в продължение на 20 минути. Серумните проби се държат при -70 ° C до биохимична оценка (Zamami et al., 2008 ▶). Нивата на серумния инсулин се оценяват чрез радиоимуноанализ (RIA) (Diosource INS-IRMA Kit) с чувствителност на анализа от 1 µIU/mL, вариационен коефициент на вариация (CV) от 6,5% и CV в рамките на 2,1%. Също така инсулиновата резистентност (HOMA-IR), оценката на хомеостатичния модел на функцията на бета-клетките на панкреаса (HOMA-β), количественият индекс за проверка на чувствителността към инсулин (QUICKI) и индексът на инсулинова диспозиция (DI) са изчислени по следната формула:

HOMA-IR: кръвна глюкоза на гладно (mg/dL) × инсулин (µIU/ml)/405 (Ahangarpour et al., 2014 ▶).

HOMA-β: 20 × инсулин (µIU/mL)/(FBS (mmol/L) - 3.5) (Ma et al., 2014 ▶)

БЪРЗО: 1/(log FBS (mg/dL) + log инсулин (µIU/mL)) (Ma et al., 2014 ▶)

DI: Ln HOMA-β/Ln HOMA-IR (Li et al., 2014).

Липидни профили, лептин, серумни ALP, SGOT и, SGPT измерване

Общи нива на холестерол (TC), триглицериди (TG), LDL-холестерол (LDL-c) и HDL-холестерол (HDL-c) и серумна активност на алкална фосфатаза (ALP), серумна глутамино-оксалоцетна трансаминаза (SGOT) и серумната глутаминова пирувична трансаминаза (SGPT) се анализира чрез използване на търговски комплекти (Pars Azmoon, Иран) и метод на автоматичен анализатор. Концентрацията на липопротеиновия холестерол с много ниска плътност (VLDL – c) беше изчислена по формулата на Норберт, която се равнява на една пета от нивото на TG (Mousavi et al., 2012 ▶). Атерогенният индекс (AI = Log (TG/HDL-c)) се определя като зоната на атерогенен риск (Rafieian-Kopaei et al., 2014). Нивото на серумния l-лептин се оценява чрез комплект ELISA (Labor Diagnostika Nord GmbH, Германия) с чувствителност от нисък клас от 0,5 ng/ml, интра- и междинна CV съответно 4,3 и 5,8%.