Вирджиния Мела

1 Катедра по физиология (Anim Physiol II), Биологически факултет, Университет Комплутенсе Мадрид, Мадрид, Испания,

промени

Франциска Диас

2 Катедра по ендокринология, Болница Infantil Universitario Niño Jesús, Instituto de Investigación la Princesa & CIBEROBN Instituto Carlos III, Мадрид, Испания,

Ерика Борсел

3 Brain Mind Institute и School of Life Sciences, Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL), Лозана, Швейцария,

Хесус Аргенте

2 Катедра по ендокринология, Болница Infantil Universitario Niño Jesús, Instituto de Investigación la Princesa & CIBEROBN Instituto Carlos III, Мадрид, Испания,

Джули А. Чоуен

2 Катедра по ендокринология, Болница Infantil Universitario Niño Jesús, Instituto de Investigación la Princesa & CIBEROBN Instituto Carlos III, Мадрид, Испания,

Мария-Пас Виверос

1 Катедра по физиология (Anim Physiol II), Биологически факултет, Университет Комплутенсе Мадрид, Мадрид, Испания,

Замисля и проектира експериментите: MPV JAC. Изпълнява експериментите: VM FD EB. Анализирани данни: VM. Реактиви/материали/инструменти за анализ, допринесени: MPV JA JAC. Написа хартията: MPV VM JAC.

Свързани данни

Всички съответни данни са в хартията.

Резюме

Въведение

Тъй като нивата на циркулиращ лептин са драстично намалени по време на МД, предположихме, че екзогенното лечение с лептин ще нормализира поне някои от дългосрочните ефекти върху хипокампуса и мозъчната кора, както и някои поведенчески промени, наблюдавани при възрастни плъхове с МД. Целта на това проучване беше да се определи дали ежедневното лечение с лептин, между PND9 до PND13, може да предпази от вредни ефекти на MD или палиати по някакъв начин някои от промените, предизвикани от MD протокола. Разгледахме поведенчески и молекулярни параметри, които преди това анализирахме и които бяха модифицирани от MD [40]. За отбелязване е, че важни полови разлики са описани последователно по отношение както на поведенческите, така и на невробиологичните последици от МД. Всъщност се съобщава за полови различия от ранните неонатални етапи (PND 13) до зряла възраст [16]; по този начин, ние включихме както мъже, така и жени в това проучване.

Материали и методи

Животни

Възрастни плъхове Wistar са закупени от Harlan Interfauna Ibérica S.A. (Барселона, Испания) и са оставени да се аклиматизират за 2 седмици преди чифтосването. Един мъж бил поставен в клетка с две жени за 10 дни. В деня на раждането (PND0) отпадъците се бракуват до осем малки на язовир (четири мъжки и четири женски). Не е използвано кръстосано насърчаване. Във всички експериментални групи бяха използвани три различни кучила за намаляване на ефекта на котилото, с общо 12 плъха във всяка експериментална група. Плъховете се поддържат при постоянна температура (22 ± 1 ° C) и влажност (50 ± 2%) в обратен 12-часов цикъл светлина-тъмнина (червена светлина в 8:00 и бяла светлина в 20:00) и предоставен безплатен достъп до чау-чау (търговска диета за гризачи 2918; Harlan Laboratories, Madison, WI, USA) и вода.

Експериментите бяха одобрени от местния комитет по етика на животните (Комитет за изследвания на животните към Университета Комплутенсе в Мадрид) и бяха определени и извършени в съответствие с Кралския указ 1201/2005, 21 октомври 2005 г. (Boletín Oficial del Estado, BOE n ° 252 ) относно защитата на опитни животни и Директивата на Съвета на Европейските общности от 24 ноември 1986 г. (86/609/ЕИО). Експериментите бяха одобрени от Комитета за изследвания на животните към Университета Комплутенсе, референтен номер на документа за одобрение на протокола: CA UCM 5 2012. Животните бяха жертвани чрез обезглавяване

Лишаване от майката

Обобщение на експерименталния дизайн може да се види на фиг. 1. Лишаването от майката се извършва, както е описано по-рано [13]. Накратко, започвайки от 09:00 часа на PND9, майките от групата на лишените бяха отстранени и настанени в клетка до домашната клетка в същата стая. На PND10 майките бяха върнати в клетката на съответните носилки. Майките от контролните носилки останаха необезпокоявани.