Kyeong-Ok Choi

1 Катедра по хранителни науки и технологии, Университет Седжонг, Сеул, Корея.

прах

Инае Лий

1 Катедра по хранителни науки и технологии, Университет Седжонг, Сеул, Корея.

Sae-Yeol-Rim Paik

1 Катедра по хранителни науки и технологии, Университет Седжонг, Сеул, Корея.

Донг Ън Ким

1 Катедра по хранителни науки и технологии, Университет Седжонг, Сеул, Корея.

Jung Dae Lim

2 Катедра по билколекарски ресурси, Национален университет Kangwon, Chuncheon and Samcheok, Gangwon, Корея.

Wie-Soo Kang

3 Колеж по биомедицински науки, Национален университет Kangwon, Chuncheon and Samcheok, Gangwon, Корея.

Sanghoon Ko

1 Катедра по хранителни науки и технологии, Университет Седжонг, Сеул, Корея.

Резюме

Въведение

По време на менопаузата загубата на естествена функция на яйчниците често води до развитие на ендокринни нарушения, които в крайна сметка водят до сериозни последици за здравето на жените. По време на менопаузалния преход синтезът на яйчниковите хормони като естроген и прогестерон постепенно намалява, докато секрецията на гонадотропни хормони, включително фоликулостимулиращ хормон (FSH) и лутеинизиращ хормон (LH), се увеличава; следователно преобладават симптомите на менопаузата. 1 Основните симптоми на менопаузата са горещи вълни, нарушение на съня, болки в ставите и умора. Освен това често се наблюдават разстройства като остеопороза, сърдечно-съдови заболявания и емоционална тревожност. 4,5 Остеопорозата е от особено значение при жените поради намалените нива на естроген, което води до дисбаланс между костната резорбция и костния синтез, последвано от костна загуба и фрактури. 6 За да се намалят симптомите на менопаузата, хормонозаместителната терапия обикновено се предписва само с естроген или в комбинация с прогестерон. Тези хормони обаче често са придружени от странични ефекти, като ендометриална хиперплазия, маточно кървене и рак на гърдата. 7,8 Следователно растителните лекарства стават все по-популярни, тъй като са склонни да смекчат симптомите с по-малко странични ефекти.

Коренът на Angelica gigas (Umbelliferae) традиционно се използва в корейската народна медицина като тоник и за лечение на анемия и други често срещани заболявания. Има също така съобщения за антибактериални и антиамнестични ефекти, инхибиране на ацетилхолинестеразата, депресия на сърдечната контракция, активиране на протеин киназа С и антитуморна активност срещу ракови клетки на саркома. 10 Въз основа на терапевтичния му потенциал са положени усилия за изолиране на активните съединения от това растение, което води до изолирането на няколко кумаринови съединения. 11 Съобщава се, че кумарините, като декурсин и декурсинолов ангелат, са основните активни съединения на корена на A. gigas (корейска ангелика). 12 Наскоро се съобщава също така, че декурсинолът и декурсинът проявяват значителна невропротективна активност срещу индуцирана от глутамат невротоксичност в първични култури на кортикални клетки на плъхове и проявяват мощни нови антиандрогенни сигнални дейности in vitro. В допълнение, няколко проучвания разглеждат ефектите на декурсина и неговите производни върху превенцията и смекчаването на хронични разстройства на здравето. 14 Добре известно е, че кумариновите производни имат естрогенна активност, тъй като се свързват с вътреклетъчните рецептори за естрадиол и прогестерон. 15,16

Следователно, ефектът от размера на частиците на прах от корейска ангелика трябва да бъде оценен. Особено промените в нивата на хормоните на яйчниците и рискът от остеопороза in vivo представляват интерес, когато прахове от корейска ангелика с различни размери се прилагат перорално на животни. Овариектомиран експериментален плъх, предизвикан от менопауза, е добър животински модел за изследване на ефекта на размера на корейската ангелика на прах върху промените в яйчниковите хормони и костните характеристики. В настоящото проучване естрадиол, прогестерон, LH и FSH в кръвния серум и костните характеристики, като серумна тотално алкална фосфатаза (TALP), серумна костно-алкална фосфатаза (BALP), костна минерална плътност (BMD), скованост на костите и костната хистология се оценяват при овариектомирани плъхове, хранени с прах от корейска ангелика с различни размери.

Целите на това проучване бяха да се подготви ултрафин корейски прах от ангелика и да се определи ефектът от различни по размер корейски прахове от ангелика върху промяната в хормоните на яйчниците, като естроген, прогестерон, LH и FSH и експериментални параметри на остеопороза, като серум TALP, серумен BALP, BMD, скованост на костите и хистология на костите при плъхове с яйчници.

Материали и методи

Приготвяне на различен по размер корен A. gigas прах

Грубо фрезоване

За грубо смилане е използвана щифтова дробилка (JIC-P10-2; Myungsung Machine, Сеул, Корея), снабдена с сито с 30 меша. Изсушените корени на A. gigas Nakai, събрани от района на Джин-бу (Корея), се смилат на 112 g, за да се постигне необходимия размер на частиците. Смленият прах се фракционира с помощта на сито-шейкър (CG-213, Ro-Top, Chunggye Industrial Mfg. Co., Сеул, Корея), снабден със серия стандартни сита (Φ 20 cm). Праховете се пропускат през ситата с размер на окото от 300 μm и отхвърлените частици се смилат отново с щифтовата трошачка. Този процес на прахообразна фракция с помощта на ситовия шейкър позволява получаването на възпроизводими проби с подобно разпределение на размера на частиците. Фракционираните прахове се съхраняват в ексикатор при 25 ° С преди по-нататъшно ултрафино смилане.

Ултрафинно фрезоване

За получаване на ултрафин прах се използва ултрафина въздушна мелница (Turbo Mill, HKP-05; Korea Energy Technology, Сеул, Корея). Приготвените по-рано груби прахове се пулверизират в свръхдисперсни прахови частици с размери в диапазона от 0,1-50 μm в камерата за мелене с охлаждаща риза (-10 ° C до 25 ° C). Скоростта на подаване и периферната скорост на работното колело в зоната на смилане бяха фиксирани съответно на 3 kg/h и 100 m/s. Едновременно с това центробежна система за класификация на въздуха класифицира праховете в зависимост от размера на частиците. В тази система, когато размерът на частиците на праховете е достатъчно намален, за да премине през класификационен отвор, частиците се транспортират до изход; в противен случай частиците остават в зоната на смилане. Полученият ултрафин корейски прах от ангелика се съхранява в ексикатор до употреба.

Високоефективен анализ на течна хроматография на екстракти в различен по размер корен на прах от A. gigas

Един грам прахове от корен от корейски ангелика с различни размери се смесва с 20 ml дестилирана вода. След това смесите се поставят във водна баня при 95 ° С в продължение на 3 часа при разбъркване, за да се получат екстракти от гореща вода от праховете на корейската ангелика. Смесите се филтрират, за да се разделят супернатантите и утайките. Супернатантите се сушат във вакуум-изпарител (екстракти от корейска ангелика).

За количествен анализ на екстракти от корейска ангелика се използва високоефективна течна хроматография (HPLC; LC-20AT, Shimadzu Scientific Instruments, Токио, Япония); условията на работа са показани в таблица 1. Разтворите с 5, 10, 20 и 40 μg/mL декурсин и декурсинолов ангелат се приготвят за начертаване на техните калибрационни криви. Всеки разтвор се инжектира и следващата хроматограма се записва; пиковите области на декурсин и декурсинолов ангелат се преобразуват в съответни концентрации.

маса 1.

Инструментални и експлоатационни условия за анализ на декурзин и декурсинолов ангелат чрез високоефективна течна хроматография