Етнофармакология

Редактиран от
Чеорл-Хо Ким

Департамент по биологични науки, Колеж по наука, Университет Сунгкюнкван, Южна Корея

Прегледан от
Уилям Чи-Шинг Тай

Хонконгски политехнически университет, Хонконг

Юнг Хюн Чой

Университет Dong-Eui, Южна Корея

Донг-Сун Лий

Университет Chosun, Южна Корея

Принадлежностите на редактора и рецензенти са най-новите, предоставени в техните профили за проучване на Loop и може да не отразяват тяхното положение по време на прегледа.

ефекти

  • Изтеглете статия
    • Изтеглете PDF
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • Допълнителни
      Материал
  • Цитат за износ
    • EndNote
    • Референтен мениджър
    • Прост ТЕКСТ файл
    • BibTex
СПОДЕЛИ НА

Оригинални изследвания СТАТИЯ

  • 1 отдел по клинична медицина, Корейски институт по източна медицина, Daejeon, Южна Корея
  • 2 Катедра по ориенталска невропсихиатрия, Колеж по корейска медицина, Daejeon University, Daejeon, Южна Корея
  • 3 Отдел за анализ на биоконвергенция, Корейски институт за основни науки, Daejeon, Южна Корея
  • 4 K-herb Research Center, Корейски институт по източна медицина, Daejeon, Южна Корея
  • 5 Лаборатория по молекулярна медицина, Колеж по корейска медицина, Daejeon University, Daejeon, Южна Корея

Въведение

Депресията е емоционално разстройство, свързано с различни симптоми, като нарушения на съня, хранителни разстройства и тревожност (Организация, 2009). Основното депресивно разстройство (MDD) се дефинира като запазване на депресивно настроение в продължение на поне 2 седмици или загуба на удоволствие или интерес към дейности, които обикновено се намират за приятни (Kessler et al., 2003). MDD има разпространение през целия живот около 15% -25% в световен мащаб и е сред най-високо класираните заболявания според класацията на Световната здравна организация (СЗО) за натоварване на болестите (Greenberg et al., 2003; Simon, 2003).

Методи

Подготовка на BTS

За стандартизиране на BTS като галоци и количествено са използвани галова киселина, генипозид, албифлорин, паеонифлорин, ликвиритин апиозид, ликвиритин, нодакенин, бензоена киселина, байкалин, wogonoside и глициризин. Количествен и качествен анализ на 11-те маркерни съединения в BTS беше проведен с помощта на оптимизиран HPLC-PDA метод. Всеки компонент в BTS беше идентифициран чрез сравняване на времето на задържане и UV спектъра с тези на всеки референтен стандарт. Времената на задържане и количествата на 11-те маркерни съединения в BTS са показани на допълнителна фигура 1.

Експерименти с животни

Седемседмични мъжки мишки C57BL/6 са закупени от Daehan Biolink Co. (Chungbuk, Корея). Експериментите с животни бяха проведени в съответствие с Ръководството за грижа и използване на лабораторни животни на Националния здравен институт (NIH) и одобрено от Институционалния комитет по грижа и употреба на животните в Корейския институт по ориенталска медицина (писмено одобрение номер: 17-049) Мишките бяха настанени в полипропиленови клетки, поддържани при стандартни условия при 12-часов цикъл светлина/тъмнина, 24 ± 0,5 ° C и 55 ± 5% влажност, с осигурена стандартна храна и вода. За да предизвикат депресия, мишките се аклиматизират в продължение на 1 седмица, преди да получат интраперитонеални (IP) инжекции на резерпин (0,5 mg/kg в PBS, съдържащи 0,1% диметил сулфоксид и 0,3% Tween-80) (Sigma-Aldrich, Сейнт Луис, МО, САЩ) веднъж на ден в продължение на 10 дни. Контролните мишки се инжектират с PBS, съдържащ 0,1% диметил сулфоксид и 0,3% Tween-80 без резерпин. Индуцираните от резерпин мишки бяха разделени на случаен принцип в пет групи (n = 6 на група) и орално третирани с PBS (група само с резерпин), 20 mg/kg флуоксетин (FXT) (Sigma-Aldrich) или 100, 300 или 500 mg/kg BTS. На контролните мишки се прилагат орални дози PBS. Експерименталните схеми, включително схемите за индукция на резерпин и схеми на приложение, са представени на фигура 1А.

Фигура 1 Ефекти на BTS върху развитието и свързаното с депресията поведение на индуцирана от резерпин депресия при мишки. На мишките се прилага перорално носител (PBS), BTS (100, 300 или 500 mg/kg) или флуоксетин (FXT, 20 mg/kg) за посочената продължителност на дневна база. (А) Графики за лечение с резерпин и перорално приложение за поведенчески експерименти. (Б) Телесно тегло и (° С) приемът на храна е измерен в посочените дни. (Д) Време за неподвижност в теста за принудително плуване (FST) и (E) изпитването за окачване на опашката (TST) и (F) общо разстояние на пътуване в теста на открито (OFT), измерено на ден 11. Данните са средни ± SD стойности (n = 6, еднопосочна ANOVA: # p ## p ### p 5/ml) са били предварително обработени с BTS и FXT за 1 h и след това се стимулира с LPS (100 ng/ml) за 24 h. Нивата на азотен оксид (NO) в супернатантата на културата бяха определени с помощта на комплект за откриване на NO (iNtRON Biotechnology, Seongnam, Корея), съгласно инструкциите на производителя.

Имуносорбентен анализ, свързан с ензими (ELISA)

Кръв от мишки се събира в епруветки, покрити с хепарин, под анестезия със Zoletil (25 mg/kg, Zoletil 50; Virbac, Cedex, Франция). За събиране на плазма пробите се центрофугират в продължение на 10 минути при 3000 об/мин при 4 ° С и супернатантата се прехвърля внимателно в нова епруветка. Плазмата се съхранява при -80 ° C преди употреба. Плазмените нива на миши кортикостерон (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA) бяха определени с помощта на ELISA комплекти, съгласно протоколите на производителя.

BV2 клетки (2 × 10 5/ml) бяха предварително обработени с BTS или FXT за 1 h и след това стимулирани с LPS (100 ng/ml) за 16 h. Нивата на IL-6, IL-1β, TNF-α и IL-10 в супернатантата на културата се определят с помощта на наличен в търговската мрежа комплект ELISA (R&D системи, Минеаполис, MN, САЩ), съгласно протоколите на производителя.

PCR в реално време

Общата РНК се изолира, като се използва реагент TRIzol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) и се извършва синтез на cDNA, като се използва реактивният комплект PrimeScript ™ RT (TaKaRa, Shiga, Япония). Нивата на иРНК на Il1b, Il6, Tnfa, Nos2, Cox2, Hmox1, и глицералдехид-3 фосфат дехидрогеназа (Gapdh) са количествено определени с помощта на 7500 PCR система в реално време (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) с Power SYBR® Green PCR Master Mix (Applied Biosystems) (Park et al., 2015). Последователностите на грундовете са изброени в таблица 1.

маса 1 Последователности на PCR праймерите в реално време.

Западно петно

Статистически анализ

Фигура 9 HO-1 медиира ефекта на BTS върху производството на NO и експресията на иРНК на провъзпалителни цитокини в BV2 клетки. (А) BV2 клетките бяха предварително обработени с BTS за 1 h в присъствието или отсъствието на SnPP (10 μM) и след това стимулирани с LPS (100 ng/ml) за 24 h. Нивата на NO в супернатантата на клетъчната култура се измерват чрез комплект за откриване на NO. (B – F) BV2 клетките са предварително обработени с BTS за 1 h в присъствието или отсъствието на SnPP (10 μM) и след това се стимулират с LPS (100 ng/ml) за 6 h. Нива на (Б) Nos2, (° С) Cox2, (Д) Il6, (E) Il1b, и (F) Tnfa иРНК се определят чрез PCR в реално време. Gapdh е използван като контрол на натоварването. Данните представляват средната стойност ± SD на трикратни определяния (еднопосочен ANOVA: ### p †† p ††† p Ключови думи: резерпин, депресия, Bangpungtongsung-san, антидепресант, анти-невровъзпаление, невропротекция, BV2, микроглия

Цитиране: Park B-K, Kim NS, Kim YR, Yang C, Jung IC, Jang I-S, Seo C-S, Choi JJ и Lee MY (2020) Антидепресанти и анти-невро-възпалителни ефекти на Bangpungtongsung-San. Отпред. Pharmacol. 11: 958. doi: 10.3389/fphar.2020.00958

Получено: 10 април 2019 г .; Приет: 11 юни 2020 г .;
Публикувано: 10 юли 2020 г.

Cheorl-Ho Kim, Sungkyunkwan University, Южна Корея

Уилям Чи-Шинг Тай, Хонконгски политехнически университет, Хонг Конг
Yung Hyun Choi, Университет Dong-Eui, Южна Корея
Донг Сун Лий, Университет Чосун, Южна Корея