Изследователска статия том 9 брой 3

кефир

Чаниф Махди

Проверете Captcha

Съжаляваме за неудобството: предприемаме мерки за предотвратяване на измамни подавания на формуляри от екстрактори и обхождане на страници. Моля, въведете правилната дума на Captcha, за да видите имейл идентификатор.

Факултет по математически и естествени науки Университет Бравиджая, Индонезия

Кореспонденция: Чаниф Махди, Факултет по математика и естествени науки, Университет Бравиджая, Индонезия

Получено: 20 февруари 2018 г. | Публикувано: 29 юни 2018 г.

Цитат: Mahdi C. Комбинираният ефект на суроватъчен кефир и домат (Solanumlypopersicum) върху експресията на тумор некротизиращ фактор алфа (TNF- α ) и хистопатология на бронхиоли при плъхове (Rattusnorvegicus) модел на астма, индуциран от овалбумин и липополизахарид. J Рак Предишна Curr Рез. 2018; 9 (3): 159-162. DOI: 10.15406/jcpcr.2018.09.00341

Симптомите на астма могат да се характеризират с задух и кашлица, причинени от стягане на мускулите около дихателния канал, възпаление, болка, подуване, свиване на бронхите и прекомерна секреция на слуз в органа на белодробната лигавица. Факторите, които засягат астмата, включват пол, наследственост, околна среда (дразнител, цигарен дим, замърсяване на въздуха и климатични промени) и алергени Foster et al, 5 (Alexander, 2006). Един от алергените е овалбуминът, който е основният протеин на яйчен белтък (54%) като материал за сенсибилизация към Th2 имунните отговори за активиране на В клетки в плазмени В клетки, които произвеждат IgE E. IgE се свързва с мастоцитите, причинявайки дегранулация на мастоцитите и произвежда възпалителни медиатори като хистамин, цитокини, простагландини и левкотриени. Nisbet и сътр. 6 Продуктът с възпалителни медиатори ще причини възпаление, което може да доведе до увреждане на бронхиолите и да увеличи производството на провъзпалителни цитокини като TNF-α Noble, 2000, PDPI. 7 В момента лечението на астма се извършва чрез използване на бронходилататорни лекарства като салбутамол (албутерол), протеренол (орсипреналин), тербуталин и фенотерол. Но употребата на тези химически лекарства има някои странични ефекти, наред с други, хипертония и преждевременна остеопороза Gunawan et al. 8

Доматът (Solanumlycopersicum L) е плод, който съдържа витамини А и С, минерали, фибри, желязо, фенолни съединения, каротеноиди и биофлавоноиди (ликопен, α и ß-каротин). Витамин С и ликопен действат като имуномодулатор, антиоксидант или чистач на свободни радикали поради външни стресови фактори като алергени Canene-Adam, et al. 9 Кефирът е функционална храна, която съдържа бактериите и дрождите като пробиотик, който може да повиши функцията на имунната реакция на лигавицата през тялото, като произвежда антитела Suhartanti. 10 Доматеният сок, ферментирал със суроватка, се очаква да подобри ефективността на съдържанието на домати и да произведе биоактивни пептиди, така че лесно да се абсорбира от тялото.

Следователно, това проучване е проведено, за да се оцени ефектът от комбинация от суроватъчен кефир и домат (Solanumlypopersicum L.) като терапия за астма, която може да намали честотата на възпаление, водеща до намалена експресия на цитокини TNF-α и подобряване на изобразяването на хистопатологични бронхиоли.

Инструменти и материали

Оборудването, използвано в това изследване, включва лабораторни палта, места за ядене и пиене на плъхове, работа с тъкани, спринцовка 1 ml, спринцовки 3 ml, скалпел, острие, ножици остри, остри ножици-тъпи, пинсети анатомични, пинсети chirurgis, дъска хирургична, игла, пекарско стъкло, саксии орган, обектно стъкло, покривно стъкло, вихър, сравнете Omron Compressor Nebulizer, микроскоп (Olympus BX51) и везни.

Материали, използвани в това проучване са бели плъхове (Rattusnorvegicus) щам Wistar с тегло между 150-200грама на възраст 8-12 седмици, овалбумин (Sigma-Aldrich), LPS1435/1449 на бактерията Porphyromonasgingivalis, физиологичен разтвор, AlOH3, PBS, дестилирана вода, първично антитяло (Плъх моноклонален анти-TNF-α), етанол (70%, 80%, 90%, абсолютен), ксилол, парафин, оцветители хематоксилин еозин, заешки анти-плъх TNF, SA-HRP, суроватъчен кефир и домати.

Работна процедура

Лечение на животни

Животински модели на астма, който се използва, е бял плъх (Rattusnorvegicus) мъжки щам Wistar, получен от звеното за експериментално развитие на животните (UPHP) UGM Yogyakarta на възраст 8-12 седмици и с тегло между 150-200 грама и е получил сертификат за поведение, достоен за Комитет по етика Изследване на UB № 605 -KEP-UB.

Индукция на астма

Подготовка на модел на астма при животни, проведена чрез добавяне на овалбумин (OVA) до три пъти. Предаването на OVA I, проведено интраперитонеално с 1,5 mg AlOH3 в 200 ml PBS на ден 0 след аклиматизация и приложение на OVA II интраперитонеално на ден 14, OVA III се дава чрез вдишване на ден 21 с помощта на прозрачна тръба, която е свързана към Сравнителен компресорен пулверизатор Omron. Лечението на астматични задействания се извършва с пулверизиран OVA в 0,9% NaCl в доза 1 mg/ml. Инжектирането на липополизахарид (LPS) на грам-отрицателни бактерии е интракулкулер Horpyromonasginggivalis, пренасян от 1 g/200grBB върху лявата горна клетъчна гингивална сулкулна мишка 10 и 11. LPS от грам-отрицателни бактерии Phorpyromonasginggivalis може да се използва за обостряне на астма Utomo. 11.

Комбинирана терапия на суроватъчен кефир и приготвяне на домати

Суроватъчен кефир, направен с помощта на 1 литър семена от прясно мляко кефир от 50 унции Suhartanti, 10 след това ферментира при стайна температура в продължение на 2 дни. След като ферментиралият кефирен слой се формира от три слоя, които след това ще се прецедят и вземат част възли са част от суроватъчен кефир. Доматеният сок се прави, като доматите се поставят в блендера с 600 грама домат, след това се прецеждат и се приема доматен сок. След като това е направено, комбинация от суроватъчен кефир и домати в съотношение 1: 1 и след това се извършва инкубация в продължение на 3 дни, докато излезе бистрата течност, след което се филтрира.

Процедура за предоставяне на комбинирана терапия на суроватъчен кефир и домати

Лечението със суроватъчен кефир и комбинация от домати се прилага перорално чрез използване на стомашен зонд на експериментални животни с обем за съхранение на групата на астмата е 1 ml/200grBB, 1,5 ml/200grBB и 2 ml/200grBB. Лечението се провежда веднъж дневно в продължение на 14 последователни дни.

Измерване на експресия на фактор на туморна некроза алфа (TNF α)

Отлагането на белодробни органи на плъх в 10% разтвор на формалин. Приготвянето на препарати за имунохистохимия включва процес на дехидратация, изчистване, вграждане, разделяне, залепване върху стъклени предмети и имунохистохимично оцветяване. Експресия на TNF-α върху белодробни имунохистохимични препарати бяха наблюдавани и фотографирани при 400-кратно увеличение с 5 зрителни полета за всяка група. Изчислен процент на експресия на TNF-α на поле за всяка група, проведена със софтуер за имунно съотношение. Анализ на количествени данни от изследвания с помощта на Microsoft Office Excel и SPSS за Windows тест One Way ANOVA дисперсионен анализ, последван от тест на Tukey с процент на грешка от 5%.

Подготовка за наблюдение на хистопатологични бронхиоли

Резултатите от хистопатологичните бронхиоли подготвят визуално наблюдение с помощта на микроскоп Olympus BX51 с увеличение 400x. Наблюдавани са раздели на бронхиолис, съставляващи епителни промени и дебелина на гладката мускулатура на бронхите.

Ефект на комбинация от суроватъчен кефир и домати срещу експресия на TNF-α

Резултатите от измерванията на TNF-α експресионни бронхиоли при плъхове (Rattusnorveegicus) след получените данни се изчисляват, както е показано в Таблица 1. Повишената експресия на TNF-α в положителна контролна група показва по-високо активиране на клетките с противовъзпалителна роля в възпалителен процес, който възниква в отговор на индуцирането на OVA и LPS от грам-отрицателни бактерии. Активността на възпалителните клетки, причинена от излагане на липополизахарид и овалбумин, предизвиква реакционна фагоцитоза от макрофаги и неутрофили. Процесът на фагоцитоза ще увеличи свободните радикали реактивни кислородни видове (ROS).

Група

Средно изражение на TNF-α

Повишена експресия TNF-α срещу отрицателен контрол

Редукционен израз TNF-α срещу положителен контрол