Хепатопротективните и метаболитните ефекти на диетичните соеви фитоестрогени срещу хиперкалоричната диета при циклични женски плъхове-албиноси се медиират чрез естрадиолови рецептори бета

Omnia E. Kelany 1, Howayda E. Khaled 2, Amal M. El-Nahla 3, Heba M. A. Abdelrazek 3 и Mohamed M. Abdel-Daim 4

метаболитни

1 Катедра по клинична патология, Факултет по ветеринарна медицина, Университет Суецки канал, Исмаилия, Египет.

2 Катедра по зоология на факултет, науки, Суецки университет, Египет.

3 Катедра по физиология, Факултет по ветеринарна медицина, Университет Суецки канал, Исмаилия, Египет.

4 Фармакологичен факултет на Факултет по ветеринарна медицина, Университет Суецки канал, Исмаилия 41522, Египет.

Резюме

Това проучване има за цел да оцени хепатопротективните ефекти на диетичните соеви изофлавони (26%), подклас на фитоестрогените, срещу чернодробни влошения, предизвикани от хиперкалорична диета при циклични женски плъхове Wistar за 30 дни. Общо 32 циклични женски плъхове Wistar бяха разделени по равно на контролни; (хранени с казеинова хиперкалорична диета), а другата група е получавала соя (26%), хранена с хиперкалорична диетична група в продължение на 30 дни. Определят се седмичен прием на храна и наддаване на телесно тегло, серумен липиден профил, лептин, чернодробни GSH и MDA. Бяха определени също чернодробно хистопатологично изследване и имунохистохимия на съдържанието на чернодробни рецептори ERβ. Седмичният прием на храна и наддаването на телесно тегло са били значително (P Ключови думи

ERβ; GSH; Изофлавони; MDA лептин; черен дроб;

Kelany O. E, Khaled H. E, El-Nahla A. M, Abdelrazek H. M. A, Abdel-Daim M. M. Хепатопротективни и метаболитни ефекти на диетични соеви фитоестрогени срещу хиперкалорична диета при циклични женски плъхове-албиноси се медиират чрез естрадиолови рецептори бета. Biomed Pharmacol J 2017; 10 (3).

Kelany O. E, Khaled H. E, El-Nahla A. M, Abdelrazek H. M. A, Abdel-Daim M. M. Хепатопротективни и метаболитни ефекти на диетични соеви фитоестрогени срещу хиперкалорична диета при циклични женски плъхове-албиноси се медиират чрез естрадиолови рецептори бета. Biomed Pharmacol J 2017; 10 (3). Достъпно от: http://biomedpharmajournal.org/?p=16353

Въведение

Многобройните проучвания при хора и гризачи показват, че ER са основни медиатори на действието на естрогена върху метаболизма на глюкозата и липидите. 10,11 Освен това преките и косвените ефекти на естрогена върху затлъстяването са широко докладвани, тъй като той действа чрез апетит или модулация на енергийните разходи чрез контролиране на отделянето на някои хормони като лептин. 11.

Окислителното увреждане се предизвиква от свободните радикали, силно реактивни молекули, произведени по време на клетъчния метаболизъм, и упражняват вредното си въздействие върху протеини, липиди и ДНК в зависимост от възрастта. Те причиняват множество заболявания, като възпаление, рак, артериосклероза, хипертония и захарен диабет. 13

Напоследък проучванията показват значението на ER β като основен регулатор на метаболитните заболявания. Потенциалността на ERβ селективните лиганди да компенсират затлъстяването не е ясна. Следователно целта на това проучване е да изясни хепатопротективния ефект на соевите изофлавони (генистеин и даидзеин) при циклични женски плъхове Wistar по отношение на чернодробната експресия на ERβ. Освен това потвърдете тяхната роля за облекчаване на чернодробния оксидативен стрес, освен отдалечения ефект на соевите изофлавони върху апетита и секрецията на лептин.

Материали и методи

Животни

Общо 32 възрастни циклични женски плъхове Wistar с тегло 190-200 g са закупени от Helwan Lab Animal House, Helwan, Египет. Те са били държани в метални клетки 4 плъха/клетка. Те се поддържат при естествен светлинен ритъм през деня и при стайна температура с достъп до храна и вода ad libitum. Животните са държани в продължение на 2 седмици, за да заявят преди началото на експеримента с диетично хранене на базата на казеин.

Вземането на проби и лечението на всички животни са в съответствие с насоките за употреба и грижи за животните, одобрени от комисията по етика на научните изследвания към Факултета по ветеринарна медицина, Университет Суецки канал.

Експериментален дизайн

Цикличните женски плъхове Wistar бяха разделени на две групи; Група I: контролна група, n = 16 жени, те са били хранени с хиперкалорична дажба на базата на казеин. Група II: n = 16 жени са получавали хиперкалорична соева диета, съдържаща 26% соя. Съотношението калорични протеини както за контролната, така и за диетата със соеви изофлавони са еднакви. И двете експериментални диети бяха предложени за 30 дни.

Диетичен анализ на изофлавони

Диетичните изофлавони, генистеин и Daidzein, бяха определени след извличането им от двете експериментални диети (контролна и соева) според Thiagarajan et al. 14.

Прием на храна и наддаване на телесно тегло

Определен е средният седмичен прием на храна (грам/седмица) и наддаването на телесно тегло (грам/седмица).

Вземане на проби от кръв и тъкани

След 30-дневно третиране експерименталните плъхове се поставят цяла нощ на гладно и се претеглят. Четири животни, представляващи всеки етап от еструсния цикъл/група, бяха умъртвени под въздействието на хлороформна анаетезия за получаване на кръв. Отделените серуми се поддържат при -20 o C за оценка на липидния профил и лептиновия хормон.

Пробите от черния дроб бяха изрязани от 4 жени/група за всеки етап от естросния цикъл и разделени на две части. Първата част се поддържа при -80 o C до получаване на чернодробен хомогенат за редуциран глутатион (GSH) и малондиалдехид (MDA). Останалата част е потопена в 10% неутрален буфериран формалин за хистопатологично и имунохистохимично изследване.

Липиден профил

Серумните нива на общия холестерол (TC) (ELITech Diagnostic, Франция), триглицеридите (TG) (ELITech Diagnostic, Франция) и холестерола на липопротеините с висока плътност (HDL) (Stanbio Laboratory, САЩ) са измервани според Tietz. 15 Серумният липопротеин с ниска плътност (LDL) се изчислява по формулата на Friedwald, описана от Davidson и Rosenson. 16.

LDL-C = Общ холестерол- (триглицериди/5 + HDL-холестерол)

Ниво на плазмен лептин

Концентрациите на плазмен лептин бяха анализирани с помощта на търговски ензимно свързан комплект за имуноанализ на плъхове (код № 27295, IBL, Япония) съгласно инструкциите на производителя.

Намалена глутатион активност

Активността на GSH в чернодробния хомогенат се изследва калориметрично, като се използва BioVision, USA комплект при абсорбция 412 nm. 17

Оценка на малондиалдехид

Съдържанието на MDA в чернодробния хомогенат се изследва калориметрично при абсорбция 532 nm, като се използва BioVision, търговски комплект САЩ 18

Хистопатология

Фиксираните чернодробни срезове с формалин се обработват при използване на стандартни хистопатологични процедури съгласно Bancroft et al. 19.

Имунохистохимия

Черният дроб се нарязва на 4 μm секции, след което се монтира върху положително заредени предметни стъкла. Първично ERβ антитяло (кат. № RB-10658-R7, Thermo Scientific Co., UK) е използвано за IHC според Bancroft and Cook. 20 За количествен анализ, интензитетът на имунореактивните части се извършва с помощта на анализатор на изображения (програма Image J). От всеки слайд на двете експериментални групи бяха избрани седем произволни полета. Във всяко поле се анализира интегрирана плътност (IntDen) от осем произволни части и средната стойност за тях се изразява като поле Int Den. 21.

Статистически анализ

Всички данни в настоящото проучване са изразени като средно ± SE. те бяха подложени на студентски T тест с помощта на софтуера GraphPad Prism (Версия 5.01, САЩ). Критерият за вероятност за значимост е P> 0,05 и P 22 и Ebaid et al. 23 Намаляването на приема на храна може да се дължи на потискащото апетита действие на естрогена 24, тъй като диетичните фитострогени намаляват приема на храна и следователно намаляват телесното тегло. Намалението предполага, че естрогенното хормонално действие на соевите изофлавони, което е от полза за регулирането на телесните мазнини. Следователно нивото на лептинов хормон, което се произвежда от мастна тъкан, е намалено. Лептиновият хормон влияе на нивата на хипоталамусния невропептид Y, който регулира поведението при хранене. 25

Соевите изофлавони значително (P 30 Взети заедно, депресията в TG и TC, както и намалените чернодробни мастни промени, това ни позволи да повярваме в прякото влияние на соевите изофлавони върху адипоцитите, които са основният източник на лептин. 31 Освен това соевите изофлавони особено генистеин инхибира някои ензими в адипоцитите, което намалява тяхното производство на лептин въпреки непроменената генна експресия.