Резюме

ПРОЕКТИРАНЕ И МЕТОДИ НА ИЗСЛЕДВАНИЯТА

Дизайн и предмети.

Болни със затлъстяване (ИТМ> 40 kg/m 2 и/или най-малко 100 lb над идеалното телесно тегло) (10 жени, 2 мъже; 1 черно, 11 бяло) са изследвани преди и 1 година след планова операция на стомашен байпас, за да се предизвика тегло загуба (12). Описателните данни за субектите са представени в таблица 1. Преди това сме характеризирали отговорите на стомашна хирургия при пациенти със затлъстяване; 12-месечното време след операцията беше избрано, тъй като телесната маса се стабилизира и остава значително потисната в сравнение със състоянието на предхирургията; има и драматично подобрение в действието на инсулина (12). Един субект е бил диабетик (тип 2); всички останали са имали нормални концентрации на глюкоза на гладно.

интрамускулните

Субектите са докладвани в лабораторията в ~ 800 h след 12-часов пост. За 3-те дни преди проучването субектите са инструктирани да консумират най-малко 250 g въглехидрати на ден. При влизане в лабораторията се измерва телесна маса и ръст. Мускулна проба е получена от vastus lateralis на гладно, използвайки техниката на иглена биопсия. След това беше направен минимален модел (15) за изчисляване на индекса на инсулинова чувствителност (SI). Правени са идентични процедури, когато субектите са били със затлъстяване (преди операция) и след загуба на тегло (1 година след операцията). Всички процедури бяха одобрени от Институционалния съвет за преглед на университета в Източна Каролина и беше получено информирано съгласие преди извършването на експериментални процедури.

Инсулиново действие.

Течна хроматография в тандем мас спектрометрия.

Била е проведена иглена биопсия на vastus lateralis под местна упойка на гладно, непосредствено преди минималния модел. Видимите мазнини и/или съединителна тъкан бяха отстранени от пробата (50–100 mg) и замразени в течен азот за последващи анализи. LCACoAs бяха извлечени от биопсичната проба чрез екстракция в твърда фаза и C 17 CoA беше добавен като вътрешен стандарт, както беше описано по-горе (17,18). Тандемният масспектрометър API 3000 (Perkin-Elmer Sciex), свързан с източник на йонизация TurboIonspray, беше използван за масспектрометрия/масспектрометричен анализ (18). Мастните ацил-CoAs се йонизират в режим на отрицателно електроспрей и преходните двойки [M-2H] 2−/[M-H-80] - се наблюдават в режим на наблюдение на множество реакции. Двойно заредените йони и съответните йони на продукта (прекурсор минус фосфатна група) са избрани като двойка на преход за наблюдение на множество реакции за количествено определяне (18). Общото съдържание на LCACoA се изчислява като сумата от измерените видове LCACoA.

Статистика.

Данните са представени като средна стойност ± SE. Многократни мерки ANOVA е използван за сравняване на данните преди и след операцията. Коефициентите на корелация на продукта на Пиърсън бяха използвани, за да се определи дали съществуват връзки между избрани променливи. Статистическата значимост беше обозначена при P 2) значително (P -1 - (μU/kg -1); Фиг. 2]. SI не беше изчислена за един женски субект поради невъзможност да се получи венозен достъп по време на цялата минимална моделна процедура; По този начин са представени SI данни за 11 субекта. Подобренията в тези индекси на инсулиновото действие остават статистически значими, когато пациентът с диабет е изключен; данните от този субект са включени във всички статистически анализи.

Съдържание на мускулна LCACoA.

Данните за концентрациите на LCACoA са представени на фиг. 3. Не е получен достатъчно материал при 1 човек; представени са данни за 11 субекта (9 жени, 2 мъже). Няма данни за полови разлики във връзка с действието на инсулин, телесния състав и промените в общия и индивидуалния вид LCACoA с намеса за отслабване. По този начин всички данни са представени независимо от пола. Имаше значително (P резултати). Palmityl CoA може да се синтезира в керамид (1) и/или евентуално да функционира чрез други механизми, които предизвикват инсулинова резистентност (22). Тези открития подчертават, че състоянието на насищане и дължината на веригата са важни фактори, които трябва да се вземат предвид при изследване на ролята, която LCACoAs играят при контролирането на действието на инсулина в скелетните мускули.

Въпреки че концентрацията на цитозолен триглицерид може да служи като полезен индекс на съдържанието на мускулна мазнина, точното определяне на концентрацията на мускулно триглицериди е технически трудно поради възможното замърсяване от мастната тъкан, разпръснато между отделните мускулни клетки (4,11,32). Концентрациите на LCACoAs с различна дължина и наситеност на веригата са практически неоткриваеми в мастната тъкан; по този начин измерването на LCACoA е предложено като надежден индикатор за интрамускулно липидно съдържание (11). В подкрепа на LCACoA, отразяващо съдържанието на липиди в мускулите, храненето с високо съдържание на мазнини повишава концентрацията на LCACoA в скелетните мускули на гризачи (11,33). В допълнение, специфичната за тъканите свръхекспресия на липопротеин липаза в черния дроб и мускулите насърчава повишено отлагане на мастен ацил CoA в тези тъкани, което е свързано със специфична за тъканите инсулинова резистентност (3). Намаляването на LCACoA, съобщено в настоящото проучване със загуба на тегло, също така показва, че общото вътремиоцелуларно съдържание на липиди е значително намалено с тази интервенция при затлъстели индивиди.

В обобщение, увеличаването на интрамиоцелуларните LCACoAs са замесени в патогенезата на инсулиновата резистентност в скелетните мускули. В настоящото проучване мускулната палмитил CoA (-35%), стеарат CoA (-17%) и линолеат CoA (-30%) намаляват значително със загуба на тегло при затлъстели лица. Обратно, мускулният палмитолеат CoA и олеатът CoA не са значително променени. Наблюдава се тенденция за по-голямо намаляване на палмитил ацил КоА да бъде свързано с усилено действие на инсулина със загуба на тегло. Тези открития предполагат, че намаляването на интрамускулното съдържание на LCACoA може да е отговорно, поне отчасти, за засиленото действие на инсулина, наблюдавано при загуба на тегло при затлъстели индивиди.