Използвана е високоефективна течна хроматография (HPLC) за изследване на съставния състав на джуджето everlast (Helichrysum arenarium (L.) Moench.) Цветя. HPLC анализът е използван за разработване на метод за анализ на съдържанието на изосалипурпозид във вечноцветните цветя на джуджето и лекарството „Flamin“. Съдържанието на изосалипурпозид във вечнозелените цветя на джуджета варира от 1,56% до 1,78%; съдържанието в “Flamin таблетки” варира от 10,35 до 11,05 mg/таблетка.

Лекарствените растения, съдържащи флавоноиди, имат широк спектър от фармакологични действия и представляват уникален източник на холагогични, хепатопротективни, анксиолитични, ангиопротективни и противовъзпалителни лекарства [1 - 7]. Един от потенциалните източници на холагогични и хепатопротективни агенти се осигурява от цветята на джуджето everlast - Helichrysum arenarium (L.) Moench. [2 - 4, 7, 8].

вечно

Цветните джуджета и лекарства на тяхна основа (инфузии, течната формула „Фламин“, холагогични препарати) се използват в медицината като холагогични лекарства [2 - 4, 8, 9], въпреки че са получени противоречиви резултати по отношение на химичния състав. Публикуваните данни показват, че доминиращите флавоноиди в вечнозелените цветя на джуджетата са халконът изосалипурпозид и флаваноните салипурпозид, прунин и нарингенин [2 - 4, 7, 8], въпреки че няма съгласувано мнение кой от тези компоненти е доминиращ. Еверластът на джуджето съдържа и редица други вещества, включително кумароли, канелни киселини, фталиди, полизахариди и други [2 - 4, 8].

Според нас сложността на химическия състав на джуджевите вечноцветни цветя е отговорна за факта, че аналитичните методи за лечебния растителен материал (MPM) „Джуджеве вечни весни цветя“ не отговарят на настоящите изисквания за фармакогнозия и фармакопеен анализ. По този начин, монографията за фармакопея за този материал [10] определя само качествена реакция за флавоноиди за анализ на джуджето вечно, и това не позволява идентифициране на отделните компоненти, типични за това растение. Освен това, нашите резултати показват, че методът на фармакопея [10] дава резултати за съдържанието на флавоноиди, които са повишени с фактори 2 - 3 [11]. По-рано сме разработили метод за анализ на общите флавоноиди, използвайки диференциална спектрофотометрия, използвайки държавната референтна проба (SRS) на изосалипурпозид [11]. Като се има предвид факта, че вечноцветните джуджета са източник на SRS на изосалипурпозид, разработването на метод за анализ на изосалипурпозид в този материал е от значение.

Целта на настоящата работа е да се разработи метод за анализ на изосалипурпозид в джудже вечноцветни цветя и лекарството „Фламин таблетки” с помощта на HPLC.

Експериментална секция

Бяха изследвани вечноцветни цветя от джуджета, събрани в различни региони на Руската федерация, заедно с промишлени проби от OAO Krasnogorskleksredstva (Московска област) и OOO PKF Fitofarm (Анапа, област Краснодар) и проби от лекарството „Flamin таблетки“ (AO Galichfarm, Lvov) . Извършени са фитохимични проучвания на MPM на джуджета вечен реласт, използвайки спектрален и физикохимичен анализ, включително спектрофотометрия и HPLC.

Разработването на метод за анализ на изосалипурпозид в джуджета вечноцветни цветя включва определяне на UV спектрите на водно-етаноловите екстракти от суровини и разтвори на изосалипурпозид (1), салипурпозид (2), 5,7-дихидроксифталид (3) и 5-метокси-7-хидроксифталид (4) извлечени от джудже вечноцветни цветя. Спектрите са записани с помощта на спектрофотометър Specord 40 (Analytik Jena).

Методът за анализ се основава на следните оптимални параметри: екстракция на суровина със 70% етилов алкохол за 1 h с кипене при съотношение 1:50 [11].

HPLC анализът се извършва с помощта на хроматограф Milikhrom-5 при следните условия на хроматография с обратна фаза в изократичен режим: KAX колона (2 mm × 80 mm), неподвижна фаза Diasorb C-16, елуентна система, състояща се от ацетонитрил: вода в съотношение от 25: 7, допълнена с 1% ледена оцетна киселина, скорост на елуиране 100 μm/min, инжектиран обем на пробата 5 μl. Веществата бяха открити при пет дължини на вълната: 254, 270, 290, 330 и 360 nm. Дължините на вълните са избрани въз основа на това, че изследваните съединения имат пикове на абсорбция при 372 nm (изосалипурпозид), 284 nm (салипурпозид), 256 и 292 nm (5,7-дихидроксифталид, 5-метокси-7-хидроксифталид) и 330 nm ( хидроксицинатна киселина). Основната и аналитична дължина на вълната за маркиране на пикове беше 360 nm, тъй като целевият аналит беше изосалипурпозид, който има пик на абсорбция при 372 nm.

Сравнение на относителните времена на задържане на вещества, извлечени от цветя на джуджета (пикове 1 - 5) на HPLC хроматограми (фиг. 1) и разтвори на лекарството „Flamin таблетки“ (фиг. 2) с времената на задържане на отделното вещество пикове (Фиг. 3 - 6, Таблица 1) позволиха да бъдат идентифицирани четири съединения (1 - 4), сред които доминиращото съединение беше изосалипурпозид (1).

HPLC хроматограма на екстракт от джудже евърласт (пиковите числа на веществото съответстват на тези, дадени в таблица 1).