• Цели и обхват
  • Редакционна колегия
  • Най-добри практики
  • Информация за списанието
  • Текущ брой
  • Архив
  • AD на
  • AD на
  • Информация за авторите
  • - Как да подготвим ръкопис
  • - Как да изпратите ръкопис
  • - Неща, които трябва да знаете след подаване
  • - Редакционни правила за автори
  • - Политики на списанията
  • Електронно подаване и преглед
  • Свържете се с нас
  • Търсене на пълен текст

пациенти акне

* Тези автори са допринесли еднакво за статията.

Това е статия с отворен достъп, разпространявана при условията на лиценза за нетърговско признание Creative Commons Attribution (http://creativecommons.org/licenses/by- nc/4.0), която позволява неограничено нетърговско използване, разпространение и възпроизвеждане във всякакъв вид средно, при условие че оригиналната творба е правилно цитирана.

Асоциациите между акне и съпътстващи заболявания на стомашно-чревния тракт предполагат, че микробната дисбиоза и чревната пропускливост могат да насърчат възпалителното акне, състояние, което често се управлява с перорални антибиотици.

Извършихме проучване на случай-контрол, за да изследваме микробиотата на кожата и червата при 8 пациенти с акне преди и след получаване на орален миноциклин в сравнение с контролите, съпоставени по възраст ± 5 години, пол и раса.

ДНК е извлечена от проби от изпражнения и тампони от кожата на лицето. Секвенирането на V3V4 региона на бактериалния 16S rRNA ген се извършва с помощта на Illumina MiSeq и се анализира с помощта на софтуера QIIME/MetaStats 2.0.

Пациентите с акне включват 7 жени и 1 мъж на 20 години

32. Разнообразието на Шанън не се различава значително между кожата (стр= 0,153) или червата (стр Заключение

Миноциклинът води до значителни нарушения в микробиотата на кожата и червата, включително много пробиотични видове, подчертавайки потенциала за по-целенасочено антимикробно лечение на акне.

Новите модели на антибиотична резистентност в световен мащаб поставят под въпрос използването както на локални, така и на системни антибиотици при рутинното лечение на акне. Дерматолозите пишат повече антибиотични рецепти на доставчик, отколкото всяка друга специалност 1, като повечето рецепти се дават при хронични, неинфекциозни кожни заболявания като акне и розацея 2. Многобройни проучвания показват, че продължителната употреба на антибиотици при лечението на акне не само поражда устойчивост към Cutibacterium acnes 3, 4, което води до намалена ефективност на лечението5, но също така насърчава промените в микробиотата в отдалечени места, включително гърба, раните и орофаринкса 6, 7 .

Широко се съобщава за връзки между акне и стомашно-чревна (GI) дисфункция (халитоза, стомашен рефлукс, подуване на корема и запек) 8 при юноши 8. Освен това, микробната дисбиоза в стомашно-чревния тракт се разглежда като потенциална етиология за акне в продължение на почти 90 години, тъй като Stokes and Pillsbury 9 за пръв път предполагат, че нарушенията в чревната микробиота, причинени от стрес, могат да увеличат чревната пропускливост, като по този начин водят до системно възпаление, засягащо кожата . Доказано е, че свръхрастежът на бактерии в тънките черва увеличава чревната пропускливост, докато лечението с антимикробни средства може частично да възстанови целостта на чревната граница 10. Повишената чревна пропускливост може да позволи повишено преминаване на липополизахариди (LPS) от грам-отрицателни чревни бактерии в системната циркулация 11, насърчавайки възпаление и развитие на акне лезии чрез тяхното действие върху тол-подобни рецептори (TLR) 2 и TLR4, които са значително нагорегулиран при възпалително акне 12 .

Разстройства в чревната микробиота са демонстрирани при пациенти с акне. В сравнение с контролите, пациентите с акне показват намалено разнообразие на чревната микробиота и намалено съотношение на Firmicutes към Bacteroidetes (F/B) 13. Различни изследвания, сравняващи ГИ микробиота между различни популации, дават смесени резултати, но по-голямата част от проучванията 14, 15, 16, 17 показват, че западната диета (с високо съдържание на животински протеини, захар, нишесте и мазнини и с ниско съдържание на фибри) 18 е свързан с чревна микробиота, обогатена с Bacteroidetes. Засега не е ясно дали обогатяването на чревните Bacteroidetes при лица, консумиращи западна диета, има случайна или причинно-следствена връзка в развитието на акне и какъв ефект, ако има такъв, имат антибиотиците върху нивата на Bacteroidetes в червата.

Това проучване използва амплификация и секвениране на 16S рРНК генна полимеразна верижна реакция (PCR), последвано от таксономична класификация на тези последователности, за да се оцени микробиотата на кожата и червата при пациенти с акне преди и след системно антибиотично лечение в сравнение с контролите за изследване на връзката между микробиотата и патофизиология и лечение на акне вулгарис.

Едноцентрово, наблюдателно проучване за контрол на случаите беше одобрено от Институционалния съвет за преглед на Джон Хопкинс (IRB № NA_00083373) и всички участници предоставиха писмено информирано съгласие. Участниците включват 8 пациенти с умерено до тежко акне вулгарис, както е определено от ревизираната в Лийдс система за класификация на акне (RAGS) 19, съответстваща на 8 контрола без акне. Проучването е предназначено да оцени кожата и стомашно-чревната микробиота на пациенти с акне преди и след лечение с антибиотици в сравнение с това на контролите, съответстващи на възраст ± 5 години, пол и раса. Вземането на проби от изпражненията и кожата беше завършено при първоначалното посещение на клиниката. На пациентите с акне им е предписан перорален миноциклин (100 mg два пъти дневно) и са проследени в продължение на 4 седмици, след което се повтарят вземане на проби от изпражненията и тампониране на кожата.

Критериите за включване за всички участници включват: възраст ≥18 години, настояща диагноза на умерено до тежко акне при пациенти с акне или липса на акне за здрави контроли и желание да се следват протоколите от проучването. Включени критерии за изключване: невъзможност за предоставяне на информирано съгласие; значима медицинска история или съпътстващо заболяване; текущи или наскоро лекувани (7 дни за локални антибиотици/стероиди и 2 месеца за системни антибиотици) кожни заболявания; прием на инхибитори на протонната помпа, Н2 рецепторни антагонисти, лаксативи, нестероидни противовъзпалителни лекарства, антиациди или антидиарейни лекарства в рамките на 2 седмици след записването; анамнеза за лицеви операции или козметични процедури в рамките на 6 месеца; анамнеза за хронично стомашно-чревно заболяване, захарен диабет, сърдечно заболяване или имунодефицит; история на тежка хирургия на стомашно-чревния тракт в рамките на 5 години; нежелание да се избягва измиването на лицето и козметиката за 12 часа преди вземане на проби; известна свръхчувствителност към тетрациклини или миноциклин; и бременност.

Кожни тампони бяха получени чрез енергично натриване на кожата на три предразположени към акне области на лицето (двустранни бузи, нос и брадичка) със стерилен апликатор с памучен връх. Всяка област беше отделно тампонирана за 30 секунди. След това тампоните се съхраняват индивидуално в епруветки за проби и се замразяват при -80 ℃ в рамките на 24 часа след вземането на пробата.

Комплекти за събиране на изпражнения бяха предоставени на всеки участник преди изходното клинично посещение. Субектът е събрал изпражненията от едно движение на червата в рамките на 24 часа след клиничното посещение и ги е довел до клиничното посещение. A 1

2 g част от пробата незабавно се диспергират в RNALater (Ambion, Austin, TX, USA) и се съхраняват при -80 ℃ до обработка.

След като първоначалните проби на изпражненията и кожата са получени, само пациентите с акне инициират перорален миноциклин. След 4 седмици пациентите с акне осигуряват повторни проби от изпражнения и кожа, като се използват същите процедури, както по-горе. Пациентите бяха инструктирани да върнат празните си бутилки с хапчета, за да проверят спазването на лекарствата.

ДНК екстракция и секвениране

Екстракция на метагеномна ДНК (mgDNA) се провежда от кожни тампони, както е описано по-рано 20, 21. Размразените проби бяха прехвърлени асептично в епруветки за лизиране на матрица В (MP Biomedicals, Solon, OH, САЩ). Лизозим, мутанолизин, протеиназа К и лизостафинов ензимен бактериален лизис е последван от механичен лизис, биещ топчета. mgDNA се пречиства допълнително, като се използва Zymo фекален ДНК комплект (Zymogen, Irvine, СА, САЩ). За осигуряване на качеството на ДНК са използвани спектрофотометрични измервания в системата NanoDrop (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA) и гел електрофореза. Буферираните с фосфат физиологичен разтвор отрицателни контролни екстракции бяха включени в обработката на пробата. V3V4 хиперпроменливият регион на 16S рРНК гена беше PCR амплифициран. Платформата за сдвоени четения Illumina MiSeq 300 bp (Illumina, Сан Диего, Калифорния, САЩ) беше използвана за секвениране, както беше публикувано по-рано 22 .

Бета разнообразието може да се използва за измерване на сходството в членството на екологичната общност между пробите. Използвахме анализ на основните координати на претеглените разстояния на UniFrac, за да изчислим бета разнообразие или разнообразие от проби на проби от изпражнения и кожа между всяка общност участници: контроли без акне, пациенти с акне на изходно ниво и пациенти с акне след 4 седмици антибиотици (фиг. 2 ). Три основни координати (главни координати [PC] 1, PC2 и PC3) бяха използвани за визуализиране на екологично сходство между общностите, с групиране на проби, близки една до друга по тези координати, представляващи подобен бактериален състав между тези проби. Не се наблюдава значително групиране сред кожни проби. Наблюдавано е обаче значително групиране сред пробите на изпражненията (ANOSIM, R = 0,138, стр= 0,013; dbRDA, стр= 0,003), което означава, че структурата на бактериалната микробиота на пробите на изпражненията е значително различна между всяка субектна група.

Относително разпределение на изобилието по вид

Сред кожната микробиота протеобактерии, Firmicutes и Actinobacteria доминират във всяка група с различно относително изобилие. Протеобактериите присъстват универсално при най-високо средно относително изобилие: пациенти след акне с антибиотик (51.523 ± 25.726%), контроли без акне (50.7603 ± 15.666%) и пациенти с акне на изходно ниво (50.199 ± 24.100%). В контролите без акне протеобактериите бяха последвани от актинобактерии (31.156 ± 18.160%), след това Firmicutes (13.954 ± 11.322%), докато при пациенти с акне, протеобактериите бяха последвани от Firmicutes (изходно ниво: 23.670 ± 21.412%; седмица 4: 20.196 ± 17.297 %) и след това актинобактерии (изходно ниво: 22.677 ± 15.320%; седмица 4: 20.810 ± 17.225%).

Най-разпространеният вид сред чревната микробиота във всяка група е Firmicutes (контроли: 55,228 ± 22,455%; изходни случаи: 54,648 ± 15,943%; случаи от седмица 4: 49,070 ± 8,457%), последвани от Bacteroidetes (контроли: 18,017 ± 9,528%; изходно ниво случаи: 28.207 ± 14.166%; случаи от седмица 4: 41.931 ± 8.338%) (Фиг. 3). Бактероидите бяха значително обогатени в чревната микробиота след 4 седмици антибиотици в сравнение с пациентите с акне на изходно ниво (стр= 0,033) и контроли без акне (стр= 0,001). Средното съотношение на F/B в чревната микробиота е най-високо в случаите на предиантибиотично акне (3.988 ± 5.950), последвано от контролите (3.652 ± 2.702) и случаите на пост-антибиотично акне (1.242 ± 0.425).

Относително разпределение на изобилието по видове

Най-разпространеният вид сред кожната микробиота от всяка група е последователно В. акне, с най-високо средно относително изобилие в контролната група (28,179 ± 18,557%), последвано от пациенти с акне преди (19,055 ± 15,459%) и след (14,544 ± 15,403%) 4 седмици антибиотици. Най-разпространеният вид в чревната микробиота при пациенти с акне е Prevotella copri както преди (4.719 ± 13.346%), така и след (4.768 ± 12.936%) антибиотично лечение. Най-разпространеният вид в чревната микробиота при контролите без акне беше Faecalibacterium prausnitzii (6,320 ± 5,244%).

Установени са значителни разлики в относителното изобилие както на микробни видове, така и на кожата и червата между контролите без акне, пациентите с акне на изходно ниво и пациентите с акне след антибиотично лечение (Таблица 1, 2). Изключени са видове с по-малко от 15 отчитания както в контролните групи, така и в случаите на акне, както и видове, присъстващи в 2 или по-малко отделни проби на сравнение.

Пероралните антибиотици са част от стандарта за грижи при умерено до тежко акне. Засега не е известно дали ефикасността на пероралните антибиотици при лечението на акне се дължи на системна абсорбция и действие директно в рамките на лезията на акне или индиректно чрез действие върху локалния чревен микробиом 26. В това проучване се опитахме да разберем по-добре чревната и кожната микробиота при пациенти с акне и дали това се повлиява от антибиотично лечение.

След антибиотиците кожната микробиота беше изчерпана Staphylococcus epidermidis и Prevotella nigrescens. S. epidermidis е произвеждащ биофилм грам-положителен кок, който колонизира нормалната човешка кожа и е доказано, че инхибира В. акне растеж 36 и В. акне-индуцирано възпаление в кожата 37 . P. nigrescens е чернопигментирана пръчка, открита в устната кухина, която е преобладаващ организъм при гингивит 38. Не е ясно дали изчерпването на тези организми с антибиотици е случайно или полезно при лечение на акне.

Чревната микробиота при изходните пациенти с акне в сравнение с контролите е изчерпана в пробиотични грам-положителни пръчки Lactobacillus iners 40, Lactobacillus zeae 41, и Bifidobacterium animalis 42. След антибиотиците, микробиотата на червата при пациенти с акне е изчерпана Lactobacillus salivarius, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium pseudolongum, и Bifidobacterium breve. L. salivarius и B. adolescentis са млечнокисели бактерии, често изолирани от човешкия стомашно-чревен тракт, за които се смята, че имат пробиотична активност 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 .

В проучване, изследващо ефикасността на пробиотиците за облекчаване на неблагоприятните ефекти на антибиотиците при лечение на акне, перорална пробиотична смес, съдържаща Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, и Bifidobacterium bifidum е доказано, че има синергичен ефект с миноциклин при намаляване броя на лезиите, което предполага роля на пробиотиците при лечението на възпалително акне 60. Докато антибиотиците имат важна противовъзпалителна роля при лечението на акне, трябва да се обмисли попълването на пробиотичните видове, които са изчерпани от това лечение.

Това проучване беше ограничено от малък брой участници и липса на резолюция на ниво деформация. Бъдещата работа, включваща допълнителни участници и усъвършенствани техники за последователност, би предоставила ценна информация за тази област. Освен това, нашето проучване се фокусира върху бактериалната микробиота. Ще бъдат необходими проучвания, изследващи вируси и гъбички, за да се направи цялостен профил на микробиотата при акне.

Това проучване изследва разликите в микробиотата на кожата и червата между пациенти с акне преди и след лечение с антибиотици в сравнение с контролите без акне. Пероралният миноциклин предизвиква значителни нарушения в чревната микробиота, включително нежеланото изчерпване на множество пробиотични видове: L. salivarius, B. adolescentis, B. pseudolongum, и Б. бреве. Идентифицирахме няколко пробиотични вида, които са значително обогатени в чревната микробиота на контролите без акне в сравнение с пациентите с акне, които потенциално биха могли да служат като целеви пробиотични терапии за акне: L. iners, L. zeae, и B. animalis. Разбирането на ролята на чревната микробиота при акне може да даде представа за новите начини на лечение.