научна статия

  • Пълен член
  • Цифри и данни
  • Препратки
  • Цитати
  • Метрика
  • Препечатки и разрешения
  • PDF

Резюме

Въведение

Уролитиазата е третото най-често срещано разстройство на пикочните пътища. Общодумната честота на уролитиаза е доста висока и в Северна Индия над 80% от уринарните калкули са само калциево-оксалатни камъни или калциев оксалат, смесен с калциев фосфат (Mitra et al., 1998). Хипероксалурията е основният иницииращ фактор за болестта на човешкия идиопатичен калциев оксалат (CaOx). Оксалатът е мощен фактор, задвижващ кристализацията, присъстващ в урината, задържането на който засилва увреждането на клетките и причинява ранни етапи на литогенеза (Kumar et al., 2002). Въпреки огромния напредък в областта на медицината, няма наистина задоволително лекарство за лечение на бъбречни камъни.

антиуролитичен

От друга страна, фитомедицините предлагат алтернативен източник на терапия за много заболявания и също така предоставят допълнителна информация за патогенезата на болестите. Съобщава се, че растенията от рода Crataeva имат антиуролитична активност (Anand et al., 1995). Поради това се смяташе за полезно да се изследва един от видовете, Crataeva adansonii. DC., За неговата антиуролитична активност при плъхове.

Crataeva adansonii. е тропическо дърво, което расте до 5–10 m височина. Тези дървета са широко разпространени в цяла Индия, Бирма и Цейлон. Традиционно корите, листата, цветята и кората се използват заради техните лечебни свойства.

В системата Yunani кората се споменава, за да повиши апетита, да намали секрецията на жлъчка и храчки и да премахне нарушенията на пикочните органи. Традиционно в Индия кората е полезна в някои случаи на пикочни оплаквания и треска и при някои леки форми на кожни заболявания. Въпреки че кората на Crataeva adansonii. се съобщава за лечение на уролитиаза във фолклорната литература (Nadkarni, 1982), няма публикувани фармакологични данни за Crataeva adansonii. за потенциалната му антиуролитична активност. Целта на настоящото проучване беше да се изследва ефектът на екстракта от петролен етер на кората на стъблото на Crataeva adansonii. за антиуролитична активност върху експериментално индуцирана уролитиаза при плъхове.

Материали и методи

Растителни материали и процедура на екстракция

Кората на стъблото на Crataeva adansonii. е закупен от местен пазар и е удостоверен в изследователския институт Agharkar (Пуна, Индия). Грубо прахообразна изсушена на сянка кора (350 g) се екстрахира с петролев етер (60–80 °) с помощта на апарат на Сокслет. Процесът на екстракция се повтаря и получените екстракти се обединяват и дестилират, за да се възстановят разтворителите. Последните следи от разтворители от екстрактите бяха отстранени под вакуум. Така полученият екстракт от петролев етер е със зеленикав цвят и получения добив е около 0,3%.

Химикали и апарати

Комплектът за оценка на креатинин (метод на Jaffe) и пикочна киселина (метод на уриказа) е закупен от Accurex Biomedical Pvt Ltd. (Мумбай, Индия). Цинкова тел и натриев оксалат са закупени от S.D. Fine Chemicals Limited (Мумбай, Индия). Cystone (съдържа екстракти shilapushpa 130 mg, pashanbheda 98 mg, manjishtha 32 mg, nagarmustha 32 mg, apamarga 32 mg, gojiha 32 mg, sahadevi 32 mg и прахове hajrul yahood bhasma 32 mg, shilajeet 26 mg) е закупен от Himalaya Herbal Healthcare (Банглор, Индия).

Експериментален дизайн

Животни

Мъжки плъхове Wistar (200–250 g) са закупени от Националния токсикологичен център (Пуна, Индия). Те се поддържат при температура 25 ± 1 ° C и относителна влажност от 45% до 55% при 12-часов светлинен и 12-часов тъмен цикъл. Животните имаха свободен достъп до хранителни гранули (Chakan Oil Mills, Пуна, Индия) и вода. Експерименталните протоколи бяха одобрени от Институционалния комитет по етика на животните (IAEC) на фармацевтичния колеж Poona (Пуна, Индия) и бяха в съответствие с насоките на Комитета за контрол и надзор върху експериментите върху животни (CPCSEA). Експериментите са проведени между 0900 и 1600 часа.

Антиуролитична активност

Индуциран от натриев оксалат уролитиатен модел при плъхове е използван за оценка на ефекта от екстракта от петролен етер Crataeva adansonii. Изследването е предназначено да открие ефекта на екстракта от петролев етер на Crataeva adansonii. за профилактична и терапевтична употреба срещу индуцирана от натриев оксалат уролитиаза. Групите са разделени както следва:

Профилактични групи (медикаментозно лечение в продължение на 7 дни заедно с натриев оксалат)

Физиологичен разтвор от група I (1 ml/kg)

Група II Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.)

Група III Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + Tween 80 (1% v/v)

Група IV Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + екстракт от петролев етер (50 mg/kg, p.o.)

Група V Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + екстракт от петролев етер (100 mg/kg, p.o.)

Група VI Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + цистон (500 mg/kg, p.o.)

Терапевтични групи (медикаментозно лечение в продължение на 8–14 дни след лечение с натриев оксалат)

Физиологичен разтвор на група VII (1 ml/kg)

Група VIII Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.)

Група IX Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + Tween 80 (1% v/v)

Група X Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + екстракт от петролев етер (50 mg/kg, p.o.)

Група XI Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + екстракт от петролев етер (100 mg/kg, p.o.)

Група XII Натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.) + Cystone (500 mg/kg, p.o.)

Всички плъхове бяха настанени в метаболитни клетки поотделно за цялото време на експеримента. Урината на всеки плъх се събира на 7-ия и 14-ия ден след 6 часа инжектиране на натриев оксалат с тимол като консервант. Профилактичните групи и терапевтичните групи бяха жертвани съответно на 7-ия и 14-ия ден. Десният бъбрек беше изследван за наличие на кристали калциев оксалат и образуване на камъни по хистологични техники. Левите бъбреци на три животни се хомогенизират с Tris буфер (0,605 g Tris в 30 ml H2O + 0,33 ml конц. HCl, разреден до 100 ml с вода) и хомогенатът след центрофугиране при 4000 rpm се използва за определяне на концентрацията на калций оксалат в бъбреците. Левите бъбреци на останалите три животни и черния дроб на всичките шест животни от съответната група бяха перфузирани с KCl и хомогенизирани с разтвор на KCl (0,15 М). Полученият хомогенат след центрофугиране при 7000 rpm се използва за изследване на липидния пероксиден ефект.

Качественото отлагане на кристали е класифицирано като степен 0, без отлагане на кристали; степен 1, леко отлагане на кристали; степен 2, умерено отлагане на кристали; и степен 3, по-голямо количество кристали калциев оксалат в бъбреците.

Параметри

Електролитите в серума и урината (натрий, калий, хлорид) се определят с електролитен анализатор (Biolyte 2000, Тайван), а серумът/урината креатинин и пикочна киселина се определят с помощта на автоанализатор (Secomam). Концентрацията на оксалат в урината и бъбреците се определя по метода на Hodgkins and Williams (1972). Нивото на липидния пероксид в черния дроб и бъбреците се определя по метода на Sreejayan et al. (1994) и Ohkawa (1979). РН на урината се определя с рН метър (модел EQ-614).

Статистически анализ

Стойностите са представени като средна стойност ± SEM. Статистическата значимост между средните стойности беше анализирана с помощта на еднопосочен дисперсионен анализ (ANOVA), последван от тест на Tukey. p Антиуролитичен ефект на екстракта от петролен етер Стъбна кора от Crataeva adansonii. в Плъхове

Публикувано онлайн:

маса 1 Ефект от екстракта от петролев етер на Crataeva adansonii. върху параметрите на урината на плъхове, интоксикирани с натриев оксалат.

Инжектирането на натриев оксалат (7 mg/100 g, ip, веднъж дневно в продължение на 7 дни) при плъхове повишава значително нивото на оксалат в урината значително в сравнение с групата, третирана с физиологичен разтвор (1 ml/kg, ip), което показва образуване на индуциран от натриев оксалат литиаза. Няма значителна промяна в нивото на оксалат в урината в групата, лекувана с носител, в сравнение с групата, лекувана с натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.). Екстрактът от петролев етер (50 и 100 mg/kg) и цистонът (500 mg/kg) показват значително (p Антиуролитично действие на стъблото на екстракта от петролен етер Crataeva adansonii. в Плъхове

Публикувано онлайн:

Таблица 2 Ефект от екстракта от петролев етер на Crataeva adansonii. за нивото на липидния пероксид в черния дроб и бъбреците на плъхове, лекувани с натриев оксалат.

Дозозависимо инхибиране на нивото на липидния пероксид се наблюдава през инвитро. проучване, което беше максимум при 500 µg екстракт от петролев етер от Crataeva adansonii. както в чернодробния, така и в бъбречния хомогенат (непубликувани данни).

Оценка на калциев оксалат

След прилагане на натриев оксалат (7 mg/100 g, i.p.), нивото на калциевия оксалат е значително (p Антиуролитичен ефект на кора от стволови екстракти от петролен етер от Crataeva adansonii. в Плъхове

Публикувано онлайн:

Таблица 3 Ефект на екстракта от петролев етер върху съдържанието и отлагането на калциев оксалат в бъбреците на плъхове.

Параметри на клиничната химия на серума

Не се наблюдава значителна промяна в серумните нива на натрий, хлорид и пикочна киселина. Екстрактът от петролев етер (50 и 100 mg/kg) и цистон (500 mg/kg) показват значителни (р 1995). Различни експериментални процедури водят до основно два вида хипероксалурия: (1) остра, когато плъхът е предизвикан от единична, голяма доза литоген, (2) хронична, когато плъхът е непрекъснато предизвикан с обикновено малки дози литоген за период от време. Хипероксалурията се измерва чрез определяне на оксалат в урината, а отлагането на кристали в бъбреците се потвърждава чрез изследване на парафинови разрези на бъбреците (Khan et al., 1991).

В настоящото ни изследване използвахме модел на хипороксалурия, индуциран от NaOx (7 mg/kg, i.p. в продължение на 7 дни) за бърз скрининг. Експерименталното индуциране на хипероксалурия води до бързо образуване на кристали на калкула оксалат в бъбречните тубули на опитни животни. Основната причина за това моментно образуване на кристали след предизвикване на натриев оксалат е бързото увеличаване на отделянето на оксалат с урината. Скоростта, с която кристалите се появяват в бъбречните тубули, е показателна за ефективността на транспортирането на този добавен оксалат до бъбреците и евентуалното му отделяне с урината. След приложение на NaOx, кристалното отлагане първо достига в кората, след това в медулата и след това в бъбречните тубули (Khan et al., 1982). Резултатите от приложението на оксалати в това проучване потвърждават хистологичните открития за връзка между количествата отлагане на калциев оксалат.

В това проучване са използвани полуколичествен анализ (микроскопична система за точкуване) и количествен анализ (химичен анализ за определяне на калциев оксалат в бъбреците) на кристалните отлагания за сравняване на тежестта на отлагането на калциев оксалат в бъбреците сред различни групи на изследване. Прилагането на NaOx при плъхове намалява обема на урината и рН показва пренасищане на урината и развива значително отлагане на калциев оксалат в бъбреците. Тежестта на отлагането на микроскопични бъбречни кристали корелира добре с концентрацията на калкулиран оксалат в бъбреците (Fan et al., 1999).

След третиране с екстракт от петролев етер (50 mg/kg и 100 mg/kg) и цистон (500 mg/kg), увеличаването на обема на урината, екскрецията на натрий, хлорид и рН доказа своя благоприятен ефект за предотвратяване на образуването на камъни поради пренасищане на тези литогенни вещества.

Екстрактът от петролев етер на Crataeva adansonii. и цистонът показва значително намаляване на концентрацията на калциев оксалат в бъбреците. Определянето на оксалат в бъбречните секции (хистология) потвърждава връзката между количеството отлагане на калциев оксалат и приложението на натриев оксалат.

Появата на калциев оксалатен кристал в бъбречните тубули след инжектиране на NaOx е свързана с некроза на тубуларни клетки, което води до излагане на тубулна базална ламина и образуване на луминални клетъчни остатъци. Кристалите калциев оксалат наистина предизвикват цитолиза на полиморфноядрени левкоцити след фагоцитоза. Кристалните агрегати могат да бъдат разрушителни за бъбречния епител, тъй като са големи и неправилни и механично разрушават епитела (Khan et al., 1982).

Лечението с екстракта значително (p 1995; Malini et al., 1999). Механизмът на антилитична активност на екстракта от петролев етер може да включва инхибиране на индуцираните от оксалата токсични прояви и производството на свободни радикали, заедно с подобряване на защитната система на тялото. Лекувана с лекарства група, показваща цитопротекция поради ефекта си върху предотвратяването на отлагането или агрегирането на калциев оксалат в тубулите, така че механичното разрушаване на епитела е по-малко или защита срещу пренареждане на свободните радикали (Malini et al., 1999).

В настоящото изследване хистопатологичната оценка показа максимално предотвратяване на отлагането на кристали в доза от 50 mg/kg в сравнение със 100 mg/kg, което може да се дължи на активното съединение, което присъства в екстракта от петролен етер, показващо активност при по-ниска доза. Активните съставки при по-висока доза могат да станат неактивни или да се образува по-малко активен метаболит, което намалява неговата активност.

Благодарности

Авторите биха искали да благодарят на д-р Avinash Pradhan, Pradhan Laboratories, Пуна, Индия, за хистопатологичната оценка на пробите от бъбреците. Авторите са благодарни и на д-р S.S.Kadam, директор, фармацевтичен колеж Poona, Пуна, за осигуряването на всички необходими условия за изследователската работа.

маса 1 Ефект от екстракта от петролев етер на Crataeva adansonii. върху параметрите на урината на плъхове, интоксикирани с натриев оксалат.