: Дозозависим ефект на PHA върху освобождаването на CCK от изолирани чревни лигавични клетки на плъхове (n = 6–12; p, 30 Механизмът на този PHA ефект е неизвестен. Доказано е, че PHA индуцира свръхрастеж на бактерии.31 Плъхове без микроби не показват този токсичен ефект на PHA предполага, че неговата токсичност зависи от наличието на бактерии в червата

червен

За нашите експерименти използвахме дневен прием от 42 mg силно пречистени изолектини, които не съдържаха фибри или инхибитори на трипсин/амилаза, присъстващи в суровия екстракт. По време на експеримента няма данни за лимфоцитна инфилтрация в дванадесетопръстника или панкреаса или каквито и да е увреждания на ворсините; промени на микровилозно ниво не могат да бъдат изключени. Плъховете, предизвикани с единичен болус от 300 mg пулверизирани сурови зърна, оценени чрез електронна микроскопия, показват намаляване на цялата дължина на вилите и везикулация и скъсяване на микровилите.33 За разлика от това, използвайки пречистена PHA, Bardocz et al установяват забележимо увеличение във височина на вилуса след излагане на 42 mg пречистен PHA в продължение на три дни

PHA значително стимулира растежа на тънките черва чрез независим от CCK механизъм и хипертрофия на панкреаса чрез CCK зависим механизъм, тъй като антагонистът на CCK-A рецептора MK 329 значително инхибира индуцирания от PHA панкреатичен, но не и чревен растеж. MK 329 (или L-364718) - производно на бензодиазепин - е силно мощен периферен антагонист на CCK-A рецептор, който може да се прилага както интравенозно, така и перорално.35 Получихме 72% инхибиране на PHA стимулиран растеж на панкреаса, използвайки 20 μg MK 329 в диета; това е в добро съгласие с резултатите, докладвани от Schmidt et al, които показват, че MK 329 в доза от 0,1 mg/kg, дадена чрез сондаж, намалява трофичния ефект на церулеина върху мокрото тегло на панкреаса с 50–60%, докато 1 mg/kg MK 329 почти напълно инхибира индуцирания от церулеин трофичен ефект.35

В допълнение към ефекта на PHA in vivo, ние показахме, че PHA директно и в зависимост от дозата освобождава CCK от изолирани чревни лигавични клетки in vitro. В тази система е показано, че освобождаването на CCK се предизвиква от краткотрайно излагане на деполяризиращи концентрации на KCl и калциев йонофор A23187.24. Механизмът на индуцирано от лектин CCK освобождаване от CCK клетките в червата е неизвестен. Предполагаме, че лектините - чрез свързване към гликозиловите странични вериги на канали с напрежение - могат да повлияят на тяхната активност.

Banwell et al изследват ефекта на PHA върху растежа на тънките черва при контролни и без зародиши плъхове.14 Те показват директен хиперпластичен отговор на тънките чревни епителни клетки без влияние на каквито и да било бактерии. Чревната флора обаче усилва растежния ефект на PHA върху тънките черва, което може да бъде частично блокирано при тяхното изследване чрез перорални антибиотици. Няма промени в тъканното съдържание и плазмените нива на гастрин, ентероглюкагон, глюкагон и пептид YY, което показва, че тези пептиди не са медиирали трофичния отговор на тънките черва към PHA. Наскоро Bardocz et al 34 съобщават, че еднократна доза PHA, подавана чрез сондаж на плъхове, временно понижава плазмените нива на инсулин. Храненето с диета с боб в продължение на 10 дни понижава съдържанието на инсулин в панкреаса по неизвестен механизъм. Доказано е обаче, че инсулинът има трофичен ефект върху панкреаса37 и червата.38, 39 Следователно наблюдаваното стимулиране на растежа на панкреаса и тънките черва се медиира от други механизми и медиатори.

Полиамините играят основна роля в растежа на стомашно-чревната лигавица и панкреаса.40-42 Натрупването на полиамин е демонстрирано при PHA стимулиран растеж на тънките черва и панкреаса.13, 43 И в двата органа активността на орнитин декарбоксилазата, първият ензим на де sinteza novo и стъпката за ограничаване на скоростта, е била леко или изобщо не повишена по време на PHA лечение. Следователно полиамините трябва да бъдат получени от лумена за растеж на тънките черва40 или чрез пътя на полиаминовата конверсия и/или поглъщане на полиамин от циркулацията за растеж на панкреаса.44 Бактериалната микрофлора допринася за снабдяването с луминални полиамини; това обяснява констатациите от предишни проучвания, че при животни без микроби или при животни, лекувани с антибиотици, PHA има по-малък ефект.

CCK е мощен стимулатор на растежа на панкреаса, 16 но неговото значение като регулатор на растежа на тънките черва е неясно. При кучета и плъхове с общо парентерално хранене инфузиите на CCK предотвратяват атрофия на лигавицата45, 46; други проучвания обаче не могат да покажат трофичен ефект на CCK върху лигавицата на тънките черва.47-49 В нашето проучване антагонистът на CCK-A рецептора MK 329 не инхибира PHA стимулиран растеж на тънките черва, докато антагонистът блокира ефекта на PHA върху растежа на панкреаса. Тези открития предполагат, че PHA има независим от CCK ефект, стимулиращ растежа върху тънките черва. Лектините са в състояние, например, да стимулират директно пролиферацията на клетките на дебелото черво. 50, 51

CCK-A рецепторният антагонист MK 329 допълнително стимулира плазмените нива на CCK, с изключение на контролната диета. Базалните плазмени нива на CCK не се усилват и само леко се повишават при по-висока концентрация от антагониста на CCK-A рецептора при хора.52 Освен това локсиглумидът, друг мощен антагонист на CCK рецептора, не повишава базалните плазмени нива на CCK. 53-55 плазмените нива от CCK-A рецепторния антагонист се появяват само в стимулирано състояние. Liddle et al 52 предполагат, че антагонистът предизвиква пълна блокада на панкреатичните CCK-A рецептори, което води до намалена панкреатична секреция и концентрация на дуоденална протеаза, което от своя страна предизвиква освобождаване на CCK. Schmidt et al 56 предлагат отрицателен контрол на обратната връзка с къс цикъл на освобождаване на CCK, чрез който CCK инхибира собствената си секреция или чрез потискане на жлъчната секреция при хората. Лакталбуминът не стимулира освобождаването на CCK; следователно антагонистът на CCK-A рецептора не повишава допълнително плазмените нива на CCK.

ППИ е използвана като вътрешен положителен контрол в нашето проучване. Това няма ефект върху растежа на тънките черва, но стимулира пролиферацията на панкреаса. Стимулацията беше блокирана от CCK-A рецепторния антагонист MK 329, показващ CCK зависим механизъм. Не измерихме повишени плазмени нива на CCK само чрез STI, само в комбинация с CCK рецепторния антагонист. Green et al съобщават, че плазмените нива на CCK са повишени при остро излагане на ППИ и след това постепенно намаляват по време на хронично излагане в зависимост от съдържанието на протеини в диетата.57 Причината да не открием значително повишени нива на CCK, индуцирани от STI, може да се дължи времето на вземане на кръвни проби и количеството ППИ и хранителните протеини, използвани в това проучване.

В заключение, нашите резултати показват, че PHA стимулира растежа на тънките черва чрез CCK независим механизъм. За разлика от това, PHA освобождава CCK от лигавицата на дванадесетопръстника, което от своя страна стимулира растежа на панкреаса.

Благодарности

Това разследване беше подкрепено отчасти от DAAD (313-ARC VI), DFG (He 1965/1-3) и от Шотландския офис, отдел „Земеделие, околна среда и рибарство“ (SOAEFD). Изследването беше представено частично на 95-та годишна среща на Американската гастроентерологична асоциация, 1995 г., в Сан Диего, Калифорния. Авторите благодарят на Корнелия Уилгус за отлична техническа помощ.