растеж
 Безопасността и научната валидност на това проучване е отговорност на спонсора на изследването и изследователите. Изброяването на проучване не означава, че то е оценено от федералното правителство на САЩ. Знайте рисковете и потенциалните ползи от клиничните проучвания и говорете с вашия доставчик на здравни грижи, преди да участвате. Прочетете нашата отказ от отговорност за подробности.
  • Подробности за проучването
  • Табличен изглед
  • Няма публикувани резултати
  • Опровержение
  • Как да прочетете запис на проучване

Състояние или заболяване Интервенция/лечение Фаза
Гестационен диабет Хранителна добавка: Холинова добавка Диетична добавка: Плацебо Не е приложимо

ЦЕЛИ НА ИЗСЛЕДВАНЕТО Специфична цел 1: Определяне на ефекта на MCS по време на бременност върху теглото при раждане при GDM.

Специфична цел 2: Определяне влиянието на MCS върху транспорта на макроелементи и епигенетичните модификации в плацентата и кръвта от пъпна връв.

Цел 1: Изследователите предполагат, че холиновата група ще има по-ниско тегло при раждане и по-малко новородени LGA от нехолиновата група.

Цел 2: Изследователите предполагат, че холиновата група ще намали плацентарния транспорт и ще увеличи ДНК метилирането на метаболитните гени.

Теми: Ще бъде възприета удобна методология за вземане на проби. Изследователите ще наемат постоянно бременни жени с диагноза GDM през втория триместър на бременността. Рандомизацията на блокове ще се извършва въз основа на методи за лечение (т.е. инсулинова терапия, орална хипогликемия или само диета), за да се разпределят произволно участниците в интервенционните и контролните групи. Набирането ще се извършва по следните методи: (i) листовки за проучване ще бъдат публикувани в пренаталната клиника; (ii) изследователите ще идентифицират бременни жени, които потенциално отговарят на условията, чрез преглед на медицинските досиета.

Критерии за допустимост: Критериите за включване включват бременни жени с GDM преди гестационната седмица 28. GDM се диагностицира с двустепенен процес: кръвната захар е по-висока от граничната стойност от 140 mg/dL след 50 g на гладно 1 час и 100 g 3-часови орални предизвикателства за глюкоза. Бременните жени са квалифицирани да участват, ако говорят английски или испански, над 18 години, имат едноплодна бременност, възнамеряват да раждат бебетата си в институцията и са без нито едно от условията, изброени в критериите за изключване. Критериите за изключване включват съществуваща хипергликемия, диабет, сърдечно-съдови заболявания и чернодробни заболявания преди бременността. Пациентите могат да изберат да участват в проучването и да не даряват биопсия на своята плацента или пъпна връв. Пациентите, които желаят дарение или съхранение на стволови клетки, няма да могат да дарят биопсия на плацентата или пъпната връв. Тези пациенти няма да бъдат изключени от първичния анализ.

Процедури за проектиране и събиране на данни:

Участниците ще влязат за общо 3 посещения по време на рутинна клинична помощ. Първото посещение ще бъде на 28 гестационна седмица, когато следователите записват участниците, второто посещение ще бъде на 32 гестационна седмица, а третото посещение ще бъде на 36 седмица. Има допълнителни рутинни посещения в клиника (например на 32 седмици), през които може да се получи информация, ако пациентът е пропуснал учебно посещение. Изследователите ще съберат изходен въпросник при първото посещение (приблизително 20 минути), ще извършат 3-дневни диетични припомняния след първото посещение (приблизително 20 минути, всяко) и ще проверят текущото тегло и ще вземат 20 ml кръвни проби при всички посещения. При доставката следователите ще събират проби от плацента и пъпна кръв от участниците.

Изходен въпросник: Въпросникът включва демографска и медицинска информация като възраст, падеж, етническа принадлежност, паритет, семейно положение, ниво на образование, професия, доходи на домакинството, медицинска застраховка, употреба на вещества, употреба на лекарства, хранителна добавка, фамилна анамнеза за хронични заболявания, и самостоятелно отчетено тегло преди бременността.

Диетична оценка: Три 24-часови диетични изземвания, 2 през делничните дни и 1 през уикенда, ще бъдат получени от всеки участник от обучен изследователски асистент (RA) чрез телефонни обаждания след първите посещения за количествено определяне на приема на диетичен холин. Ще се използва многопроходният метод на Harnack и колеги. RA ще регистрира идентификацията на храната, количеството, спецификацията на съставките, метода на приготвяне и ще въведе данни в софтуера за изследване на хранителните данни (NDSR) за анализ на приема на холин. RA също ще попита участниците за тяхната физическа активност (PA) през последните 24 часа, използвайки инструмента за извикване на PA.

Антропометрични измервания и вземане на кръв: Изследователите ще измерват теглото и височината на участниците с помощта на медицинска везна за претегляне с механични височини по време на посещенията. За да се сведат до минимум разликите в концентрацията на концентрацията в плазмените биомаркери, участниците ще бъдат инструктирани да не консумират храна поне 4 часа преди вземането на кръв сутрин. Това е стандартна препоръка за пренатални посещения и се счита за безопасно. Около 20 ml венозна кръв на гладно ще бъдат взети от всеки участник по време на посещенията от изследовател. Кръвните проби ще бъдат събрани в една епруветка за събиране на кръв EDTA и една серумна сепараторна тръба и центрофугирани, за да се получи плазма, многослойна обвивка и серум. Пробите ще бъдат обработени и съхранявани при -80 ° C в лабораторията, докато бъдат използвани за аналитични измервания.

Управление на кръвната глюкоза: Изследователите ще получат информация за глюкозата на гладно, хемоглобина А1С, лекарствата и инсулиновата терапия от медицински карти на участниците.

Информация за раждане и вземане на проби при доставка: Участниците ще уведомят следователите, когато бъдат приети в центъра за раждане по телефона. Разследващите също ще им изпращат напомняния с наближаването на техните срокове. Освен това на медицинския персонал в центъра за раждане ще бъде даден списък с имената на участниците, като по този начин те също ще се свържат с следователите, ако участник се провери, когато никой от персонала на изследването не е на място. След като бебето бъде доставено, изследователите ще вземат две епруветки с пъпна кръв, за да извлекат серум, плазма и козина. Изследователите ще измерват размера и теглото на плацентата и ще обработват плацентата, използвайки следния метод: плацентарните биопсии с пълна дебелина ще бъдат получени с помощта на 6-милиметров удар на Keyes и стабилизирани в RNAlater® (за РНК) или замразени в течен азот (за други цели). Преди употреба пробите ще бъдат транспортирани до лабораторията на съследника за дългосрочно съхранение при -80 ° С.

Оценка на хранителния прием: Както бе споменато по-горе, данните за хранителния прием, събрани от 3-дневни изземвания на диети, ще бъдат анализирани от софтуера NDSR. Ежедневните прием на общ холин ще се изчисляват чрез умножаване на честотата на консумация по сумата на холиновите производни, включително свободен холин, фосфатидилхолин (PC), глицерофосфохолин (GPC), фосфохолин и сфингомиелин на всеки хранителен продукт. Ежедневните приема на бетаин (продуктът на окисляване на холин) ще се изчисляват чрез умножаване на честотата на консумация и съдържанието на бетаин във всяка храна. Средният дневен прием ще се изчислява като средната дневна консумация на общ холин и бетаин през 3-те дни на диетичното припомняне.

Измервания на холинови метаболити: Свободен холин, бетаин и други производни на холина [напр. PC, GPC, лизофосфатидилхолин, диметилглицин, триметиламин оксид (TMAO)] ще се измерват в майчината плазма с помощта на течна хроматография (LC) -масова спектрометрия (MS)/MS, както беше проведено в предишни проучвания. За да се гарантира точността и възпроизводимостта на данните, при извличането ще бъдат използвани стандарти, обозначени със стабилни изотопи, всички проби ще бъдат количествено определени въз основа на стандартна крива от 6 точки и всяка проба ще бъде изпълнена в два екземпляра. Проби с коефициент на вариация (CV)% по-висок от 5% в рамките на изпълнение или 10% между изпълнението ще бъдат повторени.

Специфична цел 2: Определяне влиянието на MCS върху транспорта на макроелементи и епигенетичните модификации в плацентата и кръвта от пъпна връв. За да постигнат тази цел, изследователите ще определят експресията на транспортери на мазнини и глюкоза, както и регулиращите пътища нагоре по веригата AKT/mTOR в плацентарните биопсии от участниците. Изследователите ще измерват специфичното за мястото ДНК метилиране на ключови гени за растеж и метаболизъм в плацентата и пъпната кръв.

Анализи на маркери за транспортиране на макронутриенти в плацентарните биопсии: За да анализират как метаболизмът на холина може да бъде свързан с плацентарния транспорт на мазнини и глюкоза, изследователите ще използват PCR в реално време за количествено определяне на изобилието на иРНК от метаболитни гени и транспортери на глюкоза, като транспортери на глюкоза GLUT1 и GLUT3, свързани с метаболизма на мастните киселини гени липопротеинова липаза (LPL), транслоказа на мастни киселини (CD36), FATP и аминокиселинни транспортери SNAT2 и SNAT4. Изобилието на съответните протеини, както и фосфорилирането на AKT и mTOR целите 4EBP1 и S6K (показателни за активиране на пътя) също ще бъдат измерени чрез уестърн блотинг, който се провежда рутинно в лабораторията на съизследователя, който включва SDS-PAGE, мембранен трансфер, инкубация с антитела и визуализация с хемилуминесцентна образна система. Цялата ефективност на праймера и качеството на антителата ще бъдат тествани преди да бъдат използвани. Както PCR в реално време, така и Western blot ще се изпълняват в три екземпляра.

Епигенетична регулация на растежа и метаболизма: изследователите ще изследват специфично за мястото метилиране на ДНК на гени, които са публикувани в предишни проучвания като податливи на пренатална експозиция и посредничат за дългосрочен растеж и метаболитно програмиране на потомството, използвайки бисулфитно секвениране, както беше проведено преди . Накратко, геномната ДНК ще бъде обработена с бисулфитен реагент, след което целевата геномна област ще бъде усилена чрез PCR. За количествено определяне на метилирани последователности ще се използва система MassArray EpiTyper. Гените от интерес включват LEP, SREBP1C и PPARG, който медиира метаболизма на мазнините, IGF2, който насърчава растежа, освобождаващ кортикотропин хормон (CRH), който насърчава секрецията на кортизол, и глюкокортикоиден рецептор (GR), който получава сигнали за кортизол.