Роли Концептуализация, придобиване на финансиране, методология, писане - преглед и редактиране

полиненаситените

Отделение за ветеринарни предклинични науки, Факултет по ветеринарна медицина, Universiti Putra Малайзия, Serdang, Малайзия, Катедра по растителни науки и биотехнологии, Факултет по природни науки и биотехнологии, Университет Shahid Beheshti, Техеран, Иран

Отделение за ветеринарни предклинични науки, Факултет по ветеринарна медицина, Universiti Putra Малайзия, Serdang, Малайзия

Писане на роли - оригинален проект

Отделение за ветеринарни предклинични науки, Факултет по ветеринарна медицина, Universiti Putra Малайзия, Serdang, Малайзия, Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Tarbiat Modares, Техеран, Иран

Роли Формален анализ

Институт за тропическо земеделие, Университет Путра Малайзия, Серданг, Малайзия

Роли Куриране на данни, разследване

Институт за тропическо земеделие, Университет Путра Малайзия, Серданг, Малайзия

Софтуер за роли, валидиране

Катедра по принадлежност към науките за животните, Земеделски факултет, Университет Путра Малайзия, Серданг, Малайзия

Придобиване на финансиране на роли, надзор

Отделение за ветеринарни предклинични науки, Факултет по ветеринарна медицина, Universiti Putra Малайзия, Serdang, Малайзия, Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Tarbiat Modares, Техеран, Иран

Писане на роли - преглед и редактиране

Настоящ адрес: Институт по физиология и хигиена на животновъдството, Университет в Бон Каценбургвег 7–9, Бон, Германия

Отделение за селскостопанска, хранителна и хранителна наука към Университета на Алберта, Едмънтън, Канада

  • Махди Ебрахими,
  • Мохамед Али Раджьон,
  • Саид Джафари,
  • Мохамад Фаселех Джахроми,
  • Ehsan Oskoueian,
  • Авис Курни Сазили,
  • Йонг Мън Го,
  • Мортеза Хосейни Гафари

Корекция

12 септември 2019 г .: Ebrahimi M, Rajion MA, Jafari S, Faseleh Jahromi M, Oskoueian E, et al. (2019) Корекция: Ефекти от диетата н-6: н-3 съотношения на полиненаситени мастни киселини върху качеството на месото, характеристиките на кланичните трупове, профилите на мастните киселини в тъканите и експресията на липогенни гени при растящите кози. PLOS ONE 14 (9): e0222678. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0222678 Преглед на корекцията

Фигури

Резюме

Хуманно отношение към животните

Това проучване е проведено в Universiti Putra Malaysia съгласно насоките на изследователската политика на Universiti Putra Malaysia относно хуманното отношение към животните и етиката. Експерименталният протокол е одобрен от комитета по ползване и грижа за животните в Университет Путра в Малайзия. Грижите за експерименталните кози бяха в съответствие с малайзийските стандарти.

Животни, диети и управление

Процедури за клане и измерване на характеристиките на кланичните трупове

В края на 100-дневното изпитване всички животни бяха заклани чрез прерязване на гърлото в съответствие със стандартните процедури за клане, описани в MS 1500: 2004 (Департамент по стандартите Малайзия) в лабораторията за наука за месото, Катедра по животновъдни науки, Факултет на Селско стопанство, Universiti Putra Малайзия. Приблизително 150 g от LD мускула от 12-то до 15-то ребро бяха отстранени от трупа. Всички проби се съхраняват при -80 ° C, докато се анализират FA верига, качество на месото и антиоксидантна активност. След 24 часа се отбелязва охладеното тегло на кланичния труп, след което труповете се разделят на равни половини по средната линия с помощта на трион. Дясната половина се дисектира незабавно за вземане на проби от мускулите. Дясната половина на трупа беше оребрена между 12-то и 13-то ребро. Съответната дебелина на задната мазнина беше определена от този разрез с помощта на алуминиева линийка. Очната област на ребрата беше определена с помощта на софтуерен пакет Image J (Национален институт по здравеопазване, Bethesda, MD, САЩ).

Техниката на дисекция, използвана за измерване на мускулен, костен и мастен състав, е описана от Colomer-Rocher et al [18]. Дясната част от всеки труп беше претеглена и след това разделена на пет първични разфасовки, а именно врата, рамото, гърдите, кръста и крака, а разфасовките бяха претеглени и изразени като процент от общото тегло на трупа. Всеки разрез беше разчленен на компоненти от месо, кости, подкожна мазнина и междумускулна мазнина. Първо, мускулът беше индивидуално отстранен от тяхното закрепване и след това външната мазнина беше премахната. Мускулите, мазнините и костите се отделят и претеглят индивидуално.

Определяне на качеството на месото

РН на пробите от месо се измерва на 1, 3 и 6 дни след смъртта чрез поставяне на рН електрод, свързан с преносим рН метър (Hanna Instruments, Woonsocket, RI, USA), настроен да записва при 5 ° C.

Инструменталният цвят се измерва с помощта на система ColorFlex (Hunter Associates Laboratory, Reston, USA). Пробите бяха оценени за лекота (L *), зачервяване (a *), пожълтяване (b *), ъгъл на оттенъка (arctan, b */a *), който описва оттенъка или цвета на месото и изчисления индекс на насищане или наситеност като √ (a 2 + b 2), което описва яркостта или яркостта на цвета [19]. Всички стойности бяха определени от средната стойност на седем измервания на всеки мускул при 28 ± 2 ° C, използвайки 10˚ стандартен наблюдател. Преди да бъде използван спектроколориметърът беше стандартизиран, използвайки бели (L * = 100) и черни (L * = 0) стандартни плочки. Пробите се оставят да се размразят при 4 ° С за една нощ преди анализ. Пробите се поставят директно в цветния измервателен уред и се измерват. Три показания на стойностите L *, a * и b * и спектралното отражение (400–700 nm) бяха събрани от различни места на всяка проба и осреднени.

За да се определи загубата на капене, проби от приблизително 30 g, взети 24 часа, 3 дни и 6 дни след клането, се подрязват и претеглят. След това всяка проба се поставя в квадратна мрежа (25 cm 2) и се суспендира в напомпана пластмасова торба за 48 h при 4 ° C, без да се осъществява контакт с торбата, след което те се претеглят отново [19]. Загубата на капене се изчислява като процентно изменение на теглото [19]. Където; W1 е първоначалното тегло, W2 е теглото на суровата проба.

За определяне на загубата на готвене, пробите от месо се поставят в полиетиленови торбички и се поставят в баня с гореща вода (80 ° C), докато вътрешната температура (измерена с помощта на термометър с ръчна сонда; Hanna Instruments, Woonsocket, RI, USA) достигне 78 ° С. След това пробите от козе месо в торбите се охлаждат под чешмяна вода за 15 минути. Охладените проби бяха взети от полиетиленовата торбичка, изсушени с хартиени кърпи и претеглени. Загубата на готвене се изчислява чрез претеглянето им преди и след готвене [19]. Където; W2 е теглото на суровата проба, а W3 е крайното тегло.

Измерването на срязващата сила на Warner – Bratzler (WBS) беше извършено върху три ядра (диаметър 1,27 cm), отстранени от LD месото, успоредно на надлъжната ориентация на мускулните влакна. WBS се определя, като се използва А. HD плюс анализатор на текстура (Stable Micro System, Surrey, UK), снабден с устройство за остриета Warner Bratzler. Всяка сърцевина се поставя върху основната плоча на анализатора на текстурата и се срязва веднъж в центъра и перпендикулярно на надлъжната посока на влакната. Стойностите на срязващата сила на Warner-Bratzler се отчитат като средна стойност на всички основни стойности на всяка отделна проба. По-ниската стойност на сила на срязване (Нютон, N) показва по-крехко месо, докато по-високата сила на срязване показва по-твърдо месо.

Липидното окисление на проби от месо се измерва с помощта на реагиращи на тиобарбитуровата киселина вещества (TBARS) по метода на Lynch и Frei [20], модифициран от Mercier et al [21]. Проби от месо (1 g) се хомогенизират в 4 ml 0,15 M KCl + 0,1 тМ BHT с Ultraturrax (1 min, средна скорост). След хомогенизиране 200 μL от пробата се смесват с разтвор на TBRAS и след това се нагряват на водна баня при 95 ° С в продължение на 60 минути до развитието на розов цвят. След охлаждане към екстрактите се добавят 1 ml дестилирана вода и 3 ml n-бутилов алкохол и се завихря. Смесите се центрофугират при 5000 (rpm) в продължение на 10 минути. Абсорбцията на супернатантата беше отчетена срещу подходяща заготовка при 532 nm с помощта на спектрофотометър (Secomam, Domont, Франция). TBARS са изчислени от стандартна крива от 1, 1, 3, 3-тетраетоксипропан и изразени като mg малондиалдехид (MDA)/Kg проба.

Анализи на мастни киселини на експериментални диети и тъкан longissimus dorsi

Количествено определяне на PPAR на тъканите и експресия на SCD гени чрез полимеразна верижна реакция в реално време (PCR)

Веднага след клането, LD мускулът бързо се изрязва и бързо замразява в течен азот и се съхранява при -80 ° C до екстракция на РНК. Общата РНК беше извлечена от 100 mg замразена тъкан с помощта на мини кит RNeasy®lipid тъкан (Кат. № 74804, Qiagen, Hilden, Германия) и разграждането на DNase беше завършено по време на пречистването на РНК с помощта на RNAase-Free DNase set (Qiagen, Hilden, Германия) съгласно инструкциите на производителя. Общата чистота на РНК се определя от съотношението 260/280 nm на показанията на абсорбция, като се използва NanoDrop ND-1000 UV-Vis спектрофотометър (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA). Пречистената обща РНК (1 μg) беше обратно транскрибирана с помощта на комплект за обратна транскрипция Quantitect® (Qiagen, Hilden, Германия) в съответствие с препоръчаната от производителя процедура.

PCR в реално време се извършва с Bio-Rad CFX96 Touch (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA), като се използват оптични пластини с помощта на Quantifast® SYBR зелен PCR комплект (Кат. № 204054, Qiagen, Hilden, Германия). Последователностите на праймерите са показани в Таблица 3. В това проучване са използвани β-актин [23], PPARα, PPARγ и SCD [24].

Β-актинът се използва като референтен ген за нормализиране на тестваните гени. Всички праймери са закупени чрез 1-ва BASE олигонуклеотидна синтеза (1-ва база, Сингапур). Всяка реакция (20 µl) съдържа 8,5 µL SYBR зелена PCR смес, 1 µL кДНК, 1 µL всеки правен и обратен праймери и 8,5 µL вода без RNase. Целевите гени се амплифицират чрез следната програма за термоциклиране: 95 ° C за 10´, 40 PCR цикъла при 95 ° C за 30˝, 60 ° C за 20˝ и 72 ° C за 20˝. Флуоресценцията се измерва на всеки 15˝, за да се изгради кривата на топене.

Статистически анализ

Качество на месото

Цветът на месото на възраст (1, 3 и 6 дни) на LD мускула е представен в Таблица 5. Различните нива на хранителни съотношения n-6: n-3 PUFA в периода след смъртта са имали ефект върху L * (лекота ), a * стойност (зачервяване), b * стойности (пожълтяване), Chroma и ъгъл на нюанса на LD мускула. LD мускулният цвят беше по-светъл (по-висока L * стойност; P 0,05) стойностите a * и b * в същите дни от периода след смъртта. LR групата значително намалява L * в LD мускулите след 1 ден и с увеличаване на следкланичния период в сравнение с HR групата. Стойностите на наситеността или наситеността значително (P 0,05) от следкланичното или диетично лечение за всички групи на лечение.

РН на пробите от месо (таблица 6) на 1, 3 и 6 дни след смъртта е сходно за всички групи (P> 0,05). Процентите на загуба на капене в LD мускула в различните следкланични периоди са значително различни (P 0,05) по-ниски в сравнение с други лечения в различния следсмъртен период. Периодът на стареене значително (P Фиг. 1. Ефект на хранителните съотношения n-6: n-3 PUFA върху липидната окисленост на longissimus dorsi при козите.

LR: ниско съотношение n-6: n-3 PUFA (2.27: 1); MR: средно n-6: n-3 PUFA съотношение (5.01: 1); HR: високо съотношение n-6: n-3 PUFA (10,38: 1). Вертикалните ленти са стандартна грешка. x и y означават значителна разлика в рамките на деня след смъртта; a, b и c означават значителна разлика между дните след смъртта.

Ефект на диетичните съотношения n-6: n-3 PUFA върху съдържанието на FA в експериментални диети и тъкан на longissimus dorsi

Експресия на гени PPARα, PPARγ и SCD в мускула на longissimus dorsi

Фигури 2, 3 и 4 показват относителната генна експресия в LD мускула на кози, хранени с различни хранителни съотношения n-6: n-3 PUFA. Генът PPARα показа по-високо ниво на експресия в LR групата в сравнение с HR групата (P Фигура 2. Експресия на PPARα в LD мускулите на лекуваните групи в сравнение с HR групата.

Стойностите бяха нормализирани с домакински ген, β-актин. След това третираните проби се експресират по отношение на генната експресия на HR групата. Стойностите са средно ± 1 стандартна грешка. Стойностите, посочени с *, показват значителна разлика в сравнение с групата с HR (P Фигура 3. Експресия на PPARy в LD мускулите на лекуваните групи в сравнение с групата с HR.

Стойностите бяха нормализирани с домакински ген, β-актин. След това третираните проби се експресират по отношение на генната експресия на HR групата. Стойностите са средно ± 1 стандартна грешка. Стойностите, посочени с *, показват значителна разлика в сравнение с групата с HR (P Фигура 4. Експресия на SCD в LD мускулите на лекуваните групи в сравнение с групата с HR.