Полага Arnaud Rosal Lopes

1 Департамент по хранене, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@lasor_syal (L.A.R.L.); rb.moc.oohay@sairafedml (L.M.d.F.); moc.liamg@ohlavraclbassenav (V.B.L.d.C.)

чернодробно-защитни

Мария до Кармо де Карвальо и Мартинс

2 Катедра по биофизика и физиология, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; rb.moc.oohay@snitramahnimrac

Лучана Мело де Фариас

1 Департамент по хранене, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@lasor_syal (L.A.R.L.); rb.moc.oohay@sairafedml (L.M.d.F.); moc.liamg@ohlavraclbassenav (V.B.L.d.C.)

Ана Каролин да Силва Брито

3 Катедра по фармакология, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@bsennilorakana (A.K.d.S.B.); moc.liamg@innavoegsiarom (G.d.M.L.)

Джовани де Мораис Лима

3 Катедра по фармакология, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@bsennilorakana (A.K.d.S.B.); moc.liamg@innavoegsiarom (G.d.M.L.)

Ванеса Брито Лира де Карвальо

1 Департамент по хранене, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@lasor_syal (L.A.R.L.); rb.moc.oohay@sairafedml (L.M.d.F.); moc.liamg@ohlavraclbassenav (V.B.L.d.C.)

Кристиан Франсиско де Карвальо Перейра

4 Катедра по анатомия и морфология, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@pcfc_naitsirc (C.F.d.C.P.); [email protected] (A.M.C.J.)

Aírton Mendes Conde Júnior

4 Катедра по анатомия и морфология, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@pcfc_naitsirc (C.F.d.C.P.); [email protected] (A.M.C.J.)

Татяна Салданя

5 Департамент по хранителни технологии, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Rodovia BR 465, Km 07, s/n — Zona Rural, Seropédica, RJ 23890-000, Бразилия; moc.liamg@lasytat

Хосе Алфредо Гомес Ареас

6 Факултет по обществено здраве, Катедра по хранене, Университет на Сао Пауло, Ав. Д-р Арналдо, н. 715, Сао Пауло, SP 12.406-904, Бразилия; rb.psu@saeragaj

Kaesel Jackson Damasceno e Silva

7 Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária — EMBRAPA, Av. Duque de Caxias, nº 5.650, Bairro Buenos Aires, Teresina, PI 64008-780, Бразилия; [email protected]

Каролайн де Македо Гонсалвес Фрота

1 Департамент по хранене, Universidade Federal do Piauí, Campus Universitário Ministro Petrônio Portela, Teresina, PI 64.049-550, Бразилия; moc.liamtoh@lasor_syal (L.A.R.L.); rb.moc.oohay@sairafedml (L.M.d.F.); moc.liamg@ohlavraclbassenav (V.B.L.d.C.)

Резюме

Изследвахме хипохолестеролемичния и чернодробно-защитния ефект на варени и покълнали цели бобчета мунг. Хамстерите са били хранени в продължение на 28 дни на диети, богати на наситени мастни киселини и холестерол, различаващи се само по източник на протеини (20%): казеин, варен цял боб и покълнал боб. След 28 дни открихме намалени плазмени концентрации на общ холестерол и не-HDL холестерол, повишена екскреция на фекален холестерол и намалени нива на ензимите аспарагин аминотрансфераза и аланин аминотрансфераза в черния дроб. Намаляване на отлагането на липиди в черния дроб се наблюдава между всяка от групите мунг боб спрямо групата на казеина. В допълнение, животните от геминираната група боб мунг показват липса на възпалителен инфилтрат и по-добра васкуларизация на чернодробната тъкан. Резултатите от това проучване показват значителни хипохолестеролемични и чернодробно-защитни свойства на боб мунг, които се засилват допълнително след покълването.

1. Въведение

Повишеният холестерол в плазмата е основен рисков фактор за сърдечно-съдови заболявания (ССЗ), причинявайки 2,6 милиона смъртни случая в целия свят всяка година [1,2]. Високият прием на холестерол, прости въглехидрати, наситени мастни киселини и трансмастни киселини, в допълнение към прекомерната консумация на калории, са свързани с повишени нива на серумен холестерол и триацилглицерол [3].

Този дисбалансиран хранителен прием допринася за прекомерното натрупване на триацилглицероли в хепатоцитите, което характеризира безалкохолната мастна чернодробна болест (NAFLD). Излишъкът от триацилглицероли в хепатоцитите може да достигне токсични нива, които генерират повишен оксидативен стрес с образуването на свободни радикали, свързани с митохондриална дисфункция. Ненормалната липидна пероксидация води до директно чернодробно увреждане, с възпаление и дори фиброза [4,5].

Диетичните интервенции с бобови растения, насочени към намаляване на сърдечно-съдовите заболявания, са получили специално внимание по целия свят поради хипохолестеролемичните и чернодробно-защитните свойства на бобовите растения. Модулация на плазмените нива на холестерол чрез консумация на соя и други бобови растения, като лупина, нахут, леща и боб, е демонстрирана в проучвания върху животни и хора. Освен това в експерименти с намеса върху животни се съобщава за намаляване на отлагането на чернодробни липиди и предотвратяване появата на стеатоза [6,7,8,9,10,11].

Предишни проучвания показват, че няколко компонента, срещащи се в бобовите растения, могат да бъдат отговорни за такива ефекти, като биоактивни съединения и диетични фибри, както и съставни протеини поради състава им на специфични аминокиселини и биоактивни пептиди [12,13,14].

Бобът мунг (Vigna radiata L.) е бобово растение, произведено в Китай, Бирма, Индия, Корея, Пакистан, Япония, Тайланд и други части на Югоизточна Азия [15]. Отглеждането му на Запад се е увеличило поради нарастването на търсенето на покълналото зърно (бобен кълн), във формата, в която се консумира най-вече [16]. Процесът на покълване, включен в производството на кълнове от фасул, е прост и евтин. От хранителна гледна точка, покълването на боб мунг увеличава съдържанието на протеини и смилаемостта му, насърчава нарастването на съдържанието на биоактивни съединения и намалява анти-хранителните фактори [15,17,18,19,20]. Към днешна дата обаче не са публикувани проучвания за ефекта на покълналите зърна мунг в диетата върху плазмените нива на холестерола и има малко проучвания върху животни, които са изследвали цели зърна мунг [21,22,23].

Известно е, че основните компоненти на бобовите семена, които реагират на понижаващи холестерола и чернодробно-защитни ефекти, са протеини и биоактивни пептиди, като последните се образуват по време на храносмилането на семената [7,8,13,14,24]. Процесът на покълване увеличава съдържанието на протеини и, следователно, пептидите в червата по време на смилането на протеини от бобови растения. Също така е добре установено, че хамстерите са най-подходящият животински модел за диетични интервенционни изследвания. Хамстерите, подобни на хората, реагират свръхчувствително и имат сходни плазмени съотношения на липопротеинов холестерол с висока плътност (HDL-холестерол) и не-HDL-холестерол в плазмата, освен че имат същия механизъм на транспорт на холестерола [25]. Следователно целта на това проучване е да се изследват хипохолестеролемичните и чернодробно-защитните ефекти на варени зърна мунг и покълнали зърна мунг при хамстери с индуцирани от храната повишени нива на холестерол.

2. Материали и методи

2.1. Подготовка на пробите

Mung фасул (Vigna radiata L.), сорт MGS-Esmeralda, се доставя от Embrapa Meio-Norte, Teresina, PI, Бразилия. Семената на зърната се стерилизират с разтвор на натриев хипохлорит при 300 ppm за 10 минути и се промиват с много вода.

Варени зърна мунг се приготвят в автоклав (Prismatec, модел CS-30) при 120 ° С за 15 минути (съотношение боб: вода 1: 2 w/v). Методологията за покълване на семената е адаптирана от Huang, Cai и Xu [26]. Измитите зърна се накисват за 10 часа във вода при стайна температура (30 ° С). След това водата се източва и зърната се поставят в стерилизирани полиетиленови съдове, покрити с памук и с дупки на дъното, за да се позволи оттичането на водата. Контейнерите бяха поставени в покълваща камера (Marconi, модел MA-401) за 72 h, при липса на светлина, с циркулиращ въздух, 100% относителна влажност и температури, контролирани в диапазона от 25 ° C до 35 ° C. По време на покълването издънките се пръскаха ежедневно с питейна вода.

Готвеният боб мунг и покълналият боб мунг се сушат във вентилирана фурна при 50 ° C в продължение на 72 часа, смилат се в аналитична мелница (IKA, модел A11) и се пресява (35 меша), като се получават две различни брашна: Цяло варено брашно от манг боб (WMBF) и покълнало брашно Mung Bean (GMBF).

2.2. Животни, диети и експериментална процедура

Този протокол за изследване е представен на Комитета по етика за експерименти с животни на Федералния университет в Пиауи и е одобрен под номер на протокол 01.0264.2014. Всички процедури, свързани с боравенето с животни, са извършени съгласно препоръките в „Ръководство за грижа и употреба на лабораторни животни“ [27]. Общо 37 мъжки хамстера, наскоро отбити от конвенционалния санитарен стандарт, бяха получени от Anilab Animais de Laboratório, Criação e Comércio LTDA — EPP, Бразилия. Животните бяха настанени в отделни клетки в проветрива среда, с температури от около 20 ° C до 25 ° C, 55% относителна влажност, изложени на светло-тъмен цикъл от 12 часа и хранени ad libitum.

Предварителни тестове бяха проведени в пилотно проучване, използващо пет животни, за да се гарантира, че индуцирането на хиперхолестеролемия ще бъде постигнато чрез хранене с казеинова хиперхолестеролемична диета (CHD), богата на наситени мастни киселини (13,5%) и холестерол (0,1%), за период от 21 d. След потвърждаване на повишаването на всички липидни параметри, оценени преди и след индукционния период, беше проведен основният експеримент.

За основния експеримент всички животни преминаха 20-дневен период на аклиматизация, през който получиха търговска диета (CD) с цел намаляване на стреса, причинен от прехвърлянето им. След този период осем животни бяха разделени на случаен принцип и продължиха да получават CD до края на експеримента, представляващ отрицателната контролна група (NCG) (n = 8). Останалите животни получават ИБС за период от 21 дни, за да предизвикат хиперхолестеролемия.

След постигане на хиперхолестеролемия хамстерите бяха разделени на случаен принцип между три групи, всяка от които съдържаше осем животни. Всяка група е получавала различна диета за период от 28 дни. Една група продължи с ИБС и беше наречена положителна контролна група (PCG) (n = 8). Втора група получи пълнозърнестата диета от брашно Mung Bean (WMBD), експериментална диета, съдържаща WMBF, както и добавянето на наситени мастни киселини (13,5%) и холестерол (0,1%), и беше деноминирана като пълнозърнесто брашно Mung Bean Група (WMBG) (n = 8). Третата група получи диета с покълнали зърна от мунг (GMBD), експериментална диета, съдържаща GMBF, както и добавянето на наситени мастни киселини (13,5%) и холестерол (0,1%), и беше деноминирана от групата на покълналото брашно от мунг (GMBG) ) (n = 8). В края на 28-дневния експериментален период бяха взети кръвни проби от всички животни за биохимичен анализ.

Изчисленията за различните компоненти на експерименталните диети, съдържащи варени или покълнали зърна мунг, се основават на центезималния анализ, извършен по официални методи [28], както е показано в таблица 1. Следователно, формулировките на диетите, съдържащи цели варени и покълнали зърна брашно, водят до диети със същото съдържание на протеини, липиди и калории, които също осигуряват еднакви количества холестерол и холин хлорид и се различават само в източника на протеин. Търговската диета е формулирана от производителя. Диетите, съдържащи WMBF и GMBF, бяха допълнени с L-метионин, аминокиселина, която обикновено е с ниско съдържание на диети, съдържащи бобови протеини [29].

маса 1

Сентезимален състав на зърна от мунг (Vigna radiata L.), варени (WMBF) и покълнали (GMBF) брашна, на база сухо вещество.