Мутациите в трипсиногенния ген (PRSS1) причиняват наследствен панкреатит при човека. Не е ясно обаче как мутантните форми на PRSS1 допринасят за развитието на заболяването. Изследвахме ефектите от експресирането на мутантни форми на човешки PRSS1 при мишки.

Методи

Ние експресирахме форми на PRSS1 с и без мутация, кодираща R122H (PRSS1 R122H), специално в ацинарни клетки на панкреаса под контрола на промотор на панкреатичен ген на пълна дължина на панкреаса. Като контроли се използват мишки, които не експресират тези трансгени. На мишките се даваха инжекции с церулеин за предизвикване на остър панкреатит или инжекции с липополизахарид за индуциране на хроничен панкреатит. Други групи мишки са били хранени с етанол или поставени на диета с високо съдържание на мазнини, за да предизвикат панкреатит. Панкреатите се събират и анализират чрез хистология, имуноблоти, полимеразна верижна реакция в реално време и имунохистохимия. Трипсиновата ензимна активност и химотрипсиновата ензимна активност бяха измерени в панкреатични хомогенати. Събира се кръв и се измерва активността на серумната амилаза.

Резултати

Панкреатите от мишки, експресиращи трансгени, кодиращи PRSS1 или PRSS1 R122H, са имали фокални области на възпаление; тези лезии са по-забележими при мишки, които експресират PRSS1 R122H. Панкреата от мишки, които експресират PRSS1 или PRSS1 R122H, има повишени нива на протеин от топлинен шок 70 и ядрен фактор (получен от еритроиди 2) - подобно на 2, и намалени нива на химотрипсин С в сравнение с контролните мишки. Повишена експресия на PRSS1 или PRSS1 R122H увеличава фокалното увреждане в панкреатичните тъкани и увеличава тежестта на острия панкреатит след инжектиране на церулеин. Прилагането на липополизахарид изостри възпалението при мишки, които експресират PRSS1 R122H в сравнение с мишки, които експресират PRSS1 или контролни мишки. Мишки, които експресират PRSS1 R122H, развиха по-тежък панкреатит след хранене с етанол или диета с високо съдържание на мазнини, отколкото мишки, които експресират PRSS1 или контролират мишки. Панкреатите от мишки, които експресират PRSS1 R122H, са имали повече увреждания на ДНК, апоптоза и отлагане на колаген и повишена активност на трипсин и инфилтрация от възпалителни клетки, отколкото мишки, които експресират PRSS1 или контролни мишки.

Заключения

Експресията на трансген, кодиращ PRSS1 R122H при мишки, стимулира възпалението и увеличава тежестта на панкреатита в сравнение с мишки, които експресират PRSS1 или контролни мишки. Тези мишки могат да бъдат използвани като модел за наследствен панкреатит при хора и могат да бъдат изследвани, за да се определят механизмите на индукция на панкреатит чрез липополизахарид, етанол или диета с високо съдържание на мазнини.

Графично резюме

prss1r122h
  1. Изтегляне: Изтегляне на изображение с висока разделителна способност (208KB)
  2. Изтегляне: Изтеглете изображение в пълен размер

Предишен статия в бр Следващия статия в бр