Добавете към Мендели

откриване

Резюме

Чернодробната ацил-коензим А синтетаза (ACS), карнитин палмитоилтрансфераза-I (CPT-I) и ацетил коензим А карбоксилаза (ACC) са коензими, свързани с генетичния тип затлъстяване при животински модели. Тази статия отчита използването на микрочип електрофореза (ME) с лазерно-индуциран флуоресцентен (LIF) детектор, базиран на обратна транскриптаза-полимеразна верижна реакция (RT-PCR) за откриване на амплифицираните ДНК фрагменти от тези коензими (ACS, CPT-I и ACC) в иРНК, извлечена от мишки. ДНК фрагменти в диапазона от 50 до 2652 bp се разрешават добре, като се използва тази процедура с работещ буфер (1 × TBE), 0,5% поливинилпиролидон (Mr 1 000 000) като покриващ гел и 0,7% полиетиленоксид (Mr 8 000 000) като пресяващ гел при pH 8,30 . Разделянето на трите RT-PCR продукта беше постигнато чрез ME в еднократно изпълнение в рамките на 17 s, използвайки програмирани градиенти на напрегнатост на полето (PFSG) (470 V cm -1 за 9 s, 205.8 V cm -1 за 2 s, 411.6 V cm -1 за 4 s, 117.6 V cm -1 за 2 s и 470.4 V cm -1 за 8 s). Установено е, че методът ME-PFSG е 4 пъти по-бърз от метода, използващ константно поле, и 138 пъти по-бърз от електрофорезата в плочите. Нещо повече, амплифицираните RT-PCR продукти на свързаните със затлъстяването коензими при мишки C57BL/6J бяха анализирани, като се използват само проби под микролитър.

Предишен статия в бр Следващия статия в бр

Ключови думи

Препоръчани статии

Позоваване на статии

Статия Метрики

  • За ScienceDirect
  • Отдалечен достъп
  • Карта за пазаруване
  • Рекламирайте
  • Контакт и поддръжка
  • Правила и условия
  • Политика за поверителност

Използваме бисквитки, за да помогнем да предоставим и подобрим нашата услуга и да приспособим съдържанието и рекламите. Продължавайки, вие се съгласявате с използване на бисквитки .