От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA при Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

От Unidad de Lı́pidos y Arteriosclerosis (FL-S., JL-M., PC, AB, JJ-P., JT, FP-J.), Servicio Hematologia (FV, RL-P., AT), болница Universitario Reina София, Кордоба, Испания, и Лаборатория за липиден метаболизъм, Център за изследване на човешкото хранене на USDA в Университета Туфтс, Бостън, Масачузетс (JMO).

Резюме

Резюме Повишаването на нивата на плазмен инхибитор на плазминогенен активатор тип 1 (PAI-1) е едно от основните хемостатични изменения при пациенти с коронарна болест на сърцето. Въпреки нарастващия интерес към фибринолитичната система, са предприети малко изследвания за определяне на ефекта, упражняван върху нея от различните хранителни мастни киселини. Изследвахме ефекта на богата на мононенаситени мазнини (MUFA) диета в сравнение с диета с ниско съдържание на мазнини (Национална програма за обучение по холестерол, стъпка 1 диета) (NCEP-1) върху факторите, свързани с коагулацията на кръвта и фибринолизата. Също така определихме ефекта на диетичния холестерол върху тези кръвни параметри. Двадесет и един млади мъжки здрави доброволци са спазвали две диети с ниско съдържание на мазнини/високо съдържание на въглехидрати (1 2. Доказано е, че фибринът стимулира пролиферацията на гладкомускулни клетки 3 и натрупването на LDL в лезиите. 4 намалено унищожаване на фибриновите отлагания, което от своя страна би благоприятствало атеротромбозата. Основният физиологичен инхибитор на фибринолизата е PAI-1, естествен инхибитор на TPA и активатор на плазминоген от типа урокиназа.5 Редица клинични проучвания предполагат, че повишените нива на PAI-1 или TPA антигенът (който основно представлява неактивни TPA/PAI-1 комплекси) представлява рисков фактор за ИБС.6 7 8 Също така е доказано, че нивата на PAI-1 са тясно свързани с TPA антигена и с няколко коронарни атеросклеротични рискови фактори, като напр. инсулин, 9 10 BMI, 10 триглицериди, 10 и систолично артериално кръвно налягане.11 PAI-1 по този начин може да играе важна роля в патогенезата на атеросклерозата. Резултати от проспективно многоцентрово проучване 12, включващо 3043 пациенти с ангина пекторис, претърпели коронарна ангиография, показват, че след 2-годишно проследяване нивата на фибриноген, антиген на фактор на Вилебранд и антиген TPA са независими предиктори на последващи остри коронарни синдроми.

Високият прием на SAT е свързан с повишена честота на ИБС, докато високият прием на MUFAs е свързан със защитен ефект. 13 14 Един от механизмите, чрез които хранителните мазнини могат да променят риска от ИБС, е чрез ефекта им върху нивата на LDL и HDL холестерол в плазмата. 15 В допълнение, други нелипидни механизми също могат да бъдат повлияни от хранителните мазнини. Проведени са малко проучвания, за да се определи влиянието на тези диетични фактори върху кръвосъсирването и фибринолизата и по-голямата част от акцента е върху ефекта на n-3 PUFAs 16 17 18 или диети с високо съдържание на въглехидрати. 19 Налице е по-малко информация за влиянието на MUFA, 20 21, основен компонент в диетата на средиземноморските страни, върху тези променливи.

Западните общества все повече осъзнават необходимостта от намаляване на плазмените нива на холестерола, за да се намали високото разпространение на ИБС. За да се постигне това намаляване, настоящите препоръки за населението като цяло са да ограничат хранителните мазнини до 22 В допълнение към ефекта си върху липопротеините, диетата с ниско съдържание на мазнини/с високо съдържание на фибри може да има благоприятен ефект върху фибринолитичната система. 19 Основната цел на това проучване беше да се определи ефектът от диета, богата на MUFA, в сравнение с диета с ниско съдържание на мазнини (NCEP-1) върху факторите, свързани с коагулацията на кръвта и фибринолизата. Също така определихме ефекта на диетичния холестерол върху тези кръвни параметри.

Методи

Субекти и протокол

В проучването са включени 22 здрави мъже (средна възраст 23,4 ± 5,6 години). Субектите бяха студенти. За всички субекти бяха извършени пълен медицински преглед и рутинни лабораторни изследвания за оценка на здравословното им състояние. Плазмените нива на холестерола по време на скрининга са 2) са 24,7 ± 3,7 (средно ± SD) и не се променят значително (> 1%) през експерименталния период. Информация за ежедневната физическа активност и 7-дневен хранителен рекорд бяха получени от всеки субект, за да се изчислят индивидуалните калорични нужди. Получено е информирано съгласие от всички участници. Този протокол беше одобрен от Комитета за човешки преглед в Софийската университетска болница "Рейна".

Дизайнът на изследването (фиг. 1) включва начален 24-дневен период, през който всички субекти консумират диета NCEP-1, изчислена да осигури време за минимизиране на циркадните вариации на фибринолитичните променливи. Бедна на тромбоцити плазма се получава чрез центрофугиране при 4 ° С за 15 минути при 3000ж. Всички анализи бяха проведени в края на изследването върху проби, съхранявани при -70 ° C, за да се сведе до минимум вариабилността на анализа.

Фибриногенът се анализира по метода на Клаус с количествения анализ на фибриногена на Ortho в автоматизиран коагулометър Koagulab 60-S (Ortho-Diagnostic). 23 TAT комплексът се определя чрез използване на ензимен имуноанализ с Enzynost TAT Kit (Behringwerke AG). 24 протромбинови фрагмента 1 + 2 бяха определени чрез използване на ензимен имуноанализ с микрокомплект Enzynost F1 + 2 (Berhingwerke AG). 25 Плазминогенът се определя от хромогенни субстрати съгласно метода на Friberger et al. 26 α2 Антиплазмин се определя от хромогенни субстрати с Coatest Antiplasmin Kit (Kabi). 27 Резултатите от плазминоген и α2 антиплазмин се изразяват като процент от обединената плазма от 20 донори. TPA антигенът беше измерен с помощта на Asserachrom ELISA Kit (Diagnostica). 28 Антигенният PAI-1 се определя количествено чрез ензимен имуноанализ за определяне на човешки PAI-1 антиген с TintElize-PAI-1 Kit (Biopool). 29 PAI-1 активност се определя количествено чрез хромогенен анализ за определяне на PAI-1 активност с комплект Spectrolyse/Fibrin PAI (Biopool). 30 Всички анализи бяха извършени в края на проучването в един цикъл за всеки индивид върху проби, съхранявани при -70 ° C, за да се сведе до минимум вариабилността на анализа.

Количественото определяне на нивата на инсулин се извършва чрез радиоимуноанализ 31 с търговски комплект (125 I-Insulin Coatria, BioMerieux). Коефициентът на вариация на интрасайса за инсулин е 5,6%.

Разделихме плазмените VLDL, LDL и HDL чрез ултрацентрифугиране. 32 Холестеролът и триглицеридите в плазмата и липопротеиновите фракции бяха изследвани чрез ензимни процедури. 33 34 Концентрациите на аполипопротеин A-I и B се определят с турбидиметрия. 35 Схемата на мастните киселини в естерите на LDL холестерола се определя в края на всеки диетичен период, както е описано по-горе. 36

Статистически анализ

Въпреки нарастващия интерес към фибринолитичната система, са предприети малко изследвания за определяне на ефекта, упражняван върху нея от различни хранителни мастни киселини. Предишни проучвания показват, че приемът на мазнини няма краткосрочни инхибиторни ефекти върху фибринолитичната система и предизвиква активиране на коагулационен фактор VII. 38 39 40 41 Няколко проучвания показват, че диетите с ниско съдържание на мазнини и фибри могат да доведат до намаляване на коагулантната активност на фактор VII. 42 43 44 Marckmann et al 19 показват, че продължителното прилагане на богата на въглехидрати и фибри диета повишава TPA-зависимата фибринолитична активност в сравнение с диета, богата на SAT, въпреки че те не наблюдават по антигенни методи промени в TPA и PAI- 1 плазмени нива. Прилагането на диета, богата на n-3 PUFAs, води до повишаване на PAI-1 в плазмата както при здрави индивиди 16 17 18 45, така и при диабетици. 46 Ефектът на диетите, богати на MUFA, върху компонентите на фибринолитичната система все още е неизвестен.

Все още не е ясен механизмът, по който инсулинът води до повишаване на плазмения PAI-1. Няколко in vitro проучвания показват увеличение на производството на PAI-1 след инкубиране на ендотелни клетки от артериален произход 55 и хепатоцелуларна клетъчна линия Hep G2 56 57 с инсулин. Освен това, неотдавнашни проучвания показват, че увеличаването на медиираното от инсулин производство на PAI-1 в хепатоцитите се дължи на стабилизирането на иРНК. 57

В заключение, консумацията на диети, богати на MUFA, намалява плазмената активност на PAI-1, което е придружено от паралелно намаляване на плазмените нива на инсулин. Това явление може да бъде свързано с по-ниската честота на ИБС в популации с висока консумация на олеинова киселина, като например в средиземноморския регион, и предполага, че заместването на SAT в диетата с MUFA би могло да бъде за предпочитане пред тяхното заместване с въглехидрати.

Избрани съкращения и съкращения

ИТМ=индекс на телесна маса
ИБС=коронарна болест на сърцето
MUFA=мононенаситени мастни киселини
MUFA диета=диета с високо съдържание на мазнини, съдържаща 22% MUFA и 115 mg холестерол на 1000 kcal
МУФАХОЛ диета=диета с високо съдържание на мазнини, съдържаща 22% MUFA и 290 mg холестерол на 1000 kcal
NCEP=Национална програма за образование по холестерол
NCEP-1 диета=NCEP стъпка 1 диета
NCEPCHOL диета=NCEP-1 диета с 290 mg холестерол на 1000 kcal
PAI-1=инхибитор на плазминогенен активатор тип 1
PUFA=полиненаситени мастни киселини
СБ=Наситените мазнини
ТАТ=тромбин-антитромбин
TPA=активатор на тъканния плазминоген

Искания за повторно отпечатване до проф. Франсиско Перес-Хименес, Унидад де Липидос и артериосклероза, болница Universitario Reina София, Авда Менендес Пидал, с/н 14004 Кордоба, Испания.

мононенаситени

Фигура 1. Схема на дизайна на изследването.

Фигура 2. Графиката показва активността на PAI-1 в плазмата в края на четирите диетични периода. Стойностите са медиани и 95% доверителни интервали. AU показва произволни единици. * Значително различен от NCEP-1 диетата (P

Фигура 3. Стълбовата графика показва средно намаление на активността на PAI-1 от NCEP до MUFA диети, според тертилите на намаляване на инсулина от NCEP до MUFA диети.

маса 1. Възраст, ИТМ и плазмени нива на липидите на 21 субекта, завършили проучването (средно ± SD)

Таблица 2. Състав на учебните диети, определени чрез химичен анализ

Стойностите са проценти на калории, освен ако не е посочено друго. Всички стойности са средни ± SD.

Таблица 3. Състав на мастните киселини на фракцията на холестероловия естер на плазмата LDL в края на всеки диетичен период

Стойностите са проценти от общите мастни киселини и се изразяват като средна стойност ± SD.

1 Значително различно от NCEP-I диетата (P 2 Значително различно от NCEPCHOL диетата (P

Таблица 4. Ефект на учебните диети върху коагулацията и фибринолитичните параметри в плазмата

F 1 + 2 показва протромбинови фрагменти 1 + 2; AU, произволни единици. Стойностите са средни и 95% доверителни интервали.

1 Вероятностни стойности, определени от Friedman ANOVA.

2 Значително различно от NCEP-I диетата (P 3 Значително различно от NCEPCHOL диетата (P

Таблица 5. Ефект на учебните диети върху плазмените липиди и липопротеиновите фракции

С показва холестерол; TG, триглицериди.

n = 21. Резултатите са изразени като mmol/L, средно ± SD.

1 ANOVA за повтарящи се мерки.