Изобретението се отнася до методи за имуностимуланти, лишени от такива странични ефекти, като прогенот. Съгласно изобретението воден разтвор на пирогенал, взет при концентрация 10-100 μg/ml, подложен на гама облъчване в доза 40 или 120 kGy (дискретни стойности). Ефект: методът осигурява елиминиране на прогеномата на пирогенал. 4 C.p. f-кристали.

прогресира

Изобретението се отнася до аптека, по-специално до методи за имуностимуланти на основата на естествени полизахариди, и може да се използва за създаване на подходящи лекарствени състави.

Пирогените е сложно лекарство липополизахариди и полизахариди, изолирани от бактерии Pseudomomas aeruginosa и някои други микроорганизми (М. Д. Машковски. "Лекарствен продукт", част 2, стр. 174-175, М.: Медицина, 1988). Лекарството, използвано в хирургията при адхезивно заболяване, лечение на келоидни белези и контрактури; в урологията за лечение на стриктури на уретрата и уретерите, хроничен простатит и уретрит; в гинекологията - възпаление на матката; във венерологията като неспецифичен имуностимулант при комплиачен кератит и конюнктивит; в дерматологията - псориазис, стрептодермия, невродермит; в козметиката за лечение на големи кожни дефекти без образуване на груб белег; по алергология в терапия на бронхиална астма.

Въвеждането на пирогенал (интрамускулно) е придружено от повишаване на температурата (оттук и името: „piros“ на гръцки е „огън, топлина, генао“ - „генерира“). Конвенционално приложена доза, избрана така, че телесната температура да не се повишава повече от до 37,5-38 o С; в някои случаи обаче се забелязват зашеметяващи студени тръпки и треска (до 39,5 o (С) с главоболие и болки в кръста.

Показано е, че пирогените не само стимулират излъчването на противовъзпалителни монокини: интерлевкини-1 и -6, фактор на туморна некроза и други, но също така засилва фагоцитозата, ускорява образуването на антитела, интерферонът, с други думи, показва имуностимулираща активност ( вижте по-горе относно употребата му при лечение на сифилис). Наличието на странични ефекти (включително повръщане) сериозно ограничава медицинската употреба на пирогенал като имуностимулант и се насърчава да се намерят начини за елиминиране на токсичните (пирогенни) действия пирогенал.

Когато хидролизата на пирогенал с лека киселина [Angewandte Chemie (Intl. Ed18) е отстраняване на липоиден компонент (така нареченият липид А), отговорен за токсичността на пирогенала като цяло (DC Morrison, "Бактериални ендотоксини." - в: Отзиви на Infect. Болести. - 1983 том 5, Приложение 4, PP. S733-S747).

Целта на изобретението е да осигури метод за елиминиране на пирогеналния прогеном, като същевременно поддържа неговата имуностимулируща активност, - метод, който не изисква използването на агресивна или скъпа и рядка химическа реакция и би бил точен и лесен контрол на процеса.

Целта е постигната поради факта, че разтворът на прогенот на пирогенал, запазвайки имуностимулиращата си активност, осигурявайки физико-химични ефекти върху пирогени, във воден разтвор, този ефект се реализира под формата на гама облъчване при скорост на дозата 35- 45 или 115-125 GSR, докато първоначалната концентрация на липополизахарид се приема равна на 10-100 µg/ml и като източник на гама-лъчение, използвайки кобалт-60. В предпочитано изпълнение, облъчването се подлага на официален (фармакопеен) разтвор на пирогенална концентрация от 100 μg/ml при доза от 40 или 120 kGy.

Ефектите на лъчистата енергия върху полизахаридите извън "майчините" клетки и следователно незащитеният Typhi в доза 1 Mrad причинява значително разграждане ("Radiobiology", 1970, 10, стр. 468). Знайте тогава, че намаляването на имуногенността на кръвните клетки може да бъде постигнато чрез облъчване на UV светлина в доза 120-13500 j/m 2 (приложение EPO 229830) и в процеса на облъчване на клетки на бозайници с UV светлина (280 -320 nm, между 10 до 200 j/m 2) образуват гликопротеини, проявяващи имуносупресивна (имуносупресивна) активност (заявка ЕРО 489732). От друга страна, инактивирането на вирусни замърсители на човешкия левкоцитен интерферон се осигурява съгласно патента на Руската федерация 2080877 гама-облъчване в доза 15-25 kGy.

Установихме, че облъчването на пирогенал във воден разтвор на гама-лъчение в строго определени дози, придружено от загуба на пирогенал, неговото прогресиране, като същевременно се поддържат имуностимулиращи дейности, вероятно поради отстраняване на липид а или, най-вероятно, и други фрагменти от молекула пирогенал (в полза на последната идея е дискретният характер на облъчване: или 35-45 или 115-125 kGy, докато междинните дози този ефект не се нарича). Косвено това се потвърждава от изместването на профила на имуностимулиращата активност към активирането на b-лимфоцитите, след като Hamm е x2 ">

Пример 1. Официален разтвор на пирогенал, произведен в ампули от 1 ml с концентрация 100 µg/ml, подложен на гама облъчване от източник на кобалт-60 в доза 40 kGy.

Пример 2. Продължете аналогично на пример 1 с тази разлика, че дозата се увеличава до 120 kGy.

Пример 3. При безплодни мишки-мъже с тегло 18-20 g се оценява въздействието на разтвора, получен съгласно пример 1, върху хуморалния имунен отговор към еритроцитите на овце, както се оценява по титъра на хемаглутинина в серума и продуктивните клетки на антитела ( AFC) в далака на животни, имунизирани с овчи еритроцити. Титърът на хемаглутинина и броят на KLA се определят 6 дни след имунизацията, животните, оптималната доза овчи еритроцити, т.е. 510 8 еритроцити на мишка интраперитонеално. Броят на АОК се определя по метода на слайда Кънингам вкъщи. Разтворът се прилага интраперитонеално два пъти, с интервал от два дни, в доза от 5 и 10 μg/мишка, първото въвеждане - ден след имунизацията. Средната стойност (от 12) log 2 заглавие на хемаглутинина възлиза на 8,0, а броят на спленоцитите KLA 106 е 400 $, което съответства на стойностите за пирогеналния.

Пример 4. Зайци от породата чинчила osushestvljaem/kg и три зайци бяха използвани като контрол (доза пирогени от 50 mg/kg). Ректална термометрия, произведена с помощта на електронен термометър към разтвора, след 2, 6 и 8 часа след приложението. В случай на облъчен с разтвор пирогенал съответните стойности възлизат на 38,40,2 o/39,40,4 o/38,70,8 o/38,40,8 o, а в случай на пирогенал - 38,70, 7 o/40,30,5 o/39,60,2 o/38,40,2 o .

1. Лекарство за прогенозиране на пирогенал при запазване на имуностимулираща активност, включваща физико-химични ефекти върху пирогени, във воден разтвор, характеризиращо се с това, че експозицията се извършва под формата на гама облъчване в доза 35-45 или 115-125 парцал.

2. Методът съгласно п. 1, характеризиращ се с това, че първоначалната концентрация на пирогенал е избрана равна на 10-100 µg/ml.

3. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1 и 2, характеризиращ се с това, че гама облъчването се извършва в доза от 40 или 120 kGy.

4. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1-3, характеризиращ се с това, че гама облъчването се подлага на официален разтвор на пирогенални флакони.

5. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1-4, характеризиращ се с това, че като източник на гама-лъчение се използва кобалт-60.