Raffoul-Orozco Абдел Керим

1 Институт по експериментална и клинична терапия, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Авила-Гонсалес Ана Елиса

1 Институт по експериментална и клинична терапия, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Барахас-Вега Джесика Лусия

1 Институт по експериментална и клинична терапия, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Родригес-Разон Кристиан Мартин

2 Лабораторна имунология, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Гарсия-Кобиан Тереза ​​Арселия

1 Институт по експериментална и клинична терапия, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Рамирес-Лисардо Ернесто Хавиер

1 Институт по експериментална и клинична терапия, Катедра по физиология, Университетски център по здравни науки, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Рубио Арелано Еди Дейвид

3 Лабораторни фармацевтични изследвания и разработки, Катедра по фармакобиология, Точни науки и инженерен център, Университет в Гуадалахара, Гуадалахара, Мексико

Резюме

Цели

Целта на това проучване беше да се изследват ефектите на Cassia acutifolia върху затлъстяването и нивата на глюкозата при модел на затлъстяване и диабет при плъхове.

Методи

Чрез произволен подбор, 36 мъжки плъхове Wistar са разделени в две контролни групи, положителната и отрицателната контролни групи, и в четири експериментални групи, получаващи различни инфузии на Cassia acutifolia във вода ad libitum.

Резултати

Резултатите разкриват статистически значим анти-обезогенен ефект (P = 0,02), въпреки че това не се счита за клинично значимо. В допълнение, Cassia acutifolia понижава нивата на глюкозата с 30 mg/dL до 90 mg/dL (P = 0,05). Наблюдавахме обаче неблагоприятни ефекти в черния дроб, двукратно увеличение на нивата на трансаминазите (P = 0,002) и в бъбреците, намалени нива на креатинин (P = 0,001) и тези неблагоприятни ефекти нямаха жизнеспособно обяснение.

Заключение

Cassia acutifolia има антихипергликемични ефекти при затлъстели диабетични плъхове. Въпреки това, Cassia acutifolia също има неблагоприятни ефекти, така че не трябва да се прилага на пациенти.

1. Въведение

Според Световната здравна организация (СЗО) хроничните незаразни болести са най-честата причина за заболеваемост и смъртност в световен мащаб [1]. Според ENSANUT (Nutricional and Health National Test) 9,17% от възрастните мексиканци, еквивалентни на 6,4 милиона души, са докладвали предишна диагноза диабет от лекар [2]. По този начин определянето на нови стратегии за лечение на пациенти с диабет е жизнено важно.

Захарният диабет тип 2 (DM2) може до голяма степен да бъде предотвратен и лекуван с промени в диетата и начина на живот [3]. Въпреки това, сред населението на Мексико, този вид лечение не е дал очакваните резултати. Когато превенцията и нефармакологичните лечения са недостатъчни, се изискват фармакологични лечения. Повечето лечения имат добри резултати, когато са предписани правилно въз основа на времето на заболяването, дозировката и нуждите на пациента. Тези фактори обаче усложняват лечението. По този начин висок процент от пациентите не достигат желания контрол на глюкозата (т.е. нива на глюкоза ≤ 100 mg/dL) за разумен период от време, което кара много пациенти да се отклоняват от този тип лечение и да търсят алтернативно лечение [3].

В Мексико алтернативните лечения са често срещани, особено така наречените „лекарства“. Тези лекарства често са ксенобиотици, използвани за лечение или профилактика на заболяване. Някои от тези лекарства, например нутрицевтици, са мотивирали увеличените изследвания, тъй като са постигнали добри резултати. Въпреки това, редица от тези лекарства имат само анекдотични доказателства в подкрепа на тяхната ефикасност. Освен това ефектите на някои от тези лекарства могат да се отдадат на плацебо ефекта, а някои лекарства могат дори да имат неблагоприятни ефекти.

Настойка от листа от „senos de mujer“, което се превежда като женски гърди на английски и която често се нарича Senna или Cassia acutifolia, често се използва в Мексико за лечение на пациенти с DM2. Растението е ендемично за Африка и Азия, но вече може да се намери в цялото Мексико. Традиционното мислене и дори някои специалисти предлагат да се пие инфузия през деня, за да се поддържат нивата на глюкозата. Въпреки че не са правени проучвания за потвърждаване на това твърдение, анекдотични доказателства сочат, че консумацията на растението има добри резултати. Целта на това проучване е да се оцени въздействието на инфузията на Cassia acutifolia върху нивата на глюкоза при модел на затлъстяване и диабет при плъхове.

2. Материали и методи

Мъжки плъхове Wistar са получени от къщата за животни в Университетския център по здравни науки към Университета в Гуадалахара. Животните се аклиматизират за най-малко две седмици. Теглото на плъховете е 100 ± 20 g. Преди това не са получавали никакви лечения и са били без генетични промени. Плъховете се настаняват индивидуално и се поддържат в добре проветриво помещение за животни (25 - 27 ° C) с 12-часов цикъл светлина/тъмнина. Плъховете имаха свободен достъп до модифицирана диета (с високо съдържание на калории и трева от плъхове) и вода или модифицирана вода (инфузия) ad libitum.

С животните се е работило хуманно в съответствие с институционалните насоки на Комитета по етика на Университета в Гуадалахара, мексиканския официален стандарт (NOM-062-ZOO-1999) и международните насоки за използване и боравене с опитни животни.

Затлъстяването и DM2 се предизвикват при плъховете чрез хранене с хиперкалорична хранителна диета. Диетата се генерира от „Пурин, гризач за чау ®“, който беше потопен за 10 минути в свинска мас, която преди това беше разтопена при 90 ° C и след това оставена при стайна температура, за да може да се манипулира. Добавя се достатъчно захароза (10% сухо тегло), за да покрие храната напълно и да има хомогенна смес. Храната се предлагаше ad libitum.

Моделът е генериран след 10 седмици хранене, по това време плъховете са достигнали по-високо общо телесно тегло спрямо здравите контроли (> 300 g) [4]. Плъховете, които са били хранени с балансирана диета (гризач Chow ®), са достигнали средно тегло от 180 - 220 g и са били използвани като отрицателни контроли. Диетичните модификации са представени в Таблица 1. Преди, по време и след лечението, телесното тегло на плъховете се измерва със специална скала за плъхове.

маса 1

Сравнение на хранителната информация, използваната храна е диета за гризачи на гризачи, Purina ®

DietStandarHypercaloric
Калорична плътност3,1 kcal/g5,9 kcal/g
Протеини18%14%
Липиди24%38%
Въглехидрати58%48%

В модела, използван в това проучване, DM2 се определя като хипергликемия, както се съобщава в предишни проучвания, и като диагноза полидипсия, полиурия и полифагия. Записан е приемът на храна в грамове и консумацията на вода в милилитри. Освен това се събира урина и обемът се записва в милилитри. Това служи като контрол и за сравнение след лечението и се използва за изчисляване на количеството вливана касия.

Листата от растението „senos de mujer“ или Cassia acutifolia, които всъщност са плодове с форма на обвивка, са придобити от магазин за здравословни храни на дребно, опаковани са без разпознаваема марка и са били използвани от пациентите за лечение. Ножниците са идентифицирани от биолози от университета в Гуадалахара. Всяко от тях имаше между пет и шест семена и показваше характеристики на сушене на слънце.

Количеството вода, необходимо за осигуряване на инфузия на всеки от плъховете, се добавя към стъклен съд. Водата беше преварена и извадена от фурната. След това водата се разделя по групи и се добавят или целият плод (обвивка и семена), или само обвивките според необходимото тегло. Последната формулировка се дължи на това, че някои пациенти съобщават, че трябва да се добавят само „листа“. Разтворът се оставя да се охлади, преди да се предложи на всеки плъх ad libitum. Обърнете внимание, че всяка захранваща вода има мрежа, за да се предотврати парчетата от шушулката или семето да възпрепятстват потока на инфузията.

Животните бяха разделени на случаен принцип в две експериментални и две контролни групи. Експерименталните групи се състоят от две подгрупи с различни дози, с по 6 плъха във всяка подгрупа:

Група F1: 50 mg плодове в 50 ml вода

Група F2: 100 mg плодове в 50 ml вода

Група S1: 50 mg обвивка в 50 ml вода

Група S2: обвивка от 100 mg в 50 ml вода

Контролна положителна група: плъхове със затлъстяване и хипергликемия

Контролна отрицателна група: здрави плъхове (само за установяване на модела на заболяването).

Лечението се прилага според обичайната практика, използвана за пациентите. След приключване на 8-седмичната интервенция, плъховете бяха гладувани в продължение на 12 - 16 часа и умъртвени под анестезия.

Кръвни проби (приблизително 5 - 8 ml) са получени чрез сърдечна пункция. Кръвните проби се центрофугират при 1500 rpm в продължение на 10 минути и супернатантата (серум) се събира и съхранява при -20 ° C до анализ. Концентрациите на глюкоза в серума, както и нивата на аланин аминотрансфераза (ALT), аспартат аминотрансфераза (AST) и креатинин за определяне на биобезопасността, бяха определени с помощта на ензимно свързани колориметрични техники. Изчисленията, включващи резултатите, бяха извършени с автоматизиран софтуер ERBA 1100 спектрофотометър.

Резултатите бяха анализирани с помощта на SPSS версия 21. Данните са изразени като средни стойности ± стандартни отклонения (SD). U-тестовете на Mann-Whitney са използвани за оценка на модела на заболяването, а тестовете на Kruskal-Wallis са използвани за сравняване на контролните и интервенционни групи; P ≤ 0,05 се счита за статистически значима.

3. Резултати

Първо сравнихме здрави плъхове (отрицателна контрола) с нелекувани плъхове със затлъстяване (положителна контрола). Установени са статистически разлики между групите при затлъстяване, както се определя от повишеното телесно тегло, и DM2, както се определя от наличието на хипергликемия и полиадрия, полифагия и полиурия триада (фиг. 1). Наблюдавахме допълнително 50% увеличение на телесното тегло между началото и края на проучването (P = 0,004). По същия начин открихме разлики в нивата на глюкоза над 100 mg/dL (P = 0,03). За клиничната триада на диабета разликата е както статистическа, така и клинична (P = 0,004).

влияние

Виждат се различия между клиничните данни, които ни позволяват да определим наличието на затлъстяване и DM2. Стойностите са изразени като средни стойности + SD. Изходното и крайното тегло са в g, нивото на серумна глюкоза в g/dL, консумацията на вода в mL, приемът на храна в g и броенето на изхода на orine в ml, като всички те са средни стойности на ден. * = P ≤ 0,05 и ** = P ≤ 0,01.

DM2, захарен диабет тип 2; SD, стандартни отклонения.

Параметрите на биобезопасност бяха анализирани след хиперкалорична диета. За да оценим безопасността на модела на заболяването и да проследим други състояния, които могат да компрометират проучването, ние измерихме нивата на креатинин, за да проследим бъбречната биобезопасност и нивата на ALT и AST за оценка на чернодробната биобезопасност. Не открихме никакви клинични или статистически разлики (P> 0,05) в тези параметри (фиг. 2), което предполага, че моделът може да бъде приет и няма да има неблагоприятни странични ефекти върху черния дроб или бъбреците. Тези наблюдения ни позволиха да оценим биобезопасността на интервенцията в това проучване.

Не са наблюдавани статистически разлики, моделът на заболяването, използван в това проучване, е биобезопасност. Стойностите са изразени като средни стойности + SD.

SD, стандартни отклонения; ALT, аланин аминотрансфераза; AST, аспартат аминотрансфераза.