Принадлежности

  • 1 Институт по генна терапия Goldyne Savad, Университетска болница Hadassah, Йерусалим, Израел.
  • 2 Лаборатория по биохимична фармакология Университет Емори, катедра по педиатрия, Атланта, Джорджия.
  • 3 Кардиоторакална хирургия, Университетска болница „Хадаса“, Йерусалим, Израел.
  • 4 Институт по биохимия, наука за храните и храненето, Факултет по земеделие, храни и околна среда на Робърт Х. Смит, Еврейският университет в Йерусалим, Реховот, Израел.
  • 5 Лаборатория за затлъстяване и метаболизъм, Мултидисциплинарен център за изследване на канабиноиди, Медицински факултет, Институт за изследване на наркотици, Еврейския университет в Йерусалим, Израел.
  • 6 Център за биомедицина и геном в Измир, здравен кампус на университета Dokuz Eylul, Измир, Турция.
  • 7 Първата свързана болница на Медицинския университет в Гуанджоу, Гуанджоу, Китай.
  • 8 OWL Metabolomics, Bizkaia Technology Park, Derio, Испания.
  • 9 Чернодробно отделение, Институт по гастроентерология, Медицински отдел, Университетска болница Хадаса, Йерусалим, Израел.
  • 10 Лаборатория по биохимична фармакология Университет Емори, Катедра по педиатрия, Атланта, Джорджия. Електронен адрес: [email protected].
  • 11 Goldyne Savad Institute of Gene Therapy, Hebrew University Hospital Hadassah, Йерусалим, Израел. Електронен адрес: [email protected].

Автори

Принадлежности

  • 1 Институт по генна терапия Goldyne Savad, Университетска болница Hadassah, Йерусалим, Израел.
  • 2 Лаборатория по биохимична фармакология Университет Емори, катедра по педиатрия, Атланта, Джорджия.
  • 3 Кардиоторакална хирургия, Университетска болница Хадаса, Йерусалим, Израел.
  • 4 Институт по биохимия, наука за храните и храненето, Факултет по земеделие, храни и околна среда на Робърт Х. Смит, Еврейският университет в Йерусалим, Реховот, Израел.
  • 5 Лаборатория за затлъстяване и метаболизъм, Мултидисциплинарен център за изследване на канабиноиди, Медицински факултет, Институт за изследване на наркотици, Еврейския университет в Йерусалим, Израел.
  • 6 Център за биомедицина и геном в Измир, здравен кампус на университета Dokuz Eylul, Измир, Турция.
  • 7 Първата свързана болница на Медицинския университет в Гуанджоу, Гуанджоу, Китай.
  • 8 OWL Metabolomics, Bizkaia Technology Park, Derio, Испания.
  • 9 Чернодробно отделение, Гастроентерологичен институт, Медицински отдел, Университетска болница Хадаса, Йерусалим, Израел.
  • 10 Лаборатория по биохимична фармакология Университет Емори, Катедра по педиатрия, Атланта, Джорджия. Електронен адрес: [email protected].
  • 11 Goldyne Savad Institute of Gene Therapy, Hebrew University Hospital Hadassah, Йерусалим, Израел. Електронен адрес: [email protected].

Резюме

Предистория и цели: Развитието на неалкохолен стеатохепатит (NASH) е свързано с намаляване на чернодробната микроРНК122 (MIR122); RAR-свързан сирак рецептор А (RORA) насърчава експресията на MIR122. Увеличаването на експресията на RORA в черния дроб на мишки увеличава експресията на MIR122 и намалява липотоксичността. Изследвахме ефектите на RORA агонист в миши модели на NASH.

мастна

Методи: Проверихме химическа библиотека, за да идентифицираме агонисти на RORA и тествахме техните ефекти върху клетъчна линия на човешки хепатоцелуларен карцином (Huh7). Мишките C57BL/6 са били хранени с чау или диета с високо съдържание на мазнини (HFD) в продължение на 4 седмици, за да предизвикат мастен черен дроб. На мишките се даваха хидродинамични инжекции с опашна вена на антагонист на MIR122 (antagomiR-122) или контролен antagomiR веднъж седмично в продължение на 3 седмици, докато все още са на диета HFD или чау, или интраперитонеални инжекции на агонист RORA RS-2982 или носител, два пъти всяка седмица в продължение на 3 седмици. Черният дроб, бялата мастна жлеза и скелетната мускулатура са събрани и анализирани чрез верижна реакция на полимеразна обратна транскрипция, хистология и имунохистохимия. Отделна група мишки бяха хранени с атерогенна диета, с или без инжекции на RS-2982 в продължение на 3 седмици; черният дроб се анализира чрез имунохистохимия и плазмата се анализира за нива на аминотрансферази. Анализирахме данни от чернодробни тъкани от пациенти с NASH, включени в базата данни за секвениране на РНК GSE33814 и GSE89632.

Резултати: Инжектиране на мишки с antagomiR-122 значително намалява нивата на MIR122 в плазмата, черния дроб и бялата мастна тъкан; при мишки с HFD инжекциите на antagomiR-122 увеличават мастните капчици и общото съдържание на триглицериди в черния дроб и намаляват β-окисляването и енергийните разходи, което води до значително по-голямо наддаване на тегло, отколкото при мишките, получавайки контролната микроРНК. Идентифицирахме RS-2982 като агонист на RORA и установихме, че той увеличава експресията на MIR122 промоторна активност в Huh7 клетки. При мишки, хранени с HFD или атерогенна диета, инжекциите на RS-2982 повишават чернодробните нива на прекурсори MIR122 и намаляват чернодробния синтез на триглицериди чрез намаляване на експресията на биосинтезни ензими. При тези мишки RS-2982 значително намалява чернодробната липотоксичност, намалява чернодробната фиброза, повишава инсулиновата резистентност и намалява телесното тегло в сравнение с мишки, инжектирани с носител. Пациентите, претърпели сърдечно-съдова операция, са имали повишени нива на плазмен MIR122 в сравнение с неговите нива преди операцията; повишената експресия на плазма MIR122 е свързана с повишени нива на плазмени свободни мастни киселини и нива на RORA.

Заключения: Идентифицирахме съединението RS-2982 като агонист на RORA, който увеличава експресията на MIR122 в клетъчни линии и черен дроб на мишки. Мишките, хранени с HFD или атерогенна диета, получаващи инжекции от RS-2982, имат намалена чернодробна липотоксичност, чернодробна фиброза и телесно тегло в сравнение с мишки, на които е дадено носителя. Агонисти на RORA могат да бъдат разработени за лечение на NASH.

Ключови думи: Липид; Метаболизъм; NAFLD; Затлъстяване.