Резюме

ARA (C20: 4ω6) и DHA (C22: 6ω3) са преобладаващият LCP, получен чрез удължаване на веригата и десатурация на съответните основни FA, LLA (C18: 2ω6) и LNA (C18: 3ω3). LCP може условно да е от съществено значение за недоносеното бебе (1–3). Нивата на ARA са свързани с растежа на плода (4) и в ранна детска възраст (5). Недоносените деца, назначени на DHA, имат по-добра ранна зрителна острота от контролните бебета (1–3). Кърмачетата, хранени с човешко мляко, имат по-висока DHA и може (6) или не (7) да имат по-добра зрителна острота. Смята се, че по-добрите неврологични показатели на кърмачетата, които са били кърмени в сравнение с кърмачетата, хранени с адаптирано мляко, са в кърмата (8, 9). Освен това, по-високите концентрации на LCP, открити в мозъка на бебета, починали от внезапна бебешка смърт и кърмени в сравнение с подобни бебета, хранени с бутилка, показват, че има структурни разлики в ЦНС на кърмачета, хранени с DHA (10, 11 ) .

червените

МЕТОДИ

Субекти. Пациентите, които отговарят на условията за проучване, са без вродени аномалии, раждани са преждевременно и са имали тегло при раждане между 750 и 1750 g. Бебетата са дефинирани SGA или AGA според вътрематочните криви на Kloosterman (17). Всички кърмачета са започнали да се хранят с кърма при няколко часа живот и ентералното хранене се усъвършенства ежедневно, тъй като клиничните условия позволяват. Докато неговият/нейният OMM не е бил наличен, кърмачетата са получавали човешко мляко от жена донор, която е доставила възможно най-близо до датата на раждане на пациента и след приблизително същата продължителност на бременността. Това представлява рутинната практика за хранене в отделението за интензивно лечение за новородени на Ospedale Santa Chiara в Тренто, Италия. Получено е разрешение от жените донори да дарят майчиното си мляко и от родителите на новородените, включени в проучването, за приемане на донорското мляко и за вземане на проби от кръв (0,7 ml всеки път). Всички донори са били свободни от заболяване, както е определено чрез физически преглед, а анамнезата и кръвните изследвания са получени за вирус на хепатит В, цитомегаловирус и ХИВ.

Интравенозни течности под формата на 5% декстроза във вода започват само ако стомашно-чревният толеранс на малкото бебе не позволява достатъчен прием на течности или ако кръвната захар е спаднала под 2,5 mmol/L. Нито един от пациентите не е получавал парентерално хранене. Ако майката на бебето е произвеждала поне 75% от седмичната нужда от кърма (след 1-ва седмица от живота) и пациентът е получавал останалото мляко от жена донор, пациентът се е считал за кърмаче, хранено с ОММ. В случай на невъзможност на майката да произвежда достатъчно количество кърма, пациентът продължава да получава човешкото мляко на същия донор, докато е налично, и пациентът е класифициран като бебе, хранено с PHM. Всяко бебе е получавало млякото от максимум две жени, включително собствената си майка.

Данните за плазмения FA от C8 до C24 въглероден атом се изчисляват в молни проценти (тъй като процентните стойности изглежда по-добре отразяват FA състава на плазмените липиди) и в абсолютни плазмени концентрации (което може да показва по-добре притока/клирънса на хранителните липиди). Изчисленията включват факторите на отговор за всеки отделен FA, приноса на метиловата част на FA метиловите естери и количественото определяне на FA с вътрешните стандарти. Тъй като FA са дадени в мол проценти и микромоли/L, ние избрахме да представим данните само за основните FA. Данните за непълнолетния FA ще бъдат достъпни от авторите при поискване.

RBC PL FA състав. Еритроцитите след отделянето от плазмата се промиват три пъти с изотоничен разтвор на EDTA (рН 7.35) и се суспендират отново с изотоничен разтвор на пирогалол до краен хематокрит от ≅ 50%, промиват се с азот и се съхраняват при -70 ° С до анализ. Липидите бяха извлечени от клетките с модификация на метода на Folch и PL бяха разделени с колони с аминопропилова свързана фаза (21). FA метиловите естери са получени чрез трансметилиране на извлечения PL с 14% борен трифлуорид в метанол и разделени чрез капилярна газова хроматография с неполярна колона (50 m × 0,25 mm CP-Sil 5 CB, дебелина на филма 0,12 μm; Chrompack, Middelburg, Холандия), както беше съобщено по-рано (22) .

Статистически анализ. Клиничните данни са представени като групови средни стойности ± SD, а FA данните като средни стойности ± SEM. Значението беше определено на 0,05 за всички тестове. Дисперсионният анализ за повтарящи се измервания беше използван за оценка на ефекта върху FA данните (зависима променлива) на времевите точки (фактори) на изследването. Значителна разлика между времевите точки беше получена с Tukey post hoc тест. Изчисленията бяха извършени с помощта на статистическия пакет Systat, версия 5.2.

Етично съображение. Проектът беше одобрен от местните етични и научни комитети. В проучването е получено писмено информирано съгласие от двамата родители на бебетата. Само бебета, чиито майки са решили да кърмят, са били сезирани и са били помолени да участват в проучването.

РЕЗУЛТАТИ

Обемът на млякото, приемът на мазнини и приемът на основните диетични FA не се различават между новородените AGA и SGA или между кърмачетата, хранени с OMM или PHM по всяко време по време на проучването (данните не са показани).

Ефект на диетата върху плазмата и RBC PL FA. Концентрациите на плазмения PL и на няколко FA компоненти на плазмения PL се променят значително през периода на изследването (Таблица 3). Нивата на общата PL са били значително по-ниски от нивата на d 7, 14 и 28. Процентът на наситените FA е бил значително по-висок при раждането, отколкото в по-късните моменти от времето. PL LLA нараства значително и значително след раждането (както в проценти, така и в концентрация), процентът на плазмата PL ARA намалява от 15,99 ± 0,51 при раждане до 10,30 ± 0,22 на d 28. Концентрацията на плазмата PL ARA също спада от d 7 на d 28 от ученето. DHA е по-стабилна както като процент, така и като концентрация от d 7 нататък.

Повишени проценти на LLA и LNA с намаляващи ARA и DHA са наблюдавани и в RBC PL (Таблица 4). Моларният процент на DHA в RBC PL на d 7, 14 и 28 е значително по-нисък, отколкото при раждането. DHA е 3,26 ± 0,14 mol% при раждането и 2,73 ± 0,13 mol% върху d 28, стр = 0,018.

Ефект на диетата върху SE, TG и FFA. FA съставът на плазмените TG (Таблица 5) и SE (Таблица 6) също показва нарастващи нива на LLA и по-ниски проценти ARA и DHA от раждането до d 28. TG DHA (mol%) към края на проучването е около 25% на стойността при раждане и около 40% от стойността на d 7. ARA също е по-ниска с коефициент 2. Съотношението на ARA към DHA в плазмения TG при раждане е 1,1: 1 (1,91 ± 0,16срещу 1,68 ± 0,19 mol%) и след 4 седмици беше 2,6: 1 (1,02 ± 0,05 срещу 0,40 ± 0,03 mol%). Наситените FA в SE намаляват от раждането нататък. Процентът на LLA на d 28 е повече от 2 пъти по-висок от този при раждането, LNA е непроменен, но ARA и DHA намаляват стабилно през периода на изследване от 4 седмици. Не са открити разлики в плазмата или RBC FA между новородени AGA и SGA или между кърмачета, хранени с OMM или PHM по всяко време по време на проучването (данните не са показани).

ДИСКУСИЯ

Проучвания относно промените във времето на плазмата и RBC FA се предлагат при сравнително големи недоносени деца или при недоносени бебета, хранени с кърма. Повечето от тези проучвания показват, че майчиното мляко, за разлика от храненето с адаптирано мляко, осигурява постоянни нива в плазмата и еритроцитите на полиненаситените FA с дълги вериги (12, 13, 23), докато в други доклади LCP в плазмата падат под нивата на пъпна кръв преди стабилизация (24, 25) .

Надеждна информация при много малкото недоносено бебе, хранено изключително с преждевременно кърма, липсва поради широко разпространената политика за прилагане на общо парентерално хранене за променлив период от време (26). Освен това, когато започне значително ентерално хранене, което понякога е след дни или седмици от раждането, малкото бебе често получава променливи количества адаптирано мляко заедно с кърмата. Също така майчиното мляко в този момент (2 или 3 седмици след раждането), когато се храни „прясно“, може да е загубило някои от предимствата на състава, характерни за „преждевременното“ човешко мляко, или когато се съхранява замразено и се храни последователно, както е събрано, може да не доведе до „физиологичен“ прием на FA, тъй като FA съставът на човешкото мляко се променя с напредването на лактацията (27, 28) .

Успяхме да нахраним малки недоносени бебета, докато ОММ на пациента не се появи, човешко мляко от жена, която е родила приблизително след същата продължителност на бременността. Четиринадесет бебета в нашето проучване са били хранени само с техния ОММ след 1-ва седмица от живота, а осем продължават да бъдат хранени с дарена PHM.

Избрахме да представим хранителните данни на FA както като дневен прием, така и като процент на FA. Смятаме, че абсолютното количество индивидуално FA, постъпващо в тялото (особено в случая на LCP), може да бъде по-информативно от действителния процент на състава на диетата. Тъй като по-големи количества мляко се понасят след раждането и тъй като съдържанието на мазнини в недоносеното човешко мляко се повишава след раждането, приемът на по-голямата част от ФА също нараства. Приемът на основния LCP обаче остава доста постоянен след 1-вата седмица от живота. Това откритие се обяснява с по-високия прием на мляко и по-високото съдържание на млечни мазнини на d 28, отколкото на d 14 и с намаляващата концентрация на LCP в човешкото мляко с напредването на лактацията.

Въпреки сравнително постоянния прием на ARA и DHA, плазмените липиди на малкото недоносено бебе показват прогресивно намаляване на ARA и DHA през периода на изследването. Наситените FA в плазмените липиди намаляват, вероятно в резултат на намаляване на de novo синтез на тези несъществени FA от нелипидни прекурсори, преобладаващият източник на FA вътреутробно (29). Значителното увеличение на LLA и LNA в плазмените липиди през първите 4 седмици от живота може да се обясни с факта, че LLA (и може би LNA) се доставя от плацентата само в малки количества (30), но допринася за голяма част от FA в млякото. Обратно, LCP се прехвърлят за предпочитане от майката на плода, въпреки че механизмът за този трансфер все още е неизвестен. Предполага се, че той включва α-фетопротеин (31), който проявява висок афинитет към LCP (32). Тези механизми са прекъснати от преждевременното раждане и улеснения транспорт на LCP до новородените краища. При „големи“ недоносени бебета, хранени с кърма (12, 13), или при малки недоносени бебета, изследвани известно време след раждането (14), са открити относително постоянни LCP в плазмата. Въз основа на тези констатации се стигна до заключението, че храненето с кърма може да поддържа плазмени нива на LCP.

Нашите данни показват, че при малки недоносени бебета, хранени с големи количества недоносено човешко мляко с достатъчен енергиен прием, нивата на LCP на пъпната връв не се поддържат. Трябва да се подчертае обаче, че за разлика от нашите пациенти, плодът през последния триместър на бременността проявява нарастващи нива на DHA (33, 34). Намаляването на плазмените нива на LCP след раждането, както е установено в това проучване, може да представлява или активно усвояване от тъканите (всички новородени в проучването наддават на тегло към 2-рата седмица от живота) или може да представлява тенденция към ново равновесие между относително високи нива на LCP в тъканите, постигнати през вътрематочния живот и по-ниските проценти в кърмата, което вероятно съдържа ограничени количества LCP. Информацията за нивата на LCP в тъканите при тези кърмачета обаче не е налична и дали при тези диетични условия настъпва активен синтез на LCP в тъканите или дали напълно функционално поемане на LCP в тъканите би спестило изчерпването на органите, остава силно спекулативно.

Плазмените TG са най-засегнати по време на това 1-месечно проучване. DHA (мол проценти) в края на проучването е около 25% от стойността при раждане и въпреки че при раждането съотношението ARA към DHA е 1,1: 1, става 4,6: 1 след 4 седмици. В светлината на предполагаемия плацентарно-чернодробен произход на феталната плазмена TG, съставът при раждането предполага, че DHA може да бъде предоставена на плода в приблизително същата пропорция като ARA. По-високото съотношение на d 28 може да означава или диетичен дефицит, или много активно усвояване на DHA от тъканите. Трето, черният дроб може да синтезира ARA по-ефективно от DHA; разликите в степента на окисление изглеждат по-малко вероятно обяснение.