Откриване на NAD + и неговите основни междинни продукти чрез 1 H NMR спектроскопия. (А) Структури на NAD + и неговите основни междинни продукти. (Б) Схематичен преглед на биосинтетичните пътища на никотинамид аденин динуклеотид (фосфат) NAD (P) при хора. (С) 700 MHz 1Н NMR спектри на NAD + и неговите основни междинни продукти. Показват се само сигнали, използвани за анализ. Метаболитите се разтварят в 50 mM натриев фосфатен буфер в D2O (рН 6.5). 1 mM захароза беше използвана като референтна стойност на химичното изместване (δ (1Н), 5.42 ppm) и вътрешен стандарт за количествено определяне.

Откриване на NAD + и неговите основни междинни продукти в екстракти от човешки клетки. Протонен ядрено-магнитен резонансен спектър на клетъчен екстракт, получен от клетки HEK293, култивирани в присъствието на Nam. Разширява се спектралната област, съдържаща пикове, съответстващи на NAD + и неговите основни междинни продукти. Броят на сканиранията (nt) е 8192.

Откриване на дезамидирани NAD + междинни продукти в екстракти от човешки клетки. Характерен регион на 1Н NMR спектър на клетъчен екстракт, получен от клетки HEK293, култивирани в присъствието на Nam, NR и NAR. Спектърът на горния панел представлява 10 пъти увеличен вертикално спектър на долния панел. nt = 8192.

Откриване на 1-MNA в екстракти от човешки клетки. Характерен регион на 1Н NMR спектър на клетъчен екстракт, получен от HeLa клетки, култивирани в присъствието на Nam. nt = 416.

Откриване на NAD + междинни продукти в среда за клетъчна култура. Протонният ядрено-магнитен резонансен спектър на модифицираната среда на Dulbecco's Eagle’s Medium (DMEM), допълнен с 10% фетален говежди серум, съдържа Нам като единствен предшественик NAD +. Разширяват се две спектрални области, съдържащи пикове, съответстващи на междинните продукти NAD +. Звездичките обозначават неидентифицирани върхове. nt = 256.

Резюме

ijms

Откриване на NAD + и неговите основни междинни продукти чрез 1 H NMR спектроскопия. (А) Структури на NAD + и неговите основни междинни продукти. (Б) Схематичен преглед на биосинтетичните пътища на никотинамид аденин динуклеотид (фосфат) NAD (P) при хора. (С) 700 MHz 1Н NMR спектри на NAD + и неговите основни междинни продукти. Показват се само сигнали, използвани за анализ. Метаболитите се разтварят в 50 mM натриев фосфатен буфер в D2O (рН 6.5). 1 mM захароза беше използвана като референтна стойност на химичното изместване (δ (1Н), 5.42 ppm) и вътрешен стандарт за количествено определяне.

Откриване на NAD + и неговите основни междинни продукти в екстракти от човешки клетки. Протонен ядрено-магнитен резонансен спектър на клетъчен екстракт, получен от клетки HEK293, култивирани в присъствието на Nam. Разширява се спектралната област, съдържаща пикове, съответстващи на NAD + и неговите основни междинни продукти. Броят на сканиранията (nt) е 8192.

Откриване на дезамидирани NAD + междинни продукти в екстракти от човешки клетки. Характерен регион на 1Н NMR спектър на клетъчен екстракт, получен от HEK293 клетки, култивирани в присъствието на Nam, NR и NAR. Спектърът на горния панел представлява 10 пъти увеличен вертикално спектър на долния панел. nt = 8192.

Откриване на 1-MNA в екстракти от човешки клетки. Характерен регион на 1Н NMR спектър на клетъчен екстракт, получен от HeLa клетки, култивирани в присъствието на Nam. nt = 416.

Откриване на NAD + междинни продукти в среда за клетъчна култура. Протонният ядрено-магнитен резонансен спектър на модифицираната среда на Dulbecco's Eagle’s Medium (DMEM), допълнен с 10% фетален говежди серум, съдържа Нам като единствен предшественик NAD +. Разширяват се две спектрални области, съдържащи пикове, съответстващи на междинните съединения NAD +. Звездичките обозначават неидентифицирани върхове. nt = 256.