Непряка имунофлуоресцентна локализация на мултирезистентен асоцииран протеин 2 (Mrp2) при 14-седмични контролни и затлъстели плъхове Zucker (ZR). Замразени чернодробни секции от контрола (A) и затлъстяването (B) ZR бяха използвани за оценка на качественото разпределение на Mrp2 чрез индиректна имунофлуоресценция, както е описано в материал и методи.

Оценка на потенциалните механизми на регулиране на Mrp2 при плъхове със затлъстяване Zucker

жлъчката

В допълнение към намаляването на Mrp2, функционалните увреждания на Bsep се предлагат от нашите резултати. Намалена базална и максимална секреция на жлъчна сол в жлъчката се наблюдава при затлъстели животни, въпреки сходните нива на експресия на протеин като тези, наблюдавани при контролните животни. Въпреки че основните механизми на тази промяна остават да бъдат изяснени, е много вероятно регулаторните механизми на този транспортер да играят роля при затлъстели плъхове 47, тъй като нивата на mRNA на Bsep са намалени както при осем, така и при 14-седмично ZR със затлъстяване. Необходими са допълнителни проучвания за определяне на факторите, участващи в регулацията на Bsep при затлъстяване ZR.

В допълнение към ендотоксина и цитокините, както инсулинът, така и лептинът могат да повлияят на експресията или активността на хепатобилиарните транспортери. Експериментите, включващи намаляване на инсулиновата резистентност с розиглитазон, подкрепят ролята на инсулина за поддържане на нормални нива на Mrp2, което е в съответствие с намаляването на експресията на Mrp2, наблюдавано при инсулинопенични модели на диабет. 52 В допълнение, наблюдението, че лептинът увеличава експресията на Mrp2, предполага роля за този цитокин в регулацията на Mrp2. Тъй като затлъстелите ZR проявяват лептинова резистентност, намалените ефекти на лептина могат да обяснят намалените нива на Mrp2 в този щам на плъхове.

В обобщение, настоящото проучване показва, че ZR показват нарушена секреторна функция на жлъчката с ранни холестатични промени дори преди появата на затлъстяване на черния дроб. Наблюдавани са значителни молекулярни промени в черния дроб на затлъстели плъхове, включително значително понижаване на регулирането на Mrp2. Тези функционални и молекулярни промени предполагат съществуването на намалена чернодробна способност за екскреция на ендо- и ксенобиотици при затлъстели ZR. Ние постулираме, че дефектната хепатобилиарна транспортна способност може да бъде фактор, допринасящ за това ZR да стане по-податлив на чернодробно увреждане. В момента в нашата лаборатория се провеждат допълнителни изследвания, за да се потвърди тази хипотеза. Ако случаят е такъв, холестазата може да бъде допълнителен механизъм, чрез който хепатоцитите, натоварени с мазнини, са чувствителни към развитието на некроза или апоптоза, когато са подложени на стрес. 5

Благодарности

Тази работа беше подкрепена от безвъзмездни средства от Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología a (FONDECYT # 1020641 за MA и # 1000563 за LA) и от NIH (HD20632 за FJS). Антитяло срещу плъх Bsep е любезно предоставено от д-р Бруно Стигер (Цюрих, Швейцария), а анти-плъх Mrp2 антитяло е щедър подарък от д-р Дитрих Кеплер (Хайделберг, Германия). Mrp3 срещу плъхове е предоставен от д-р Карол Сорока (Ню Хейвън, Кънектикът, САЩ).