Съпътстваща терапия при клинични изпитвания на лекарства
Рандомизирано, двойно-сляпо, контролирано проучване на глицерол фенилбутират при чернодробна енцефалопатия

Съпътстваща терапия в клинични изпитвания на лекарства: нейната роля, проблеми и подходи за нейното разглеждане

Тамара Йермоленко, Игор Зупанец, Татяна Сахарова

фармакологично

ВЪВЕДЕНИЕ

Уролитиазата има тенденция да се увеличава в много страни, включително Украйна, прогнозирано за по-нататъшен растеж поради наскоро променената диета и качество (консумация на стабилизатори, консерванти, оцветители, протеинова храна, сол, ниска дневна консумация на вода и т.н.), увеличена количество екология и социални фактори, влияещи пряко и косвено на човешкото здраве

Актуалността на уролитиазата се дължи на факта, че средно - 60% се диагностицират при трудоспособни хора на възраст 20-55 години. Трябва да се отбележи, че напоследък уролитиазата все по-често се наблюдава при деца. Проведените проучвания (E. V. Cherepanova 2008) позволиха да се разпределят рисковите фактори за невролитиаза в педиатрична група:

  • Фамилна анамнеза за рискови фактори на уролитиаза, урологични заболявания, особено придружени от метаболитни нарушения в камънообразуващи вещества - 68,5% от случаите;
  • Аномалия в пикочната система - 21,2% от случаите;
  • живот в екологично неблагоприятни условия - 88,5% от случаите;
  • Лошите навици на родителите (пушене, злоупотреба с алкохол) - 16,6% от случаите;
  • обременена бременност на майката - токсичност (82,7% от случаите), прием на антивирусни и антибактериални лекарства (16,6% от случаите).

Бъбречно разстройство поради тежки метаболитни нарушения: хипероксалурия (8,1-32%) и хиперурикурия (23-35,8%), хипоцитратурия (28-44,3%), хипомагнезиемия (6,8-19%) хиперкалциемия (36,7-60,9%) на различни генезис се комбинират в група с метаболитна нефропатия.

Смята се, че общата характеристика на дисметаболитната нефропатия е преобладаващото разстройство на бъбречния интерстиций с депонирани соли и по-нататъшното развитие на фиброза, нарушен трофизъм на бъбречните каналчета и др. епителни клетки на бъбречните тубули, влошаващи реабсорбцията и секрецията. Тежката кристалурия често води до образуване на конкременти.

В някои случаи обаче при пациенти с уролитиаза не се откриват метаболитни нарушения с литогенен характер. Според авторите делът на такива пациенти е доста значителен от 11 до 36%.

В допълнение, хиперкалциурията не се открива при 50% като един от важните рискови фактори за литогенезата.

Тези наблюдения могат да бъдат свързани с гликопротеиди в урината, способни да модулират образуването на зъбен камък. Тези вещества се екскретират с урината от тубуларни епителни клетки и могат да ускорят или инхибират кристалното зародиш, растеж и агрегация.

Те включват гликопротеин Tamm-Horsfall, гликозаминогликани, уропонтин, нефрокалцин, букинин. Всички тези съединения, произведени от бъбречния уротел, се екскретират в лумена на тубулите и в различна степен се включват в кристалната матрица.

Макромолекулният ефект върху литогенезата е доста сложен и се изследва активно.

Кристалните компоненти на пикочните камъни се образуват от пикочна киселина, оксалова киселина и фосфорна киселина в урината при определена концентрация на водородни йони за всеки камък, с подходящо рН на урината, този индекс е водещ рисков фактор за камъни в бъбреците.

Консервативното лечение на уролитиаза и дисметаболитна нефропатия трябва да бъде насочено към премахване на етиологични фактори и възпрепятстване на потока на урината.

Комбинираното лечение включва лекарства от различни фармакотерапевтични групи. Консервативната уролитиазна терапия включва лекарства, нормализиращи рН на урината, разтварящи камъни, противовъзпалителни, антибактериални и аналгетични лекарства. За успех тази терапия трябва да бъде систематична и продължителна. Използва билкови лекарства.

Лекарствените растения се различават по химично съединение и съдържат голям брой биологично (фармакологично) активни вещества. Спектърът на биологичната активност на лекарствените растения се определя от достатъчно вещества от различни химически класове и групи, налични в почти всички лекарствени растения (етерични масла, флавоноиди, полифеноли, полизахариди и др.).

Биологично активните вещества на лекарствените растения имат диуретично, спазмолитично, антимикробно, мембраностабилизиращо, нефропротективно и други действие. Например, Canephron N, Chophytol, Lespenephril и др. Се използват широко при лечението на бъбреците и пикочните пътища при деца.

В допълнение, биологично активните съединения на лекарствените растения намаляват протеинурията, нормализират метаболизма на азота. Така често, въпреки диуретичния ефект на билките, те са в състояние да възстановят йонния баланс.

По този начин лекарствата за лечение на бъбреци и пикочни пътища при деца трябва да имат следните видове действия: да нормализират белтъчния, азотния и електролитния метаболизъм, да поддържат рН на урината във физиологичен диапазон от стойности, предотвратяващи литогенезата, да възстановят гломерулната филтрация и тубулната реабсорбция и да покаже спазмолитична и диуретична активност, намалявайки обструкцията на пикочните пътища и увеличавайки отделянето на продукта от разпадането.

Целта на нашето изследване беше да изследва ефекта на новото оригинално лекарство Flarosukcin ("JSC SPC" Borschagivsky Pharmaceutical Plant ", Киев, серия 120207) върху електролитния метаболизъм при незрели животни с експериментална бъбречна недостатъчност.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Фларосукцинът е проучен преди това и е установено, че показва значителен ефект за нормализиране на бъбречната функция при експериментални циклични плъхове.

Влиянието му върху експерименталната бъбречна недостатъчност при незрели животни представлява интерес за изследване.

Разтвор на CanephronN (Bionorica, Германия, 0705001738 серия), често използван за детска нефрология, е използван като лекарство за сравнение.

Употребата на животни за научни и изследователски цели осигурява хуманна грижа за животните (Закон на Украйна "За предотвратяване на жестокостта към животните", 2006 г., Европейска конвенция за защита на гръбначните животни, използвана за научни изследвания и други научни цели, Страсбург, 1986 г.).

Всички проучвания са проведени в съответствие със съвременните научни стандарти, като осигуряват всички етични аспекти на хуманната грижа за животните при изследвания (доклад на Националната фармацевтична университетска комисия по биоетика № 11 от 16.11.2011 г.).

Проведени са експериментални проучвания при незрели плъхове на Vistar албиноси от двата пола, на възраст от 0,5 до 1 месец, което съответства на 2-7-годишни деца, с тегло 40-50 g. Животните имали достъп до вода и били държани на стандартна диета.

Експерименталната бъбречна недостатъчност е моделирана чрез еднократно интрамускулно инжектиране на 50% разтвор на глицерол при 10 ml/kg ("глицеролов" модел на остра бъбречна недостатъчност). Литературата съобщава, че еднократно интрамускулно инжектиране на споменатата доза глицерол при животни причинява олигурия, намалява гломерулната филтрация и тубулна реабсорбция, развива азотемия. Тези нарушения са свързани с развитие на бъбречна кортикална исхемия, подуване на извития тубулен епител, нарушение на функцията.

Изследваният Flarosukcin се прилага на животните интраперитонеално ежедневно чрез сонда в продължение на 14 дни. Този период от време е избран въз основа на литературата, свидетелстваща, че максималните промени в бъбречната функция при експериментално бъбречно заболяване са развити до 14-16-ия ден, след това към 21-24-ия ден промените са намалени, но до 28-30-ия ден - бъбречната функция беше почти напълно нормализирана.

Фларосукцин се прилага при незрели животни в две дози: 2,0 ml/kg - ефективна доза, определена в предишни проучвания при циклични плъхове, 3,2 ml/kg - доза, като се има предвид дозовия фактор, съответстващ на възрастта.

Сравнител Canephron N се прилага на животните в доза 1,0 ml/kg. Дозата на лекарството за сравнение се определя според листовката, като се взема предвид индексът на видова чувствителност от R. Rybolovlev.

Животните бяха разделени на 5 групи (n = 8): 1 - непокътнати животни; 2 - контролна патология (интрамускулно инжектиране на 50% разтвор на глицерол), 3 - патология + Фларосукцин в доза 2,0 ml/kg; 4 - патология + Фларосукцин от 3,2 ml/kg; 5 - патология + Канефрон N в доза 1,0 ml/kg.

Влиянието на изследваното лекарство върху калциевата и фосфорната хомеостаза е изследвано чрез стойности на съдържанието на калций и фосфор в кръвта и ежедневната урина, използвайки стандартния набор "Felicit-Diagnosis" (Украйна).

След като експериментът приключи, животните бяха хуманно евтанатизирани с тиопентална анестезия. Бъбрекът се претегля, последвано от изчисляване на индекса на масата.

Статистическият анализ е направен с помощта на статистическия софтуер «Primer Biostatistics», «Sigmastat» (САЩ, 1994). Статистическата значимост на междугруповите разлики беше оценена с помощта на t-разпределението на Student. Промените се считат за значими при p ≤ 0,05.

РЕЗУЛТАТИ И ДИСКУСИЯ

Влияние на фларосукцин върху калциевата хомеостаза

Известно е, че бъбреците играят ключова роля в метаболизма на калция. Бъбречната недостатъчност се характеризира с намаляване на скоростта на гломерулна филтрация и обема на филтрираната течност, поради което екскрецията на калций през бъбреците е нарушена.

Изследването разкрива (Таблица 1), че еднократното интрамускулно инжектиране на 50% разтвор на глицерол води до леко намаляване на калция в кръвта с 14,5% в контролната група по патология в сравнение с непокътнатите животни, но е в рамките на физиологичния диапазон. В същото време дневната екскреция на калций беше намалена. Калцият в урината на незрели плъхове в тази група е намален в сравнение с интактния контрол с 1,8 пъти.

Прилагането на фларосукцин в доза 2,0 ml/kg при развитие на патологията поддържа концентрацията на калций в кръвта на нивото на интактната група и в същото време увеличава екскрецията на калций през бъбреците на ниво интактна група.

Прилагането на фларосукцин в доза от 3,2 mg/kg също поддържа концентрацията на калций в кръвта на нивото на интактната група, но калцият се екскретира по-интензивно през бъбреците - с 22% по-висок в сравнение с интактната контролна група.

Сравнителният Canephron N за разлика от Flarosukcin не увеличава отделянето на калций в урината през бъбреците при експериментална бъбречна недостатъчност. Нивото на калций в урината при тази група е с 1,8 пъти по-ниско, отколкото при непокътнатия контрол към 14-ия ден от експеримента.

По този начин експерименталното развитие на бъбречна недостатъчност причинява хиперкалциурия. Изследваният фларосукцин и в двете дози допринася за повишена екскреция на калций. По този начин, дозата на Фларосукцин от 3,2 ml/kg по-интензивно отделя калций в сравнение с доза от 2,0 ml/kg, което може да доведе до развитие на хиперкалциурия.

Сравнителното лекарство не възстановява ежедневната екскреция на калций.

Влияние на фларосукцин върху фосфорната хомеостаза

Обменът на калций и фосфор е взаимосвързан. Повишеният прием на калций с храната е придружен от намалена екскреция на фосфор в урината. Повишаването на концентрацията на фосфор в кръвта очевидно се дължи на ефекта на хиперкалциемия, освобождавайки вътреклетъчния фосфор в кръвния поток. В същото време хиперкалциемията може директно да засегне бъбреците, увеличавайки реабсорбцията на тубуларен фосфор, независимо от паратиреоидния хормон. Възстановяването на физиологичното ниво на калций в кръвта при пациенти с хипопаратиреоидизъм води до повишена екскреция на фосфор в урината. Значителен приток на фосфор в експериментални животни след паратиреоидектомия предизвиква намаляване на тубуларната реабсорбция на фосфор, свързано със съпътстващо намалена концентрация на калций в кръвта. Следователно поддържането на постоянно ниво на калций може да компенсира нарушената реабсорбция на фосфор. Високият катаболизъм с повишено разрушаване на тъканите и метаболитната ацидоза са свързани с хипофосфатуриатипични за бъбречната недостатъчност.

По този начин развитието на бъбречната недостатъчност се характеризира с промени в кръвта или урината, както на калций, така и на фосфор. Следователно за изучаване на влиянието на Фларосукцин върху фосфорния баланс при незрели животни с експериментална бъбречна недостатъчност представлява интерес.

Според данните от таблица 2 съдържанието на фосфор в кръвта на контролните животни не е повишено и е в рамките на физиологичните граници. Ежедневната екскреция с урина е намалена с 2,2 пъти в сравнение с интактния контрол, т.е. експерименталното развитие на бъбречната недостатъчност е придружено от хипофосфатурия.

Фларосукцин в доза от 2,0 ml/kg при патология намалява нивото на фосфор в кръвта до непокътнати стойности и увеличава дневната екскреция в сравнение с контрола на патологията с 2,3 пъти, което съответства на интактните стойности.

Фларосукцин в доза 3,2 ml/kg увеличава екскрецията на фосфор през бъбреците с 2,7 пъти в сравнение с групата патология и с 24% по-интензивно в сравнение с интактния контрол.

Сравнителният Канефрон N, прилаган при бъбречна недостатъчност, показва подобен ефект, поддържайки кръвния фосфор на непокътнато контролно ниво. Екскрецията на фосфор в урината обаче не е възстановена, което корелира с данните, получени при изследването на влиянието на лекарството върху екскрецията на калций в урината.