Ксавие Пинто

1. Unitat de Lípids i Arteriosclerosi, Servei de Medicina Interna, Hospital Universitari de Bellvitge, IDIBELL, c/Feixa Llarga s/n, 08907 Hospitalet de Llobregat, Барселона, Испания.

М. Антония Виласека

2. Unitat de Metabolopaties. Servei de Bioquimica. Hospital de Sant Joan de Déu. Passeig Sant Joan de Déu, 2, 08950 Esplugues de Llobregat. Барселона. Испания.

Сусана Балцелс

3. Departament de Genètica. Facultat de Biologia. Университет на Барселона. Авда. Диагонал 645, 08028 Барселона. Испания.

Рафаел Артух

2. Unitat de Metabolopaties. Servei de Bioquimica. Hospital de Sant Joan de Déu. Passeig Sant Joan de Déu, 2, 08950 Esplugues de Llobregat. Барселона. Испания.

Емили Корбела

1. Unitat de Lípids i Arteriosclerosi, Servei de Medicina Interna, Hospital Universitari de Bellvitge, IDIBELL, c/Feixa Llarga s/n, 08907 Hospitalet de Llobregat, Барселона, Испания.

Хосе Ф. Меко

1. Unitat de Lípids i Arteriosclerosi, Servei de Medicina Interna, Hospital Universitari de Bellvitge, IDIBELL, c/Feixa Llarga s/n, 08907 Hospitalet de Llobregat, Барселона, Испания.

Рамон Вила

4. Servei d'Angiologia i Cirurgia Vascular. Болница Universitari de Bellvitge, IDIBELL, c/Feixa Llarga s/n, 08907 Hospitalet de Llobregat, Барселона, Испания

Рамон Пуджол

1. Unitat de Lípids i Arteriosclerosi, Servei de Medicina Interna, Hospital Universitari de Bellvitge, IDIBELL, c/Feixa Llarga s/n, 08907 Hospitalet de Llobregat, Барселона, Испания.

Даниел Гринберг

3. Departament de Genètica. Facultat de Biologia. Университет на Барселона. Авда. Диагонал 645, 08028 Барселона. Испания.

Резюме

Предистория и цели: Най-малко 500 μg фолиева киселина са необходими дневно за лечение на хиперхомоцистеинемия. Постигането на това количество само чрез диетични промени може да бъде трудно, тъй като храната има ниско съдържание на фолиева киселина и бионаличност. Няма проучвания, в които се сравняват ефектите на подобни количества допълнителни фолати, получени от комбинация от богати на фолат и обогатени храни или фолиева киселина от добавки върху плазмените концентрации на общ хомоцистеин (tHcy), което беше целта на това проучване. Методи: Двадесет пациенти от мъжки пол с хиперхомоцистеинемия и коронарна артериална болест бяха включени в рандомизирано, кръстосано интервенционно проучване. Пациентите са лекувани ежедневно с комбинация от храни, съдържащи приблизително 500 μg фолат, или с една 500 μg капсула синтетична фолиева киселина в продължение на два петседмични периода, разделени от петседмичен период на измиване. Резултати: Плазменият фолат се е увеличил значително (p Ключови думи: Фолиева киселина, диета, фолиева киселина, хомоцистеин.

1. ВЪВЕДЕНИЕ

2. МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

В проучването първоначално бяха включени 22 амбулаторни пациенти при мъже с анамнеза за ИБС (ангина или миокарден инфаркт поне три месеца преди включването) и хиперхомоцистеинемия. Хиперхомоцистеинемията е произволно дефинирана като tHcy ≥ 12 μmol/l, като се има предвид, че желаните стойности на tHcy при пациенти с ИБС са определени като ≤ 10 μmol/l 11. По-късно двама от 22-те пациенти бяха изключени: единият за преходна исхемична атака, а другият за „неразположение“ по време на периода на лечение с фолатни капсули. Характеристиките на изследваните предмети са показани в Таблица Таблица 1 1 . Нито един пациент не е имал стомашно-чревни разстройства или е бил подложен на лечение с витаминни добавки или лекарства, които могат да повлияят метаболизма на фолатите. Всички субекти преди това са били съветвани да спазват диета с ниско съдържание на холестерол и наситени мазнини и никой не е консумирал храни, обогатени с фолиева киселина. Това проучване беше одобрено от Комитета по етика на болницата Universitari de Bellvitge и всички участници дадоха писмено информирано съгласие.

маса 1

Изходни характеристики на изследваните пациенти.

Променлива Всички обекти (n = 20)
Възраст (години)60,9 ± 8,91
Индекс на телесна маса (Kg/m 2)28,6 ± 3,24
История на хипертония n. (%)9 (45%)
История на диабета n. (%)15%)
Сърдечно-съдови анамнези Angor pectoris n. (%) Миокарден инфаркт n. (%)15 (75%) 10 (50%)
Настоящ пушач n. (%)2 (10%)
Общ холестерол (mmol/l)4,8 ± 0,69
Триглицерид (mmol/l)1,3 ± 0,44
LDL холестерол (mmol/l)2,8 ± 0,66
HDL холестерол (mmol/l)1,3 ± 0,36
Фолиева киселина (nmol/l)16,6 ± 6,63
Кобаламин (pmol/l)393,6 ± 168,7
Хомоцистеин (μmol/l)16,1 ± 7,40
MTHFR TT мутация4 (20%)

± стойностите са: означава ± SD

Дизайн

богата

Диаграма на експериментален дизайн

Спазването на изпитваното лечение беше внимателно наблюдавано. По време на проучването бяха направени непредвидени 24-часови изземвания на диета. През седмицата преди всяко посещение беше приключено и самостоятелно изземване на тридневна диета. Съдържанието на хранителни вещества в диетите е оценено със софтуера Food Processor Plus, версия 8.44 (ESHA Research, INC, 2000).

Основният резултат от проучването е промяната в tHcy спрямо изходното ниво.

Лабораторни определяния

Взети са проби от венозна кръв след 12-часово гладуване. Аликвотни части бяха приготвени и замразени при –40 ° C и анализирани в рамките на следващите 2 седмици в същата лаборатория (болница Sant Joan de Déu). Плазмената tHcy се определя чрез HPLC, както е описано по-рано 15. Неточността в рамките на пробега (n = 18) е 3% (70,7 ± 2,2 μmol/l) и 4% (8,9 ± 0,3 μmol/l), а междудневната неточност (n = 18) е 6% (6,9 ± 0,4 μmol/l) и 6% (55,4 ± 3,1 μmol/l). Нивата на витамин В12 и фолат се определят чрез радиоанализ (Simultrac, Becton Dickinson) и пиридоксал фосфат се измерва чрез HPLC (Chromsystem kit).

Липидният профил включва общ холестерол, триглицериди и аполипопротеини (Apo) A-1 и B в плазмата и холестерол в липопротеини с висока плътност (HDLc). HDL се изолират чрез селективно утаяване на липопротеини с полиетилен гликол и LDL холестеролът (LDLc) се изчислява с формулата на Friedewald. Триглицеридите и холестеролът се измерват с търговски колориметрични методи (Boehringer Manheim, Барселона, Испания). Концентрациите на ApoA-1 и apoB са измерени чрез радиална имунодифузия в агарозни плаки. Фибриногенът се измерва чрез PT-получен турбидиметричен метод. За откриване на мутацията на метилентетрахидрофолат редуктаза (MTHFR) 677 C> T се приготвя геномна ДНК от периферни кръвни левкоцити, използвайки стандартен метод. Праймери за PCR амплификация са тези, описани от Frosst et al. 16. PCR продуктът се усвоява с HinfI и се анализира чрез електрофореза в полиакриламиден гел.

Статистически анализ

3. РЕЗУЛТАТИ

Изходните характеристики на субектите са показани в Таблица Таблица 1 1 . Хомозиготната мутация 677 C> T в гена MTHFR е налице при 20% от пациентите. Този дял е по-висок от този, наблюдаван в предишно проучване на пациенти с ИБС от нашата институция 17, което може да се обясни с факта, че пациентите от това проучване са избрани въз основа на високи нива на tHcy.

Статистически значим tHcy-понижаващ ефект (p (Таблица2 2). Не се забелязват значителни разлики (p на взаимодействие = 0,883) в степента на понижаване на tHcy между двете форми на терапия. Храните, богати на фолиева киселина, и добавките с фолиева киселина повишават концентрацията на фолиева киселина (p Таблица 3 3 . Приемът на фолиева киселина от храната се е увеличил значително с диетична терапия, но не са наблюдавани промени по време на допълнителната терапия. Увеличеният прием на витамин В6 (р 17 и ниският прием на фолиева киселина с последващи ниски серумни концентрации на фолиева киселина е основната причина за това разстройство 18 .

Диетичният прием на фолиева киселина от 350 μg/ден се препоръчва сред популацията като цяло, но повечето хора в развитите страни не постигат това дневно количество само чрез диета. В Европа средният прием на фолиева киселина при възрастни е 291 μg (диапазон: 197-326) за мъже и 247 μg (диапазон 168-320) за жени 19. Разумен подход за увеличаване на приема на фолиева киселина е включването на по-големи количества храни, богати на фолати, в диетата, т.е. листни зелени зеленчуци, плодове, бобови растения и готови за консумация подсилени зърнени храни. Такъв подход беше използван в това проучване, като снабдява участниците с умерено количество храни, богати на фолиева киселина, осигурявайки средно 500 μg фолиева киселина дневно. Тази доза фолат е избрана, тъй като е била по-висока от минималната ефективна доза от 0,2 mg/ден, за която е установено, че намалява хомоцистеина (20), и по-висока от средния прием на фолиева киселина при европейските мъже, но не е достатъчно висока, за да бъде постигната с фолиева киселина -богата диета.

Токсичността на фолиевата киселина е изключително ниска дори след продължителна употреба на високи дози (21). Доказано е, че фолиевата киселина в дози между 0,2 и 15 mg/ден може да понижи плазмените нива на хомоцистеин без очевидна токсичност. Основен въпрос за безопасността е рискът от неврологични разстройства, когато се използват високи дози фолиева киселина при наличие на основен дефицит на витамин В12. Прието е обаче да се изключи дефицитът на витамин В12, преди да се даде допълнителен фолат. След започване на терапията с фолиева киселина, тя обикновено се поддържа дългосрочно, но докато не станат налични резултати от контролирани клинични изпитвания, не могат да се правят твърди препоръки относно тази терапия.

Поради относителните разлики в бионаличността на естествено срещащи се хранителни фолати и по-бионаличната синтетична фолиева киселина, 100 μg естествен фолат от необогатени храни е приравнен на 60 μg синтетична фолиева киселина от обогатена храна и на 50 μg синтетична фолиева киселина от добавки 22. Въпреки това, проучванията, сравняващи ефектите на фолиевата киселина от храната с тези на добавките върху tHcy, са оскъдни. Brouwer et al 23 съобщават, че диета, включваща 560 μg фолат на ден, намалява tHcy със средно 2 μmol/l (95% CI: 1.0-3.0) и подобен ефект се наблюдава при 500 μg/ден фолиева киселина от добавки. Ridell et al 24 съобщават, че фолиевата киселина както от добавките, така и от зърнените храни за закуска има по-голям ефект върху tHcy, отколкото богатите на фолати храни. В мета-анализ на рандомизирани проучвания, които оценяват понижаващия tHcy ефект на добавки на базата на фолиева киселина, също се забелязва ясна хетерогенност между опитите и не се обяснява с разлики във възрастта, пола или продължителността на лечението, а с разликите в MTHFR генен полиморфизъм или предварителна обработка на tHcy и концентрации на фолиева киселина 13, 25. Хранителните взаимодействия, които влияят върху бионаличността на фолиева киселина, може също да са повлияли на различните понижаващи tHcy ефекти на диетичната терапия сред проучванията.

Дизайнът на това проучване - амбулаторно изпитване за кръстосано хранене - доведе до някои трудности при осигуряването на съответствие. Тези трудности обаче бяха частично компенсирани от подробни хранителни инструкции и подсилване при всяко посещение по време на проучването. Количеството плодове, зеленчуци, боб, ядки и зърнени закуски, дадени на участниците, съответства на това, което може да се счита за разумен обичайния дневен прием. Това контрастира с по-високите количества храни, богати на фолати, които са били използвани в други проучвания 23. Успяхме да използваме по-малки количества плодове и зеленчуци, за да доставяме 500 μg фолиева киселина на ден, тъй като други храни, като боб, ядки и обогатени с фолиева киселина зърнени закуски също бяха включени като източник на фолиева киселина. Този тип диета е по-лесна за следване в дългосрочен план и може да бъде полезна при общ популационен подход за увеличаване на приема на фолиева киселина.

Наблюдавахме намаляване на LDL-C по време на богата на фолат диета и на добавките с фолиева киселина. Увеличаването на приема на плодове, зеленчуци, фасул, ядки и зърнени закуски по време на богата на фолиева киселина диета може да обясни тези липидни промени, тъй като тези храни имат понижаващ холестерола ефект, както за LDL, така и за HDL фракции, поради високото съдържание на въглехидрати и фибри съдържание. Намаляването на LDL-C през периода на добавяне на фолиева киселина обаче не може да се дължи на наблюдаваните малки диетични промени. Вероятно по-внимателният надзор на лекар и диетолог насърчава по-здравословен цялостен начин на живот в резултат на благоприятни липидни ефекти.

Мета-анализ на наблюдателни проучвания на кръвната tHcy и съдовите заболявания показва, че продължителното понижаване на концентрацията на tHcy с 1 μmol/l е свързано с приблизително 10% намаляване на риска в диапазона от 10-15 μmol/l 26 и че ползата от намаляването на tHcy е по-голяма при пациенти с ИБС, отколкото при общата популация 27. В това проучване терапията с фолиева киселина от диета или добавки намалява средния tHcy с повече от 1 μmol/l и този ефект може да бъде очевидно полезен за предотвратяване на рецидиви и смърт при пациенти с ИБС.

5. ЗАКЛЮЧЕНИЯ

Доколкото ни е известно, това е първото изследване в международната литература, в което се сравняват ефектите на подобни количества допълнителни фолати, получени от комбинация от храни, богати на фолати и обогатени зърнени храни за закуска или фолиева киселина от добавки, върху концентрациите на tHcy. Резултатите показват, че диетата е толкова ефективна и осъществима, колкото добавките за понижаване на tHcy и допълнително подкрепят препоръките за диети с разнообразни храни, богати на фолати, за понижаване на tHcy и предотвратяване на сърдечно-съдови заболявания.

Благодарности

Това проучване беше подкрепено с безвъзмездна финансова помощ от Фондация La Marató de TV3, Барселона, Испания и от Фондация за изследване и профилактика на сърдечно-съдови заболявания (FIPEC), Барселона, Испания.

Авторите благодарят на Е. Рос за концептуален преглед на ръкописа; R. Urreitzi за умела техническа помощ; N. Virgili, A. Pérez-Heras и M. Serra за анализ на диетичните записи; и Кристин О'Хара за корекция на английската версия. Също така благодарим на Kellogg's España за доставката на зърнени закуски и финансовата подкрепа при анализа на диетичните записи.

Биография

Ксавие Пинто е роден в Барселона през 1956 г. Завършва медицина през 1980 г. в Университета на Барселона и става специалист по вътрешни болести след 5-годишна резиденция в болница Universitario de Bellvitge. Завършва докторска дисертация за аномалии на липопротеините и аполипопротеините при пациенти с церебрална, коронарна и периферна атеросклероза през 1988 г. в Университета в Барселона. Той е директор на отделението за липиди и атеросклероза на Службата по вътрешни болести в болницата Universitario de Bellvitge и доцент по медицина в Университета на Барселона. Изследванията на д-р Пинто се фокусират върху хиперлипидемия, атеросклероза, понижаващи липидите средства и нетрадиционни сърдечно-съдови рискови фактори, със специален интерес към хомоцистеина. Той е член-основател на Испанското общество за атеросклероза и е в редакционните съвети на списанията Clinica e Investigación en Arteriosclerosis и Medicina Clínica (Barc.). Той също така е редовен участник в различни национални комитети. Неговите изследвания са довели до публикуването на повече от 50 научни статии, 11 глави и две книги.