РЕЗЮМЕ

Дългосрочната антибиотична терапия е един от основните рискови фактори за микоза. Съотношението d -arabinitol/l -arabinitol (d -/l -ARA) в урината (биомаркер на няколко вида Candida) се определя чрез газова хроматография с детектор за улавяне на електрони в проби от 51 бебета, подложени на продължителна антибиотична терапия. Въпреки че 47 от тези деца са имали по-високи съотношения d -/l -ARA от здравите контроли (P d -/l -AR съотношението на d -Арабинитол е характерен основен метаболит на няколко вида Candida (2). D -арабинитолът/l - съотношението арабинитол (d -/l -ARA) в урината може бързо да се определи чрез газова хроматография като биомаркер на кандидоза (15). В предишно проучване определихме проби от съотношението d -/l -ARA в урината от здрави деца, показващи че намалява с възрастта и че стойност от 3,6 (средно + 2 стандартни отклонения [SD]) е горната граница на нормалните стойности за групата на възраст от 0 до 1 година (19). В това проучване докладваме за съотношения d -/l -ARA в урината и техните промени в група високорискови бебета, подложени на продължителна антибиотична терапия.

d-арабинитол-арабинитол

Анализите се извършват с проби от урина. Пробите от около 1 до 2 ml урина се събират и обикновено се анализират непосредствено след вземането на проби. Ако е необходимо, те се съхраняват при -20 ° C до анализ. d -/l -ARA съотношенията бяха определени като трифлуороцетни производни чрез газова хроматография с детектор за улавяне на електрони (19). Методът BacT/Alert е използван за кръвни култури. Candida се култивира върху агар Sabouraud от проби от кръв, урина и тампони от лигавица. Серумът от всяко дете е тестван за Candida антиген с теста Pastorex Candida и за антитела срещу Candida mannan с имунофлуоресцентен IFp тест (който използва белязан с флуоресцеин анти-имуноглобулин G човешки глобулин) (4).

Нормалността на променливите разпределения беше проверена чрез тестовете на Kolmogorow-Smirnow и Shapiro-Wilk. Резултатите са представени като средства със стандартни отклонения. Резултатите преди и след лечение в една група бяха сравнени чрез използване на t тест на Student за зависими проби. Разликите между три групи бяха установени с помощта на анализ на дисперсионния тест на Крускал-Уолис (поради нехомогенни дисперсии резултатите бяха проверени чрез теста на Левен). Извършен е дискриминационен анализ, за ​​да се определи дали съотношението d -/l -ARA може да се използва за класифициране на изследваните групи.

Антибиотичната терапия е първият рисков фактор, свързан с гъбични инфекции. Samonis et al. показа, че използването на широкоспектърни антибиотици увеличава колонизацията на стомашно-чревния тракт от дрожди подобни гъбични клетки (16). Широкото използване на широкоспектърни антибиотици до голяма степен допринесе за повишената честота на гъбични инфекции.

В нашето проучване се установи, че съотношенията d -/l -ARA в подгрупата на деца след продължителна антибиотична терапия, които не показват симптоми на системна инфекция (група А), са по-високи, отколкото в контролната група (С). Два различни метода на статистически анализ, т.е. сравнения между групите и дискриминантни анализи, потвърдиха, че съотношенията d -/1 -ARA са по-високи след продължителна антибиотична терапия. Това откритие е в съгласие с резултатите от проучвания върху животни, при които също са установени повишени съотношения d -/l -ARA след приложение на антибиотик (21).

В по-ранно проучване установихме, че съотношението d -/l -ARA намалява експоненциално при здрави деца с възрастта. Най-високи стойности са открити в групата с най-малките деца (кърмачета на възраст от 0 до 1 година) (19). Изследваната група в настоящия доклад беше група бебета в същия възрастов диапазон.

В проучвания с плъхове, Wong et al. заключи, че нивото на d -арабинитол се е повишило, защото групата бактерии, способни да го метаболизират, е намаляла (21). От друга страна, беше показано, че опортюнистичната Pseudomonas aeruginosa деактивира нишките на Candida albicans и убива гъбичките (5). Вероятно намаляването на групата бактериални антагонисти до Candida е един от механизмите, чрез който антибиотиците нарушават баланса между бактериите и гъбите, което позволява на Candida albicans да се развие и следователно води до увеличаване на съотношението d -/l -ARA. Когато прилагахме флуконазол като профилактика при кърмачета, наблюдаваме намаляване на нивото на този биомаркер (непубликувани данни).

В настоящото проучване три от четири деца с над нормални съотношения d -/l -ARA (подгрупа В) не са имали микробиологично потвърдена инвазивна кандидоза; обаче за всички тях продължителността на антибиотичната терапия е по-голяма от средната в подгрупа А (съответно 51 и 32 дни). Децата в подгрупа Б са имали тежки вродени малформации (или вътрематочна дистрофия [пациент 4]) и следователно са принадлежали към рискови групи за инвазивна кандидоза (7, 12). Три от децата в подгрупа Б са хоспитализирани в реанимацията (2 до 4 седмици).

Емпиричната противогъбична терапия е избор на лечение в светлината на многобройните диагностични трудности и висока смъртност (14). Въпреки това, нито едно от децата (групи А и В) не е получило емпирично системно противогъбично лечение (само перорален нистатин, който не се абсорбира от стомашно-чревния тракт) едновременно с антибиотична терапия преди определяне на d -/l -ARA съотношения. Въз основа на клиничното представяне, отчитането на рисковите фактори и анализа на газова хроматография, децата от група В са получавали флуконазол. нивата на d -/l -ARA се нормализират и клиничното им състояние се подобрява, което подкрепя клиничното съмнение за инфекция с Candida, въпреки че не е микробиологично потвърдено. Подобни резултати при новородени са представени от Sigmundsdóttir et al. (17). Ако се приеме, че трима от новородените с повишено съотношение d -/l -ARA (т.е. стойност, по-висока от границата в подгрупа Б), представляваща 5,9% от цялата изследвана група, са имали инвазивна кандидоза (13, 17), това предполага, че дългосрочната антибиотична терапия трябва да продължи да се разглежда като високорисков фактор, особено след като всички деца са родени в срок, тежат най-малко 2400 g и са получили перорален нистатин по време на антибиотична терапия.

В ретроспективно проучване Rabalais et al. (12) съобщават, че при деца с тегло при раждане> 2500 g, лекувани в интензивни отделения (основният рисков фактор), честотата на гъбични инфекции, идентифицирани чрез културни методи, е 0,6%. В това проучване средната продължителност на антибиотичната терапия е била 28,1 дни (диапазон от 7 до 84 дни); в нашето проучване тази средна стойност е била приблизително една седмица по-дълга, 35,4 дни (диапазон, 21 до 85 дни). Трябва да се отбележи, че двете деца с мукокуларна колонизация са имали d -/l -ARA съотношения под патологичните граници, което силно подкрепя заключението ни, че колонизацията не изключва използването на d -/l -ARA съотношения като маркер за инвазивна кандидоза ( 21) или на устна или вагинална кандидоза и кандидурия (6).

Лечението с флуконазол при две деца е наблюдавано и резултатите показват, че съотношенията d -/l -ARA корелират добре с клиничното състояние на пациентите, отразявайки ефекта от лечението (Фиг. 2). Инфекциите с Candida са свързани с висока смъртност, особено при деца с съотношение d -/l -ARA в проби от урина от бебета в риск. Определените съотношения d -/l -ARA корелират добре с клиничните резултати и резултатите от лечението на пациентите. Предвид известните трудности при бързото потвърждаване на системната гъбична инфекция при кърмачета чрез изследване на култура и антитела, наблюдението на съотношенията d -/l -ARA изглежда ценна помощ за лекаря при ръководене на решения за въвеждане на системно противогъбично лечение. Данните от голям брой пациенти, за предпочитане от многобройни центрове, подкрепени с резултати от култури, ще покажат дали съотношенията d -/l -ARA могат да бъдат така необходимия бърз лабораторен метод за диагностициране на системна гъбична инфекция.